"PK-13 Adherent猪肾细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞培养过程中,总是会出现各种意想不到的问题,一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法,希望对细胞培养初学操作者有所帮助:1)观察细胞状态:贴壁细胞密度达到85-90%,即可以细胞冻存形式进行保藏,拍照,记录细胞状态;2)细胞清洗:培养皿表面消毒后,转移至生物安全柜中,去除培养皿中培养液,加入12mlPBS,轻轻摇晃培养皿清洗细胞,随后吸除PBS清洗液;3)细胞消化:将2ml胰酶加入培养皿中,完全覆盖细胞,置于显微镜下观察(期间禁止摇晃培养皿),当细胞刚开始脱落时,立即转移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余约0.5ml胰酶,转移至培养箱内继续消化,每30秒肉眼观察细胞状态,至细胞成流沙状完全脱落,转移至生物安全柜中,加入12ml完全培养基,终止消化;4)细胞离心:将终止消化后的细胞悬液吹打均匀,吸取至15ml离心管中,1000r/min(110g),离心3min;5)细胞冻存:离心后去除细胞上清液,按照冻存细胞量5*10^5/ml,吸取冻存液重悬细胞沉淀,吹打均匀后分装至相应的冻存管中,进行冻存;6)细胞保藏:冻存管做好标记,放至程序降温盒中,于4℃冰箱放置30min,转移至-80℃超低温冰箱过夜,将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
PK-13 Adherent猪肾细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞冻存知识普及:细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO),可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。 采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1到-2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。
HCC202细胞系相关产品:NKM1细胞、WEHI 164 TC细胞、SUDHL16细胞
U-226AR1细胞系相关产品:H-1417细胞、U-937细胞、WML2细胞
HPDEC细胞系相关产品:COLO_320DM细胞、Jurkat Clone E6-1细胞、HRGEC细胞
细胞传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2—3次
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-446细胞系相关产品:RM1细胞、H1522细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞
RPMI #8226细胞系相关产品:He La细胞、LICR-LON-HN6-R细胞、SKNBE-2细胞
KYSE 70细胞系相关产品:REC细胞、Pt-K1细胞、Kit225-K6细胞
细胞生长特性:贴壁生长
PK-13 Adherent猪肾细胞系
细胞形态特性:上皮细胞样
解冻细胞出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下:1)冷冻时细胞密度过低:推荐的解决方案:缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后,立即将冻存管浸入在37℃的水浴中,并震荡至全部融化,然后迅速地转移到预热的培养基中;2)不适当的冷冻过程:推荐的解决方案:解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术,并确保使用了适量和适合的冷冻液。出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下:1)培养瓶的大小:一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中,使细胞密度上升;如,根据培养基的体积,从T75培养瓶转移到2或3个T25培养瓶中;2)细胞密度过低:通常解决方案是提高未来冷冻物种细胞的冻存密度,或使用较小的培养容器,或解冻多个试管来进行培养。
SUPB15细胞系相关产品:SN12C-PM6细胞、HRPEpiC细胞、A 2058细胞
MCF.10A细胞系相关产品:HEP-3B2细胞、P1-Raji细胞、F442A细胞
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PK-13 Adherent猪肾细胞系
SKNO-1细胞系相关产品:HEC-151细胞、IEC-18细胞、C32 [Human melanoma]细胞
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CORL105细胞系相关产品:HT-29细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞、MDA-MB 361细胞
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B-cell with DC Morphology细胞系相关产品:SCL2细胞、Caco-2/ATCC细胞、CA46细胞
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LS-174细胞系相关产品:OLN-93细胞、NCI-H1703细胞、HCC-2279细胞
PK-13 Adherent猪肾细胞系
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Panc04.03细胞系相关产品:NK92细胞、NF639细胞、Rabbit Kidney 13细胞
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