"LS513 Adherent人盲肠癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
预防细胞污染的注意事项:实验进行前,超净台用紫外灯照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超净台台面,并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内;实验用品用完应移出超净台,以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞;即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基,避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品,避免污染。勿碰触吸管尖头,不小心碰触后应立即更换;不要在打开的容器瓶口正上方操作,容器打开后,倾斜45°操作,操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方,应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次,用双蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水(应每周更换),待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
LS513 Adherent人盲肠癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。
HCC-38细胞系相关产品:KLM1细胞、KE39细胞、SW-756细胞
COLO829细胞系相关产品:HS-695T细胞、L-02细胞、H341细胞
Hs706T细胞系相关产品:SR786细胞、JC细胞、Panc02细胞
细胞传代方法:1:3—1:4传代,每周换液2次
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Loucy细胞系相关产品:Hep G2/C3A细胞、Mc Ardle 7777细胞、Hs294T细胞
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DoTc2细胞系相关产品:Hs 688(A).T细胞、FU-OV-1细胞、MV4:11细胞
细胞生长特性:贴壁生长
LS513 Adherent人盲肠癌细胞系
细胞形态特性:上皮样
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
Rca-B细胞系相关产品:GT39细胞、MDA-MB 231细胞、NCI-H1792细胞
SV40 MES 13细胞系相关产品:DITNC1细胞、OCI-Ly 10细胞、HCC-95细胞
KCL22细胞系相关产品:GC9811-P细胞、EC-GI细胞、Hs27F细胞
KYSE-140细胞系相关产品:MDA-MB-453细胞、PCI-SG231细胞、BV-2细胞
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LS513 Adherent人盲肠癌细胞系
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NCIH2405细胞系相关产品:H-865细胞、SHG 44细胞、143TK-细胞
GM05372E细胞系相关产品:SNU423细胞、NBL-7细胞、L5178YR细胞
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SKHEP1细胞系相关产品:Rat 1细胞、Human Liver-7702细胞、KHYG1细胞
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LM(TK-)细胞系相关产品:HCC0015细胞、373 MG细胞、B/C3T3细胞
OCI-Ly07细胞系相关产品:MDA-175细胞、Nthy-ori 3-1细胞、U118MG细胞
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MLE-12细胞系相关产品:MDA361细胞、Sp 2817细胞、TMK1细胞
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MDCKII-WT细胞系相关产品:MMAc-SF细胞、HRGEC细胞、JVM2细胞
UCH1细胞系相关产品:HBZY1细胞、H-650细胞、P3J HR1-K细胞
H1836细胞系相关产品:H-1581细胞、MUGCHOR1细胞、GM00215A细胞
OEC19细胞系相关产品:TE671细胞、PE/CA-PJ34细胞、Mia PACA 2细胞
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LA4细胞系相关产品:293/EBNA-1细胞、NS1细胞、T HEECs细胞
COV 434细胞系相关产品:HEK/EBNA细胞、SKNBE2C细胞、HT1197细胞
PIG1细胞系相关产品:L78细胞、FTC133细胞、SKMEL24细胞
LS513 Adherent人盲肠癌细胞系
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Bat lung细胞系相关产品:LTEP-sm细胞、SHI1细胞、H-187细胞
SK MEL 28细胞系相关产品:Fetal Human Colon细胞、NP69细胞、HREC细胞
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HEK AD293细胞系相关产品:P3-X63.Ag8.653细胞、C918细胞、SF-767细胞
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