"NCI-H1563 Adherent人胚肺细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞培养时分布不均匀,通常操作步骤:做细胞生物学实验,细胞铺板大概是我们最常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀:要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种,直接用100微升移液器吸取细胞悬液,沿孔壁(稍离开一点孔底即可,不要离底太高)直接接入,移液器不需完全打到,轻轻按下即可,每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子,左手轻轻扶住板的左边,右手轻轻敲击板的右边缘,注意把握力度(我一般轻巧敲三下),太强或次数太多会导致细胞集中成堆,将板顺时针旋转(逆时针效果不好),依次敲击剩余三个边,静置约5分钟,放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用将每个孔加入少量无血清培养基,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其它孔依此类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底,注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢,但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式,但力度没有96孔板好掌握,效果没有96孔板好。培养瓶里面加好细胞以后(比如传代好/分好细胞以后),先顺时针摇晃3次,马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H1563 Adherent人胚肺细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
很多朋友讨论细胞培养问题,见到很多很好的经验总结,这里说一些我个人的经验,因为一些比较特殊的原因,我自己培养接触过近300种细胞,常用于做实验的,累积有百余种,可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇专题,并不是因为细胞消化最重要,而是近期看到大家频繁讨论这个话题,我就抛砖引玉,下面几点拙见,可能与其它朋友总结的一些经验有点出入,仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究,得出了很多有价值的经验,也见到很多人的困惑。其实细胞培养,尤其是细胞系的培养,就消化而言,不是太难,做得多了,善于总结经验,就能把细胞越养越好。一般的程序步骤,细节操作,我这里就不讲了,只讲一些基本操作背后的知识,如果不对之处,欢迎指正,总结下来,细胞培养中消化很重要,但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要),关键所在是细胞来源,血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题,很多时候bottleneck没有找到,虽然通过其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作,总觉得自己没有经验,而忽视试剂,溶液尤其是细胞的质量,后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。
SLMT-1细胞系相关产品:L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、SNU1细胞、BV173细胞
CCRF-SB细胞系相关产品:RT-BM 1细胞、NS1-1 Ag4.1细胞、C12细胞
SKES-1细胞系相关产品:EFM-192B细胞、WRL 68细胞、KMB-17细胞
细胞传代方法:1:3-1:4传代;每周换液2次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
H524细胞系相关产品:MN-60细胞、H1781细胞、GM3569细胞
RS4;11细胞系相关产品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞、Colo741细胞、D10G41细胞
WTRL1细胞系相关产品:AAV-293细胞、H-920细胞、DanG细胞
细胞生长特性:贴壁生长
NCI-H1563 Adherent人胚肺细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,最终形成恶性循环。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中(不加细胞),37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态,所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,以避免影响实验结果。1)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射,并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水;2)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素;3)超净台的风机不能过大,风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染;4)无菌室经甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的喷洒中和,约几小时即可进入操作。
SBC5细胞系相关产品:NCI-SNU-C2A细胞、KLE细胞、RD细胞
HS-294T细胞系相关产品:HF-91细胞、Hep 2细胞、LIXC002细胞
JKT1细胞系相关产品:Hi-5细胞、PC3M-1E8细胞、CAL 120细胞
H1092细胞系相关产品:MM134细胞、C166细胞、MCF/Adr细胞
MSTO-211细胞系相关产品:HSC2细胞、TFK1细胞、SK.MEL.2细胞
NBL-4细胞系相关产品:UMRC-2细胞、Simpson细胞、NCI-H498细胞
alphaTC clone 6细胞系相关产品:L细胞、PK(15)细胞、Hs 683.T细胞
Okayama University Medical School-23细胞系相关产品:OC-316细胞、H-2108细胞、ELD-1细胞
Melanoma 14细胞系相关产品:T. T细胞、NSC-34细胞、OVCAR5细胞
U-87MG ATCC细胞系相关产品:BJ [Human fibroblast]细胞、SW 1222细胞、HT-1376细胞
LOUNH91细胞系相关产品:CCD-112 CoN细胞、HSC-T6细胞、Vx-2细胞
H2198细胞系相关产品:Malme3M细胞、NK10a细胞、TB-1 Lu细胞
OCIAML4细胞系相关产品:NG10815细胞、A2780/Taxol细胞、3T3 clone A31细胞
NCI-H1563 Adherent人胚肺细胞系
Clone Y-1细胞系相关产品:C-Lu65细胞、H1666_DA细胞、CCLP1细胞
BE(2)C细胞系相关产品:SUM 149PT细胞、NT2/D1细胞、BALB/c 3T3 clone A31细胞
MV3细胞系相关产品:TE7细胞、IHH-4细胞、RD-2细胞
MV3细胞系相关产品:TE7细胞、IHH-4细胞、RD-2细胞
alpha TC1-6细胞系相关产品:Namalva细胞、H-1688细胞、NCIH2228细胞
UPCISCC154细胞系相关产品:FTC133细胞、SK-N-BE(1)n细胞、138 MG细胞
CF-PAC1细胞系相关产品:NCIH2452细胞、P30/Ohkubo细胞、NCC-IT细胞
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PC 61-5-3细胞系相关产品:GM637细胞、NIH-3T3细胞、BNL.CL2细胞
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OVCAR-420细胞系相关产品:LICR-HN-6细胞、MDA435细胞、SNU-216细胞
MCA-205细胞系相关产品:HEK-293 c18细胞、NCI-SNU-1040细胞、Nb2a细胞
C2C12细胞系相关产品:OC 316细胞、COLO-HSR细胞、RPE D407细胞
HANK-1细胞系相关产品:HPAF-II/CD18细胞、Hs274T细胞、NCI-H1618细胞
FK81细胞系相关产品:TK-10细胞、DMS53细胞、A375SM细胞
Kit225/K6细胞系相关产品:J111细胞、GM00215细胞、OCI-AML4细胞
NCIH660细胞系相关产品:UCLA-SO-14细胞、UM-RC-2细胞、KAT5细胞
MRAEC细胞系相关产品:LNCaP C4-2B细胞、LS-123细胞、RAMSCs细胞
HOCF细胞系相关产品:Psi2-DAP细胞、RPMI1788细胞、Clone Y1细胞
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hOMF细胞系相关产品:Nthy ori 3.1细胞、JM-1细胞、OV 2008细胞
OVCA 432细胞系相关产品:YES2细胞、NT-2细胞、HOC细胞
SG231细胞系相关产品:K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞
210RCY3-Ag1.2.3细胞系相关产品:C32 [Human melanoma]细胞、QSG-7701细胞、NCIH650细胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞系相关产品:SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞
LICR-LON-HN6-R细胞系相关产品:751细胞、VM-CUB-1细胞、IGR.OV1细胞
HSAS4细胞系相关产品:A 2058细胞、C8166细胞、MDA-MB-134VI细胞
H3255_DA细胞系相关产品:HCS2/8细胞、KPL-4细胞、OCI Ly3细胞
SW527细胞系相关产品:R3/1细胞、P3/NS-1细胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞
NIH-3T3细胞系相关产品:TM-4细胞、CAL-85-1细胞、HA1800细胞
TGW-I-nu细胞系相关产品:NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞
PANC0504细胞系相关产品:ATN1细胞、HIT细胞、SK-MEL-24细胞
NCIH2172细胞系相关产品:MCA-205细胞、KY-50细胞、HBMEC细胞
CAL 148细胞系相关产品:TPC-1细胞、SNK-1细胞、HRA-19细胞
EoL-1 cell细胞系相关产品:Hs746-T细胞、NGP细胞、143BTK-细胞
U-87-MG细胞系相关产品:MFHL-2细胞、A375细胞、T98 G细胞
AD-293细胞系相关产品:C4-2 Bone metastatic细胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞、Hs 888Lu细胞
DSL-6A-C1细胞系相关产品:HTh 74细胞、SW-1271细胞、HMEC细胞
HOC1细胞系相关产品:LIXC-002细胞、H1092细胞、OVCA420细胞
HOS(TE85)细胞系相关产品:HAVSMC细胞、NCI-841细胞、NCIH2347细胞
NCI-H1048细胞系相关产品:TE 85.T细胞、CMT 167细胞、RAG细胞
CL34细胞系相关产品:HuP-T4细胞、RCCJF细胞、OCI AML3细胞
NCI-H1563 Adherent人胚肺细胞系
HCC70细胞系相关产品:NCIH1819细胞、KHYG-1细胞、MCF-10 Attached细胞
SK-ChA1细胞系相关产品:Sc-1细胞、BetaTC6细胞、SCaBER细胞
TE85细胞系相关产品:tdott细胞、NCIH208细胞、Hs 840.T细胞
HSC-T6细胞系相关产品:Hs742T细胞、MM6细胞、HOC-1细胞
686LN-M4e细胞系相关产品:HSC-2细胞、Dx5细胞、786-O RCC细胞
MV-3细胞系相关产品:H1672细胞、Caco-2/BBe细胞、TGBC-11-TKB细胞
MEL-526细胞系相关产品:Tj-905细胞、HEK 293-H细胞、WILL2细胞
NCIH3255细胞系相关产品:EAhy 926细胞、A-375细胞、VK2 (E6/E7)细胞
VP267细胞系相关产品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、COV-434细胞、H2029细胞
Murine Carcinoma-38细胞系相关产品:SNU-739细胞、NCIH345细胞、MALME 3M细胞
GMK,BSC-1细胞系相关产品:TE 85 ClF-5细胞、NB4细胞、COLO 205细胞
JKT-1细胞系相关产品:HEYA8细胞、LIM 1215细胞、PG13细胞
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