"CNE-1 epithelioid cells人鼻咽癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
Hs 839.T细胞系相关产品:NCI-H661细胞、HEK 293细胞、HEK293-A细胞
M21细胞系相关产品:NCIH1385细胞、RKO细胞、SKCO 1细胞
SuDHL 2细胞系相关产品:DH 82细胞、Ly7细胞、H378细胞
细胞生长:贴壁
CNE-1 epithelioid cells人鼻咽癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SF 539细胞系相关产品:SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞
hTERT-RPE1细胞系相关产品:Hs821T细胞、STTG1细胞、DR2R 1610细胞
EM-3细胞系相关产品:WERI-Rb-1细胞、SUP T1细胞、CNE-2细胞
H1944细胞系相关产品:Giant Cell Tumor细胞、HFF1细胞、8505C细胞
RPMI #1846细胞系相关产品:KE37细胞、HSC4细胞、HS578T细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CNE-1 epithelioid cells人鼻咽癌细胞系
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
JROECL33细胞系相关产品:LS-411N细胞、HEK AD293细胞、OCI-AML5细胞
SK-BR-3细胞系相关产品:KMS11细胞、CAMA-1细胞、OVCAR 432细胞
J82COT细胞系相关产品:SK MES 1细胞、P3-X63-Ag 8.653细胞、SJCRH30细胞
SNU-423细胞系相关产品:CNE-2细胞、SRA01/04 (HLE)细胞、CTLA4 Ig-24细胞
PA I细胞系相关产品:GM00637H细胞、P3J.HR1K细胞、EU-2细胞
H-1672细胞系相关产品:PC3M细胞、Calu-3细胞、SK MEL 28细胞
639 V细胞系相关产品:CD18细胞、V-79-4细胞、FCCH1024细胞
CTLA4 Ig-24细胞系相关产品:LC-1-sq细胞、LC-2/ad细胞、253JB-V细胞
RS4;11细胞系相关产品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞、Colo741细胞、D10G41细胞
C22 (Clara)细胞系相关产品:EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞
CNE-1 epithelioid cells人鼻咽癌细胞系
BC-3H-1细胞系相关产品:H766T细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞、MCA 205细胞
EAHY-926细胞系相关产品:TCCPAN2细胞、RMS13细胞、RKOAS451细胞
PAa细胞系相关产品:ML2细胞、HCC2218细胞、C-8161细胞
SUM-52PE细胞系相关产品:GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞
Hs 888Lu细胞系相关产品:Ramos 2G6 4C10细胞、KP2细胞、KYSE70细胞
WM 239A细胞系相关产品:WEHI 164 TC细胞、NCI-H1672细胞、JHH-2细胞
WM 239A细胞系相关产品:WEHI 164 TC细胞、NCI-H1672细胞、JHH-2细胞
U-373-MG细胞系相关产品:MC 3T3-E1细胞、WSU-DLCL-2细胞、PANC0327细胞
SW 948细胞系相关产品:MGc80-3细胞、U-87-MG细胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞
HuH-6细胞系相关产品:CEM-C7细胞、4-1st细胞、M-1 myeloid leukemia细胞
U373细胞系相关产品:ASPC1细胞、BIC1细胞、Y-79细胞
LAN-5细胞系相关产品:GA-10细胞、HCC941122细胞、HEM-L细胞
OVCAR5细胞系相关产品:SK-NSH细胞、C3H10T1/2 clone8细胞、H524细胞
HEK293FT细胞系相关产品:U-87-MG细胞、251MG细胞、B16F10细胞
SKHEP1细胞系相关产品:Rat 1细胞、Human Liver-7702细胞、KHYG1细胞
MSB1细胞系相关产品:LIPF178C细胞、HGC-27细胞、KPL1细胞
TH1细胞系相关产品:A9(Hamprecht)细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞、SC1细胞
MM-1S细胞系相关产品:C12细胞、Human Embryonic Skin细胞、G 292 Clone A 141B1细胞
Functional Liver Cell-7细胞系相关产品:OK-WT细胞、BC-3H-1细胞、CAMA1细胞
H-2228细胞系相关产品:VB细胞、KE-39细胞、KP-N-RT-BM细胞
HCC-1143细胞系相关产品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、VMCUB-1细胞、M-07e细胞
SNU-407细胞系相关产品:HCC-44细胞、SK UT 1细胞、TE-1细胞
RD 2细胞系相关产品:SACCLM细胞、PANC-10-05细胞、COLO-HSR细胞
NCI-H2141细胞系相关产品:KTA-7细胞、Ca9-22细胞、BIC-1细胞
CTV-1细胞系相关产品:P3/NS1/Ag4-1细胞、T-98G细胞、FLS细胞
KOSC2细胞系相关产品:TALL-104细胞、SU-DHL2细胞、HGF-1细胞
DLD-1细胞系相关产品:HCC1419细胞、BGC-823细胞、LS1034细胞
NCI-H157细胞系相关产品:Tu 212细胞、SUD4细胞、CAL 12T细胞
NWA细胞系相关产品:NCI H2106细胞、OCI AML3细胞、Natural Killer-92细胞
HuNS1细胞系相关产品:HHFK细胞、MPASMC细胞、ACHN细胞
C166细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、NCI-SNU-601细胞、NCI-H847细胞
BNCL2细胞系相关产品:H647细胞、IGR.OV1细胞、U-251_MG细胞
UPCI:SCC154细胞系相关产品:PTK1细胞、Lu99A细胞、HSC3细胞
KE-39细胞系相关产品:Hs706T细胞、SUP-B1细胞、T47D:A细胞
CCRF/CEM-C7细胞系相关产品:SLMT-1细胞、COLO206细胞、SCCVII/St细胞
CNE2Z细胞系相关产品:LOU-NH-91细胞、COS-1细胞、CNE细胞
EL-4细胞系相关产品:NHDF细胞、16HBE14o-细胞、MHCC-97细胞
LLC-WRC 256细胞系相关产品:HuNS1细胞、HEEpiC细胞、MHCC-LM3细胞
DHL-16细胞系相关产品:MyLa2059细胞、NS1-Ag4细胞、ARO81-1细胞
HCC-1954BL细胞系相关产品:Walker256-TC细胞、WSUDLCL2细胞、MEF细胞
Vero 76细胞系相关产品:SK-N-BE(1)细胞、HM细胞、PG-4 S+L-细胞
MLA144细胞系相关产品:HCA7细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞、Scott and White No. 13细胞
CTLL2细胞系相关产品:HeLa-S3细胞、CCRF SB细胞、NCI-H125细胞
OVCA432细胞系相关产品:KU 19-19细胞、REC-1细胞、H-838细胞
He-La细胞系相关产品:NCI-H1703细胞、J 82细胞、THP1细胞
HCC1954-BL细胞系相关产品:HEK-A细胞、SK-MEL-3细胞、MyLa 2059细胞
MC57G细胞系相关产品:HTR8svn细胞、MIA Paca2细胞、HT144细胞
DLD1细胞系相关产品:AgC11x3A细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、Mahlavu细胞
PANC1005细胞系相关产品:H-2198细胞、N-87细胞、MOLM-16细胞
TCCSUP细胞系相关产品:DiFi细胞、FOX-NY细胞、KYSE-70细胞
WRL68细胞系相关产品:D-283细胞、H-2107细胞、LC-2/ad细胞
CNE-1 epithelioid cells人鼻咽癌细胞系
Colo-206F细胞系相关产品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、V-79细胞、NCI-H1930细胞
GP-293细胞系相关产品:Mo7e细胞、HA1800细胞、BE2C细胞
NCI-SNU-475细胞系相关产品:PANC-02-03细胞、OCI-Ly07细胞、COLO 320F细胞
J82 COT细胞系相关产品:TE-1细胞、SF539细胞、H-647细胞
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