"SK-N-BE(1) epithelioid cells人神经母细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
TKB1细胞系相关产品：Anip[973]细胞、GM05862细胞、NCI-H1694细胞
B16 F10细胞系相关产品：A-704细胞、253JBV细胞、LNCaP subline C4-2细胞
P3-X63-Ag 8.653细胞系相关产品：NCIH1618细胞、NBLS细胞、TGW细胞
细胞生长：贴壁
SK-N-BE(1) epithelioid cells人神经母细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-０.２%LH培养液或MEM培养液或１９９等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（１万单位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、胶塞、吸管(１０ml、１m１）、细胞吹打管（２０ml）(以上用具需经１２１℃至少１５分钟高压灭菌)、C０２ 孵箱、超净台、倒置显微镜、４℃、-２０℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培养液１００ml内，加入灭活小牛血清１０m１，庆大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸钠溶液３ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面１-２次，每次１０m１，弃去洗液，向细胞瓶内加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入１０m１细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于３７±１℃孵箱培养。约２～４天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MDCK细胞系相关产品：SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞
Tu177细胞系相关产品：CMT64细胞、Mhh-Call 2细胞、HPDE细胞
SKUT1细胞系相关产品：Tn5 B1-4细胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞、HepG2细胞
HEK 293 EBNA细胞系相关产品：Rca-B细胞、Hs 683.T细胞、CHL-CL-11细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞系相关产品：MDA-MB361细胞、SW-837细胞、Cloudman M3细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SK-N-BE(1) epithelioid cells人神经母细胞系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
HEC151细胞系相关产品：Monomac-1细胞、LN-382细胞、253J细胞
KU-812-F细胞系相关产品：SEM细胞、Mevo细胞、OCIAML2细胞
CAL-39细胞系相关产品：B16 subline B78细胞、EA.hy 926细胞、MC-3T3-E1细胞
HCE-2 [50.B1]细胞系相关产品：G-401细胞、HRA-19细胞、NCIH378细胞
SUPB-15细胞系相关产品：CCD-841-CoN细胞、HCT-8细胞、NCI-H446细胞
NG10815细胞系相关产品：P30-OHK细胞、B78细胞、IOSE-80细胞
K422细胞系相关产品：N2a细胞、DHL-8细胞、Chang Cells细胞
PANC.1细胞系相关产品：HEK293T/17细胞、Kupffer细胞、SCC 9细胞
MDAMB175VII细胞系相关产品：HCV-29细胞、CT-26细胞、WM451细胞
L 540细胞系相关产品：JKT1细胞、RWPE-2细胞、UACC 893细胞
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Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞系相关产品：MeWo细胞、HCC-9724细胞、H-520细胞
IEC18细胞系相关产品：MB231细胞、SU-DHL1细胞、QBC-939细胞
L02细胞系相关产品：NCI-H1651细胞、NCI-H1435细胞、B958细胞
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PC-9细胞系相关产品：CWR-22rv1细胞、V79-GalK1细胞、JJN3细胞
AAV-293细胞系相关产品：P19细胞、A1847细胞、HECV细胞
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Tregs细胞系相关产品：Epstein-Barr-3细胞、SCC9细胞、SKNBE2细胞
PC-9/GR细胞系相关产品：PC 61-5-3细胞、NCI-H2172细胞、MDA MB 134VI细胞
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KYSE-510细胞系相关产品：OVCAR432细胞、KE37细胞、B78细胞
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T 98 G细胞系相关产品：FHs74Int细胞、MLA144细胞、MPC-83细胞
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Rat 2细胞系相关产品：AR4IP细胞、TEV-1细胞、253J B-V细胞
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PE/CA-PJ34细胞系相关产品：HIT-T15细胞、NS20-Y细胞、Hce8693细胞
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