"K1735 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：黑色素瘤； C３H/HeN
细胞形态：上皮细胞样
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
RF/6A细胞系相关产品：HT-29/CX-1细胞、RGM1细胞、LU65细胞
TMK-1细胞系相关产品：MGHU3细胞、SF 295细胞、BOWES细胞
Panc_08_13细胞系相关产品：CCD-112CoN细胞、Jurkat 77细胞、PCI-4M细胞
细胞生长：贴壁
K1735 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MSB1细胞系相关产品：LIPF178C细胞、HGC-27细胞、KPL1细胞
KATO III细胞系相关产品：MES 23.5细胞、PLC8024细胞、TGW-I-nu细胞
RPMI8402细胞系相关产品：C-33 A细胞、MDCC MSB1细胞、Rat 1细胞
MN60细胞系相关产品：COLO-679细胞、VMRCRCZ细胞、WISH细胞
MDA MB 134VI细胞系相关产品：KYSE410细胞、DHL-4细胞、PK-136细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
K1735 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度(最高不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
Vero 76 clone E6细胞系相关产品：EFO 27细胞、HMCB细胞、PaTu-8988s细胞
143B细胞系相关产品：JVM2细胞、Hs-695-T细胞、V 79-4细胞
SNU620细胞系相关产品：NCI-H196细胞、NCI-H1838细胞、DU-145细胞
B16 BL6细胞系相关产品：KOSC2细胞、HeLa/S3细胞、Jurkat-77细胞
SCLC21H细胞系相关产品：OCM-1A细胞、Balb/c3T3细胞、MDA-MB-231 #4175细胞
SY5Y细胞系相关产品：DBTRG-05MG细胞、BHT-101细胞、TE11细胞
Hep II细胞系相关产品：NCIH1581细胞、Anglne细胞、MHCCLM3细胞
HET-1A细胞系相关产品：GM3190细胞、Caco2-BBE细胞、LX-2细胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞系相关产品：NCIH1755细胞、NCI H69细胞、WEHI-3B细胞
H676细胞系相关产品：HCC38细胞、SKMES-1细胞、BC-025细胞
K1735 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
Hs 895 T细胞系相关产品：CP-70细胞、THP-1细胞、MLTC-1细胞
HCC-9204细胞系相关产品：MNNGHOS细胞、Sp2/0-Ag-14细胞、FTC-133细胞
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GM3190细胞系相关产品：RS4-11细胞、C17.2细胞、Hep 3B2.1-7细胞
Anip 973细胞系相关产品：OE21细胞、CCD-966SK细胞、Co 115细胞
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Tn 5B1-4细胞系相关产品：H2029细胞、OV1/P细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞
A2780CP细胞系相关产品：SNK6细胞、HRIF细胞、H508细胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞系相关产品：451Lu细胞、BNL CL.2细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞
LIXC002细胞系相关产品：OCI/AML4细胞、Becker细胞、PC2细胞
Sp2/0细胞系相关产品：H1623细胞、LS180细胞、NCIH187细胞
P3J.HR1K细胞系相关产品：H-510A细胞、B16BL6细胞、SUSM1细胞
SW-620细胞系相关产品：COR-L51细胞、CHO/dhFr-细胞、SW1088细胞
MCF 10A细胞系相关产品：OCI-Ly01细胞、HBdSMC细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞
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SCC-25细胞系相关产品：ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞
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EAHY-926细胞系相关产品：TCCPAN2细胞、RMS13细胞、RKOAS451细胞
COLO-357细胞系相关产品：SNU449细胞、S91细胞、MM1.S细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞系相关产品：GLRK 13细胞、EJ1细胞、HTR-8/SVneo细胞
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H295R-S1细胞系相关产品：AU565细胞、AN3-CA细胞、HEK-2细胞
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RA细胞系相关产品：T47D细胞、NCIH2291细胞、MV522细胞
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SNU-1细胞系相关产品：MDA436细胞、U-138MG细胞、U373-MG细胞
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ADR-RES细胞系相关产品：SG231细胞、B-16细胞、Hs600T细胞
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SMMC7721细胞系相关产品：CTLA4Ig-24细胞、C-6细胞、GM07404细胞
JIMT细胞系相关产品：HECV细胞、OCILY19细胞、SUPB15细胞
SNB.19细胞系相关产品：LLC-MK2细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞、KYSE-180细胞
NCI-H929细胞系相关产品：S3-HeLa细胞、Glioma 261细胞、NCI-H865细胞
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SUIT 2细胞系相关产品：K562/ADR细胞、P-3J细胞、SUDHL5细胞
LSECs细胞系相关产品：NCI-H295细胞、QGY7701细胞、DHL10细胞
CEM.C1细胞系相关产品：10RGB细胞、NCIH23细胞、MN-9D细胞
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INS-1E细胞系相关产品：AA-Mel细胞、Ramos (RA)细胞、PL-45细胞
Michigan Cancer Foundation-12A细胞系相关产品：NBL-12细胞、HSC/mHSC细胞、CAL27细胞
LP-1细胞系相关产品：KYSE520细胞、Colon26细胞、HIBEC细胞
K1735 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
Psi2 DAP细胞系相关产品：NCIH128细胞、A9(Hamprecht)细胞、ML2细胞
A549ATCC细胞系相关产品：H-1435细胞、BIC细胞、H1184细胞
alphaTC1 Clone 6细胞系相关产品：CCRF.CEM细胞、DoHH-2细胞、LTEP a2细胞
SNU620细胞系相关产品：NCI-H196细胞、Namalva细胞、GA-10-Clone-4细胞
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