"U14 Adherent小鼠宫颈癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到最低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
U14 Adherent小鼠宫颈癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
常规的细胞实验(增殖,凋亡,迁移,分化之类的),受消化影响不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验,比如病毒包装,对细胞代数,对细胞状态要求极高。这个时候,胰酶消化,就是润洗,都会对细胞包装病毒的能力有影响,传代次数一多,细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化,用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性,来使得细胞脱离基质附着表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白,trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不彻底的话),而应该想其它办法;PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤,是常见的操作,因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲,对于一些难消化细胞,那么可以配制不含Ca,Mg离子的PBS,因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞,不需要配制如此溶液。
SKNMC细胞系相关产品:KU812-F细胞、BC-028细胞、CAL 39细胞
ST-2细胞系相关产品:SW 756细胞、HEK-293-H细胞、JOSK-M细胞
MDCK-2细胞系相关产品:Ku812F细胞、HS578T细胞、Swiss/3T3细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SCC-7细胞系相关产品:NCIH2052细胞、COLO 320 DM细胞、SNG-M细胞
SNU-520细胞系相关产品:H-1648细胞、H-460细胞、TE-3A细胞
UCH-1细胞系相关产品:RCC10RGB细胞、LA-N-5细胞、H1944细胞
细胞生长特性:贴壁生长
U14 Adherent小鼠宫颈癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液中加相应的抗生素处理;霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作。
MM6细胞系相关产品:Kit225细胞、Rabbit Kidney 13细胞、C3A细胞
HCC-1937细胞系相关产品:RBMEC细胞、OE21细胞、MDAMB330细胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞系相关产品:1E8-H细胞、H548细胞、Panc-03.27细胞
MM-1S细胞系相关产品:C12细胞、Human Embryonic Skin细胞、G 292 Clone A 141B1细胞
BE2-C细胞系相关产品:HCT/FU细胞、U-2-OS细胞、NCI-841细胞
NCI-H838细胞系相关产品:hTERT-RPE-1细胞、R1610细胞、Okayama University Medical School-23细胞
HEL299细胞系相关产品:SKOV3细胞、SK.OV.3细胞、TGBC11T细胞
CAL85-1细胞系相关产品:COLO-684细胞、GM03569D细胞、SGC-7901/DDP细胞
JM-1细胞系相关产品:RPMI No. 1846细胞、Clone Y-1细胞、H7721细胞
WEHI3细胞系相关产品:Hs294T细胞、RPMI-7951细胞、SGC7901/DDP细胞
C3H-10T1/2细胞系相关产品:MUTZ-3细胞、ATN1细胞、Hs 281.T细胞
NCI-H747细胞系相关产品:C 6细胞、BIC-1细胞、MDAMB134VI细胞
LS411N细胞系相关产品:H-510细胞、GM2219C细胞、MC-CAR细胞
U14 Adherent小鼠宫颈癌细胞系
VeroE6细胞系相关产品:HANK细胞、SF 767细胞、A-20细胞
WM-115细胞系相关产品:NCIH1944细胞、MHHCALL2细胞、SK-BR-3细胞
HEC1-B细胞系相关产品:HConEpic细胞、HT 1376.T细胞、GDM-1细胞
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ZR7530细胞系相关产品:Caco2-BBE细胞、293-F细胞、H-1092细胞
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PC2细胞系相关产品:Nb2细胞、HOP92细胞、HLEB3细胞
U14 Adherent小鼠宫颈癌细胞系
MC3T3-E1(C4)细胞系相关产品:FHCRC subclone 11细胞、PC 61.5.3细胞、P388D1细胞
HBdSMC细胞系相关产品:SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞
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MPC 11细胞系相关产品:KLE细胞、H1105细胞、SEG-1细胞
CMT 167细胞系相关产品:LLC-PK(1)细胞、VERO76细胞、RL95-2细胞
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M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞系相关产品:1E8-H细胞、NCI-H292细胞、WM-115细胞
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