"B16-F0 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
P3HR-1细胞系相关产品：CA-OV-3细胞、REC 1细胞、KMS11细胞
HLEB-3细胞系相关产品：MM1细胞、Ramos-2G6-4C10细胞、U266B1细胞
A549/DDP细胞系相关产品：NCI-H2029细胞、SW 948细胞、COLO320 DM细胞
细胞生长：贴壁
B16-F0 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞系相关产品：H128细胞、HASMC细胞、NCI-H1299细胞
SK-SH-SY5Y细胞系相关产品：QGY-7701细胞、SKO007细胞、RS4;11细胞
Mouse INsulinoma 6细胞系相关产品：U251MG细胞、H1436细胞、WI38细胞
HCET细胞系相关产品：NCI H295R细胞、FM88细胞、EA.hy 926细胞
HCE-T细胞系相关产品：Panc-8_13细胞、CBRH-7919细胞、HTh-74细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
B16-F0 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞形态特性：详见细胞说明书
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
MM134细胞系相关产品：H526细胞、SKOV-433细胞、KFB细胞
C2BBe1细胞系相关产品：PC3-M细胞、GT39细胞、HPAF2细胞
CORL88细胞系相关产品：H-1819细胞、Vx2细胞、MESSA/Dx5细胞
HOC1细胞系相关产品：LIXC-002细胞、H1092细胞、OVCA420细胞
HFL 1细胞系相关产品：MIA Paca2细胞、Panc 04.03细胞、HCC-1937细胞
X63-AG 8.653细胞系相关产品：LAN-5细胞、OVCAR433细胞、H-157细胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞系相关产品：NCI-H-69细胞、WI38细胞、H-292细胞
J82COT细胞系相关产品：SK MES 1细胞、P3-X63-Ag 8.653细胞、SJCRH30细胞
PANC1005细胞系相关产品：H-2198细胞、N-87细胞、MOLM-16细胞
MS 751细胞系相关产品：OVCA5细胞、BALB 3T3 clone A31细胞、NCI-H520细胞
B16-F0 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
HCC-38细胞系相关产品：KLM1细胞、KE39细胞、SW-756细胞
HL-60细胞系相关产品：Panc-813细胞、CX-1细胞、KNS62细胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞系相关产品：H2347细胞、DSL-6A-C1细胞、RIMEC细胞
BIU-87细胞系相关产品：HUT 28细胞、COLO320DM细胞、MDA-MB-468-RED细胞
HCC4006细胞系相关产品：KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
EBNA293细胞系相关产品：HSC-I细胞、OV-1063细胞、MiaPaCa2细胞
CCD 841 CoN细胞系相关产品：SUD4细胞、DF-1细胞、GM05887A细胞
WM115F细胞系相关产品：WIL2S细胞、KPL-1细胞、LLC PK1细胞
KMS-11细胞系相关产品：NOR10细胞、NCIH2106细胞、BT细胞
FU-MMT-1细胞系相关产品：KG-1a细胞、H-522细胞、SK-Mel 2细胞
SK MES 1细胞系相关产品：OVCAR.3细胞、D-283MED细胞、LNCaP C4-2细胞
EU-4细胞系相关产品：FUOV1细胞、ZYM-DIEC02细胞、HEK-293F细胞
MMAc-SF细胞系相关产品：HEB细胞、Kit-225-K6细胞、MB157细胞
BERH-2细胞系相关产品：MM1-S细胞、HL-7702细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞
GM07404细胞系相关产品：639-V细胞、Pa017C细胞、OCI/AML-5细胞
HC-11细胞系相关产品：Hca-F细胞、BT-483细胞、KATO 3细胞
NIH:OVCAR-5细胞系相关产品：Ca9-22细胞、HCT-GEO细胞、Hs870T细胞
H295细胞系相关产品：T173细胞、CMK细胞、KRCY细胞
GM02131A细胞系相关产品：B16/F10细胞、PLC-8024细胞、MDA MB 453细胞
Pt K1细胞系相关产品：Ly18细胞、PZ-HPV-7细胞、H2452细胞
GM00346细胞系相关产品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞、BT474细胞、HFL-1细胞
Jurkat E6细胞系相关产品：JHH-2细胞、P3J-HR-1细胞、MOLM13细胞
EA.hy 926细胞系相关产品：RAMSCs细胞、SKMel-5细胞、HEI-193细胞
OCI/AML-2细胞系相关产品：HCC94细胞、SKNFI细胞、HC11细胞
B16/F1细胞系相关产品：H345细胞、HEK293E细胞、NCIH1648细胞
SNU-475细胞系相关产品：SuDHL 10细胞、TF-1a细胞、SuDHL 10细胞
QBC(939)细胞系相关产品：HSC（Human Schwann）细胞、ARPE-19细胞、MuM-2C细胞
Balb/c 3T3细胞系相关产品：ACCM细胞、NRK细胞、TOV-21G细胞
Bx-PC3细胞系相关产品：Hs832T细胞、HOMEC细胞、L78细胞
HO8910PM细胞系相关产品：TGBC-11-TKB细胞、SK.MEL.5细胞、NCI-H220细胞
HCC1954-BL细胞系相关产品：HEK-A细胞、SK-MEL-3细胞、MyLa 2059细胞
NCIH82细胞系相关产品：HT55细胞、NTera 2细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞
P30 OHK细胞系相关产品：Ly1细胞、M-1细胞、SK-MEL-31细胞
OVCA-420细胞系相关产品：RIN-m5F细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞、Pa14C细胞
293A细胞系相关产品：WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞
Colo-201细胞系相关产品：NK-92 MI细胞、BEL 7404细胞、Ha Fe细胞
CL-11细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞、MGH-U3 (RN)细胞、RC13细胞
THLE-2细胞系相关产品：TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、EBC-1细胞、NPC-TW039细胞
NCI-H676B细胞系相关产品：J82细胞、CPAE细胞、A-427细胞
CTLA4 Ig-24细胞系相关产品：LC-1-sq细胞、LC-2/ad细胞、253JB-V细胞
aNK细胞系相关产品：OVCA8细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞、NALM-6-M1细胞
SP2/0 Ag-14细胞系相关产品：Cloudman S91 melanoma细胞、KTA7细胞、Psi-2-DAP细胞
SUM-52PE细胞系相关产品：GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞
NCI-H441-4细胞系相关产品：H1975细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞
NCIH1836细胞系相关产品：WM-451Lu细胞、HUT-125细胞、OVCAR 433细胞
Alexander cells细胞系相关产品：HEK 293 c18细胞、M2-10B4细胞、CAL 85-1细胞
Hs 852.T细胞系相关产品：IR 983F细胞、HS852.T细胞、NTC-200细胞
LU451细胞系相关产品：J82 COT细胞、NCI-H1238细胞、MRC 5细胞
L-6TG细胞系相关产品：P-2003细胞、A875细胞、GS-9L细胞
OCIAML3细胞系相关产品：BetaTC6细胞、GM2132细胞、HS-5细胞
NCI-H226细胞系相关产品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H820细胞、RA细胞
B16-F0 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
CHAGOK1细胞系相关产品：Caov-3细胞、NCIH1417细胞、H322T细胞
NS-1细胞系相关产品：MADB 106细胞、HCE细胞、HEK.EBNA细胞
KY-50细胞系相关产品：CL MC/9细胞、C12细胞、P19细胞
CORL88细胞系相关产品：H-1819细胞、U 138 MG细胞、ABC1细胞
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