"HPAF-II Adherent人胰腺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞培养过程中,总是会出现各种意想不到的问题,一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法,希望对细胞培养初学操作者有所帮助:1)观察细胞状态:贴壁细胞密度达到85-90%,即可以细胞冻存形式进行保藏,拍照,记录细胞状态;2)细胞清洗:培养皿表面消毒后,转移至生物安全柜中,去除培养皿中培养液,加入12mlPBS,轻轻摇晃培养皿清洗细胞,随后吸除PBS清洗液;3)细胞消化:将2ml胰酶加入培养皿中,完全覆盖细胞,置于显微镜下观察(期间禁止摇晃培养皿),当细胞刚开始脱落时,立即转移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余约0.5ml胰酶,转移至培养箱内继续消化,每30秒肉眼观察细胞状态,至细胞成流沙状完全脱落,转移至生物安全柜中,加入12ml完全培养基,终止消化;4)细胞离心:将终止消化后的细胞悬液吹打均匀,吸取至15ml离心管中,1000r/min(110g),离心3min;5)细胞冻存:离心后去除细胞上清液,按照冻存细胞量5*10^5/ml,吸取冻存液重悬细胞沉淀,吹打均匀后分装至相应的冻存管中,进行冻存;6)细胞保藏:冻存管做好标记,放至程序降温盒中,于4℃冰箱放置30min,转移至-80℃超低温冰箱过夜,将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HPAF-II Adherent人胰腺癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
常规的细胞实验(增殖,凋亡,迁移,分化之类的),受消化影响不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验,比如病毒包装,对细胞代数,对细胞状态要求极高。这个时候,胰酶消化,就是润洗,都会对细胞包装病毒的能力有影响,传代次数一多,细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化,用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性,来使得细胞脱离基质附着表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白,trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不彻底的话),而应该想其它办法;PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤,是常见的操作,因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲,对于一些难消化细胞,那么可以配制不含Ca,Mg离子的PBS,因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞,不需要配制如此溶液。
COLO357细胞系相关产品:NCI-H810细胞、WM-239-A细胞、Anip-973细胞
HS-766T细胞系相关产品:SW-1353细胞、NCI-H2085细胞、C32r细胞
PLB 985细胞系相关产品:SHI1细胞、OEC33细胞、FRH-0201细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Colon38细胞系相关产品:H125细胞、RC13细胞、JF305细胞
HOS TE 85细胞系相关产品:293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞
HUVEC细胞系相关产品:QG-56细胞、HCC0078细胞、CL1-5细胞
细胞生长特性:贴壁生长
HPAF-II Adherent人胰腺癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞接收操作说明:请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式:T25培养瓶(一般是贴壁细胞使用,悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多,当然,有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞,但是,长期经验来说,贴壁细胞容易发生形态变化,估计是细胞培养空间狭小,血清不足导致(最主要是怕运输延误导致这些情况发生),个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用,主要是冬天天气冷,温度低于4℃的地方,都要考虑冻存细胞)。T25培养瓶:是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T25培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用,如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管:是用15ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用(如果实验室没有T25培养瓶,可以暂时T75培养瓶,加入10-15ml培养基,建议10ml培养基,也可以使用T175培养瓶,加入50-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,不用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。干冰:是用本公司冻存液冻存细胞后,直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
KU-812F细胞系相关产品:E304细胞、LAN-6细胞、BpRc1细胞
L-1210细胞系相关产品:Cattle chondrocytes细胞、3T3J2细胞、MJ细胞
hMSC-BM细胞系相关产品:YT细胞、FAO-1细胞、NCIH1755细胞
CMECs细胞系相关产品:H-1573细胞、JHH2细胞、mREC细胞
VAESBJ细胞系相关产品:ELD-1细胞、NCI-H322T细胞、MyLa2059细胞
MM96L细胞系相关产品:SF-767细胞、DoHH2细胞、IEC18细胞
mousepodocyte细胞系相关产品:HH [Human lymphoma]细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、MCA-38细胞
HCC1954BL细胞系相关产品:HA1800细胞、S-16细胞、LOU-NH-91细胞
Scott细胞系相关产品:GOS3细胞、SCC 4细胞、SW1116细胞
PG13细胞系相关产品:MNNG-HOS细胞、MDST8细胞、FRTL-5细胞
HDMEC细胞系相关产品:Hs895.T细胞、GLC-82细胞、Karpas 422细胞
H526细胞系相关产品:PLCPRF5细胞、HMy2.CIR细胞、GTL-16细胞
HTR-8/SVneo细胞系相关产品:DV-90细胞、hCMEC/D3细胞、PC-12细胞
HPAF-II Adherent人胰腺癌细胞系
FAK+/+细胞系相关产品:NCI-H1869细胞、Melanoma 14细胞、RD-ES细胞
52PE细胞系相关产品:Panc04.03细胞、BT-20细胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞
BJ [Human fibroblast]细胞系相关产品:H-2591细胞、PGBE1细胞、JCA-1细胞
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EST50细胞系相关产品:CCD-1095Sk细胞、GLRK 13细胞、SKES1细胞
CL-34细胞系相关产品:MDA134细胞、IOSE-29细胞、Hep 3B细胞
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HuH 6细胞系相关产品:UACC812细胞、OE19细胞、NCI-SNU-601细胞
210RCY3-Ag1.2.3细胞系相关产品:C32 [Human melanoma]细胞、QSG-7701细胞、NCIH650细胞
HCC1171细胞系相关产品:Wistar Institute-38细胞、MiaPaCa-2细胞、DSL-6A/C1细胞
KYSE-450细胞系相关产品:MHHCALL2细胞、LA-N-1细胞、SW480细胞
HT144细胞系相关产品:PCI-4.2细胞、COLO829细胞、HEK 293-H细胞
GM04679细胞系相关产品:HEK-2细胞、CO115细胞、SK-RC-42细胞
OE33细胞系相关产品:HPMC细胞、Ramos 2G6 4C10细胞、SK Hep1细胞
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KYSE180细胞系相关产品:RSC-96细胞、SU4细胞、JROECL21细胞
SCCVII细胞系相关产品:U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞
HSC5细胞系相关产品:SW 900细胞、AR42J细胞、H-510A细胞
HEK 293 EBNA细胞系相关产品:Rca-B细胞、Hs 683.T细胞、CHL-CL-11细胞
DMS53细胞系相关产品:Ca-Ski细胞、L428细胞、H1836细胞
NCI-H2030细胞系相关产品:TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、H-2591细胞、BIU-87/Adr细胞
JHH-2细胞系相关产品:MRC-9细胞、LP1细胞、IM95细胞
Roswell Park Memorial Institute 7951细胞系相关产品:NCI-ADR-RES细胞、SKN-AS细胞、A-375.S2细胞
COLO-679细胞系相关产品:TE-6细胞、H283细胞、3T3-442A细胞
KYSE0410细胞系相关产品:H929细胞、GTL-16细胞、SKG-IIIa细胞
HMSC细胞系相关产品:A2780CP细胞、SNU-387细胞、KU.812细胞
KPL4细胞系相关产品:GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞
CCRF/CEM/0细胞系相关产品:H9c2(2-1)细胞、HCC-1419细胞、H661细胞
Pt K2细胞系相关产品:Mouse podocyte细胞、MHCC 97-H细胞、KM12细胞
H.Ep. No. 2细胞系相关产品:RBL 2H3细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞、OVCAR8/ADR细胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞系相关产品:SCC VII细胞、OCI/AML5细胞、MONO-MAC 6细胞
McARH7777细胞系相关产品:NCIADR.RES细胞、MRCV细胞、MASMC细胞
184A1细胞系相关产品:Hep 3B2_1-7细胞、BALB/c 3T3 clone A31细胞、RK13细胞
SW-756细胞系相关产品:CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞
NCIH2291细胞系相关产品:Mouse Colon 38细胞、WB F344细胞、KE37细胞
MM1S细胞系相关产品:L-1210细胞、FAT细胞、B5537SKIN细胞
aTC1-6细胞系相关产品:WM115mel细胞、P31FUJ细胞、RCC-4细胞
VAESBJ细胞系相关产品:ELD-1细胞、NCI-H322T细胞、MyLa2059细胞
CaEs17细胞系相关产品:X63Ag8-653细胞、SU-DHL-4细胞、B16/BL6细胞
SK Mel 1细胞系相关产品:OVCAR 5细胞、MUG-Chor1细胞、SW-579细胞
HPAF-II Adherent人胰腺癌细胞系
Kasumi-6细胞系相关产品:WEHI-3B细胞、HS578细胞、OVCA 420细胞
HFL-I细胞系相关产品:Tregs细胞、HT1376细胞、H-295细胞
SupB15W细胞系相关产品:SNU387细胞、EOMA细胞、COLO-16细胞
BC-020细胞系相关产品:C-8161细胞、Vero E6细胞、B-16细胞
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Bac 1.2F5细胞系相关产品:130-T细胞、K422细胞、NTERA-2cl.D1细胞
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