"RD Adherent人恶性胚胎横纹肌瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
RD Adherent人恶性胚胎横纹肌瘤细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞,消化温度是37℃;2)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度;(3)吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】1)吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液;2)吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中;3)平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟;4)弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】1)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记;2)分装:将细胞悬液吸出分装至2~3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖;3)继续培养:用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。
SW 756细胞系相关产品:G422细胞、RBL-1细胞、CCD 966SK细胞
SCC090细胞系相关产品:A673细胞、MOLM13细胞、Lewis Lung细胞
T-84细胞系相关产品:SK-RC 39细胞、HCC1500细胞、BHP10-3细胞
细胞传代方法:1:2-1:4传代,3-4天换液1次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
H2030细胞系相关产品:Molm14细胞、CALU1细胞、L 1210细胞
U373MG细胞系相关产品:TE85细胞、C127细胞、CHP126细胞
Hs 27细胞系相关产品:TE-13细胞、A101D细胞、HEP-3B2细胞
细胞生长特性:贴壁生长
RD Adherent人恶性胚胎横纹肌瘤细胞系
细胞形态特性:梭型和大的多核细胞
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
U-87MG细胞系相关产品:D341Med细胞、B16/BL6细胞、TT细胞
MDA MB231细胞系相关产品:GS-9L细胞、T-ALL1细胞、KMST-6细胞
CORL26细胞系相关产品:WM-239A细胞、KMS11细胞、MDAPC2B细胞
H-1373细胞系相关产品:HCO细胞、CHP 212细胞、MCFs细胞
HLEC-B3细胞系相关产品:MOLT 16细胞、BN-CL2细胞、MTEC1细胞
SGC-7901/DDP细胞系相关产品:CCD-841CoTr细胞、DHL5细胞、LLCPK1细胞
EBNA293细胞系相关产品:HSC-I细胞、OV-1063细胞、MiaPaCa2细胞
H-1618细胞系相关产品:PCI:SG-231细胞、JROECL 33细胞、BC-019细胞
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OCI Ly10细胞系相关产品:SCL-1细胞、HD-LM-2细胞、A2780-CP细胞
IPECJ2细胞系相关产品:EOC-20细胞、CAL-12T细胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞
RD Adherent人恶性胚胎横纹肌瘤细胞系
B16-F10-BL6细胞系相关产品:OVCAR.4细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NP69细胞
AC16 [Human hybrid]细胞系相关产品:SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞
HELA-GFP细胞系相关产品:251MG细胞、NCI-128细胞、HuPT4细胞
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293FT细胞系相关产品:Panc327细胞、BC3 H1细胞、C4-2 B细胞
ChaGo-K1细胞系相关产品:U-118 MG细胞、MDA-330细胞、alpha TC1.6细胞
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HuCCT-1细胞系相关产品:T-98细胞、AR-42J细胞、RPMI1788细胞
HCC-70细胞系相关产品:Swiss/3T3细胞、HBL100细胞、C8D1A细胞
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KPL-1细胞系相关产品:GM2219C细胞、WC00044细胞、Hs 940.T细胞
Normal Rat Kidney细胞系相关产品:526 mel细胞、HVSMC细胞、Hepa-RG细胞
Hs 746.T细胞系相关产品:SK_N_BE2C细胞、U87 MG细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞
SUM-102细胞系相关产品:H-1651细胞、NRK 49F细胞、SKN-AS细胞
YD-38细胞系相关产品:H64细胞、293-FT细胞、MS 751细胞
SK Mel 2细胞系相关产品:VK2细胞、H.Ep. No. 2细胞、GH3细胞
CA 46细胞系相关产品:D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞
M-20细胞系相关产品:HCCC9810细胞、CAL148细胞、MUVEC细胞
FDCP1细胞系相关产品:RT4P细胞、CCRF/CEM细胞、COR-L23细胞
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ROS17/28细胞系相关产品:Immortalized Human Hepatocytes细胞、MC57G细胞、IGROV-1细胞
Adeno-293细胞系相关产品:VMRC-LCD细胞、TSCC1细胞、8402细胞
H2087细胞系相关产品:MIN6细胞、HCC0827细胞、CCD-33Co细胞
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JIMT细胞系相关产品:HECV细胞、OCILY19细胞、SUPB15细胞
WERI Rb-1细胞系相关产品:LY细胞、SW1116细胞、U-343 MG细胞
Eph4 1424细胞系相关产品:HDMEC细胞、RBMVEC细胞、LC-2-Ad细胞
CL1-0细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞、NCIADR.RES细胞、PK(15)细胞
Vero 76 clone E-6细胞系相关产品:SK HEP 01细胞、JEKO细胞、SKNSH细胞
SHEP1细胞系相关产品:SKRC-39细胞、Panc-08.13细胞、Hs940T细胞
LCMS细胞系相关产品:KRC-Y细胞、Tj-905细胞、CT-26细胞
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AU-Mel细胞系相关产品:RKO-AS45-1细胞、B 95-8细胞、NCI-157细胞
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RD Adherent人恶性胚胎横纹肌瘤细胞系
RPMI 1846细胞系相关产品:AMC-HN8细胞、CMT64细胞、TE85细胞
H-2228细胞系相关产品:VB细胞、KE-39细胞、KP-N-RT-BM细胞
NR 8383细胞系相关产品:RH-30细胞、SF 539细胞、PLC8024细胞
NCM356细胞系相关产品:MDCK II细胞、REC1细胞、AK细胞
H2286细胞系相关产品:KU-812F细胞、MUVEC细胞、SuDHL 8细胞
RTMC细胞系相关产品:PL 45细胞、J-111细胞、KMH-2细胞
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L5178-R细胞系相关产品:Karpas-299细胞、NIH:OVCAR-4细胞、SRS-82细胞
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