"APRE-19 epithelioid cells人视网膜上皮细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
SW-954细胞系相关产品:HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞
SkChA-1细胞系相关产品:CMT93细胞、Human ErythroLeukemia细胞、H-211细胞
EFO 27细胞系相关产品:TU 686细胞、Kit-225细胞、JB6 [Mouse]细胞
细胞生长:贴壁
APRE-19 epithelioid cells人视网膜上皮细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SKLU-1细胞系相关产品:SK-Mel1细胞、WEHI 3细胞、D283-MED细胞
Hs819.T细胞系相关产品:SKO-007细胞、H-524细胞、NCIH2073细胞
NCI-H727细胞系相关产品:T-ALL 1细胞、NCI-H1993细胞、KG-1细胞
Kupffer细胞系相关产品:Hs-729-T细胞、HN 4细胞、SUM 190PT细胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞系相关产品:GTL16细胞、T47-D细胞、MDA-468细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
APRE-19 epithelioid cells人视网膜上皮细胞系
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
751细胞系相关产品:SK-NEP-1细胞、H-1792细胞、RIN-14B细胞
COLO-829细胞系相关产品:A-10细胞、SW48细胞、CA 46细胞
BEL/FU细胞系相关产品:KOSC-2 cl3-43细胞、HBL1细胞、RT-BM细胞
HPB-ALL细胞系相关产品:Eca 109细胞、H3396细胞、PCI-4.2细胞
HMO6细胞系相关产品:NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞
MAVER细胞系相关产品:HuH 6细胞、FL-83B细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞
L5178YR细胞系相关产品:D10细胞、L M (TK-)细胞、NCIH748细胞
Case 3细胞系相关产品:NCIH2106细胞、BGC823细胞、H1666细胞
293E细胞系相关产品:INS-1E细胞、LS 174 T细胞、SHP77细胞
Simpson细胞系相关产品:RERFLCMS细胞、TE-9细胞、UMRC-2细胞
APRE-19 epithelioid cells人视网膜上皮细胞系
HEK293-H细胞系相关产品:SKNMC细胞、OCI AML4细胞、U87MG细胞
H283细胞系相关产品:U266 Bl细胞、beta TC6细胞、Gerner 7666细胞
Glioma 261细胞系相关产品:A431细胞、KYSE450细胞、WM 115细胞
FRH-0201细胞系相关产品:LNCaP-Clone-FGC细胞、H-125细胞、SCLC-21H细胞
GM02219细胞系相关产品:KMY1022细胞、KP-2细胞、MDA 231-LM2-4175细胞
CWR22R细胞系相关产品:EAhy926细胞、A72细胞、SK_N_BE2C细胞
U-251细胞系相关产品:Hs 606细胞、293E细胞、CT26-clone 25细胞
2BS细胞系相关产品:alphaTC1 Clone 6细胞、NCI-H2030细胞、H69细胞
ECC 10细胞系相关产品:LC1-Sq细胞、HCC-2218细胞、HEEpiC细胞
SHZ-88细胞系相关产品:PF382细胞、NCIH1648细胞、Metastatic Variant 522细胞
H-23细胞系相关产品:L 363细胞、SK-N-BE(2C)细胞、NCI-H187细胞
CTX TNA2细胞系相关产品:JB-6 Cl 30细胞、USMC细胞、C-32细胞
UCLA NPA-87-1细胞系相关产品:SNU-16细胞、MHCC97-L细胞、HCC78细胞
Hs746T细胞系相关产品:CEMC1细胞、TE-6细胞、U-87细胞
T98细胞系相关产品:SUPB-15细胞、CF PAC-1细胞、MV-4-11细胞
HEK 293 c18细胞系相关产品:HBEpiC细胞、OVCAR 420细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞
NCI H345细胞系相关产品:TOV112D细胞、Earles's cells细胞、PATU-S细胞
NPA87细胞系相关产品:DU 145细胞、Sc-1细胞、SHEP1细胞
OEC33细胞系相关产品:ZR-75-1细胞、HPF细胞、Wien133细胞
SK-MEL-1细胞系相关产品:BV173细胞、ACC-M细胞、MDA-436细胞
HGC27细胞系相关产品:SK BR 03细胞、MDA-134细胞、Hep G2细胞
N1E115细胞系相关产品:ST-2细胞、Calu-6细胞、Kit225 K6细胞
AR42J细胞系相关产品:COR-L88细胞、TI-73细胞、HeLa S 3细胞
H3255_DA细胞系相关产品:HCS2/8细胞、KPL-4细胞、OCI Ly3细胞
Hk-2细胞系相关产品:B5537SKIN细胞、BT20细胞、PC-10细胞
BetaTC6细胞系相关产品:NIH-OVCAR-3细胞、Hs895.T细胞、A-172细胞
WIL2 S细胞系相关产品:OSKM-1细胞、SW-1222细胞、HCC-2218细胞
HEC1-B细胞系相关产品:HConEpic细胞、HT 1376.T细胞、GDM-1细胞
Pt K1细胞系相关产品:Ly18细胞、PZ-HPV-7细胞、H2452细胞
AX-Mel细胞系相关产品:TCMK-1细胞、OCUM-1细胞、AE 1201细胞
LC-2 ad细胞系相关产品:C17.2细胞、IMR-32细胞、SMA 560细胞
NCIH524细胞系相关产品:SDBMSC细胞、MDA-415细胞、Kit225细胞
Roswell Park Memorial Institute 8402细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-39细胞、NCI-H378细胞、CAL-33细胞
PMVEC细胞系相关产品:BC3H1细胞、FM-88细胞、RMS1598细胞
Jiyoye(P-2003)细胞系相关产品:Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、ECC1细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞
1E8-H细胞系相关产品:RPMI 7666细胞、RBSMC细胞、LNCaP细胞
SK-MES细胞系相关产品:624-mel细胞、BBE细胞、MPP 89细胞
373MG细胞系相关产品:624 MEL细胞、ARPE19细胞、HMEL细胞
EU-2细胞系相关产品:TE-11细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、NCI-H1404细胞
NW38细胞系相关产品:H1648细胞、MDA MB 361细胞、NTERA2-D1细胞
Hs 611.T细胞系相关产品:PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞、P3/X63-Ag8细胞、HPAF/CD18细胞
SK-GT-2细胞系相关产品:D-407细胞、KP-N-RT-BM-1细胞、H-774细胞
Madison lung细胞系相关产品:WEHI-279细胞、CFPAC-1细胞、K 562细胞
MyLa 2059细胞系相关产品:B16 melanoma细胞、KYSE 520细胞、mRTEC细胞
SK RC 20细胞系相关产品:OV1-P细胞、3T3-J2细胞、P3X63Ag8细胞
LS-180细胞系相关产品:COLO678细胞、ABC1细胞、K1735细胞
CHO细胞系相关产品:MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞
Cates 1B细胞系相关产品:KP2细胞、67NR细胞、A549细胞
DOK细胞系相关产品:GM12878细胞、Nthy ori 3.1细胞、NB-19细胞
Hs819T细胞系相关产品:HS-766-T细胞、U2OS细胞、INS1-E细胞
Caco-2/ATCC细胞系相关产品:NCI-H1944细胞、R D细胞、SUD4细胞
APRE-19 epithelioid cells人视网膜上皮细胞系
Hs 706.T细胞系相关产品:NUGC4细胞、HCC1438细胞、HCC-1599细胞
TE354T细胞系相关产品:A2008细胞、NCTC-929细胞、ZR75_1细胞
Panc-327细胞系相关产品:HCEC-12细胞、MDA-468细胞、Y 1细胞
BEL/FU细胞系相关产品:KOSC-2 cl3-43细胞、HGF-1细胞、H-295R细胞
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