"A-704 Adherent人肾癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
A-704 Adherent人肾癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
有关实验室细胞培养基知识普及:经典的培养基有很多种,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用最广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养;MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度;BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞;Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养;RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
J 111细胞系相关产品:NCI-H2030细胞、MRMT-1细胞、L929细胞
Panc-10.05细胞系相关产品:OVCA432_Bast细胞、GP2-293细胞、Rat1细胞
HOP62细胞系相关产品:UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞
细胞传代方法:1:3—1:4传代,每周换液2-3次
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HS-294T细胞系相关产品:HF-91细胞、Hep 2细胞、LIXC002细胞
H-1417细胞系相关产品:CFPAC1细胞、NCIH1581细胞、KOSC-2 cl3-43细胞
Hos TE-85细胞系相关产品:MS1细胞、H650细胞、ACC3细胞
细胞生长特性:贴壁生长
A-704 Adherent人肾癌细胞系
细胞形态特性:上皮细胞样
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度;黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率;真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
Ca759细胞系相关产品:130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞
RBMEC细胞系相关产品:mRTEC细胞、Hs 729细胞、Ramos(RA1)细胞
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A-704 Adherent人肾癌细胞系
HCa/16A3-F细胞系相关产品:SHEP1细胞、CCK-81细胞、RA.1细胞
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End1/E6E7细胞系相关产品:Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞
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OSK-1细胞系相关产品:REC-1细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞、A-549细胞
A 253细胞系相关产品:P31 FUJ细胞、HFLS-RA细胞、FOXNY细胞
A 253细胞系相关产品:P31 FUJ细胞、HFLS-RA细胞、FOXNY细胞
HCT-116细胞系相关产品:TGW-I-nu细胞、HS 1.Tes细胞、HCET细胞
C-28/I2细胞系相关产品:C-32细胞、L-5178-Y-R细胞、BNCL-2细胞
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Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞系相关产品:THP 1细胞、IGR-OV1细胞、BHK-21细胞
A-704 Adherent人肾癌细胞系
NCIH1341细胞系相关产品:L5178-R细胞、WRL68细胞、HCC-827细胞
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P30OHK细胞系相关产品:Rat-2细胞、H-4-II-E细胞、SK-MEL-5细胞
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HOS (TE85, Clone F5)细胞系相关产品:JurkatE6-1细胞、HGE细胞、OCI-Ly03细胞
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Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞系相关产品:HS852.T细胞、P3JHR-1细胞、VP303细胞
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