"MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠颅顶前骨细胞系
细胞背景资料:该细胞是从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆。从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。 MC3T3亚克隆4(ATCC CRL-2593)和MC3T3亚克隆14(ATCC CRL-2594)在抗坏血酸和3到4mM无机盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。 它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质(ECM)。MC3T3亚克隆24(ATCC CRL-2594)和MC3T3亚克隆30(ATCC CRL-2596)在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化
细胞形态:上皮细胞样
HCC-1588细胞系相关产品:H-2087细胞、ARH77细胞、KU 19-19细胞
NCIH1395细胞系相关产品:C2-C12细胞、MH-S细胞、BJAB-1细胞
SW1417细胞系相关产品:B-16细胞、Kuramochi细胞、L细胞
细胞生长:贴壁
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠颅顶前骨细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
BC-3H-1细胞系相关产品:H766T细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞、MCA 205细胞
bEnd3细胞系相关产品:OCI-LY-7细胞、T 98 G细胞、HEL9217细胞
Farage Original Line细胞系相关产品:IOSE-Van细胞、HO1N1细胞、HEL 299细胞
ABC1细胞系相关产品:Hs-852-T细胞、Sci-1细胞、R1800[RA]细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠颅顶前骨细胞系
细胞生长特性:贴壁
DHL-5细胞系相关产品:KS-1 [Human glioblastoma]细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC0070细胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞系相关产品:HS852.T细胞、NCI-H146细胞、Giant Cell Tumor细胞
aTC1 Clone 6细胞系相关产品:D407 RPE细胞、NCTC 1469细胞、4T1细胞
LLCMK2细胞系相关产品:L615细胞、Hs888Lu细胞、Hs_578t细胞
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
RCM1细胞系相关产品:J-82细胞、RMS 1598细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞
293S细胞系相关产品:CL-34细胞、LC1sq细胞、RBL-2H3细胞
NCI-SNU-620细胞系相关产品:NCI-441细胞、MKN 28细胞、MHCC97-L细胞
NTHY-ORI3.1细胞系相关产品:hEEC细胞、Mv1Lu细胞、HMy2.CIR细胞
OCI-LY-7细胞系相关产品:HEC-251细胞、SK-ES-1细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞
GA-10 (Clone 4)细胞系相关产品:JM细胞、CEM细胞、KMY1022细胞
NCI-H2405细胞系相关产品:MDA-MB-134VI细胞、OV3121细胞、MHHCALL2细胞
NCIH889细胞系相关产品:LS180细胞、SK-HEP-1细胞、FHL 124细胞
MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠颅顶前骨细胞系
Hs888T细胞系相关产品:C4 I细胞、LPC-H12细胞、GOS3细胞
AsPC-1细胞系相关产品:MCF12A细胞、HCT-8/V细胞、LSECs细胞
Mel RM细胞系相关产品:MFC细胞、HEK-293-F细胞、H2135细胞
OCI-LY-7细胞系相关产品:HEC-251细胞、SK-ES-1细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞
H2135细胞系相关产品:HCC-1143细胞、Pa14C细胞、OCI-Ly19细胞
Hep G2细胞系相关产品:SKLU1细胞、NCI-H187细胞、C8166-CD4细胞
NCI-SNU-119细胞系相关产品:NRK clone 49F细胞、MDAMB134细胞、H-2172细胞
NPC-TW-039细胞系相关产品:MDAMB231细胞、OV433细胞、LWnt3A细胞
NPC-TW-039细胞系相关产品:MDAMB231细胞、OV433细胞、LWnt3A细胞
OCILY-19细胞系相关产品:HLEB3细胞、SUM149细胞、CV-1细胞
TE13细胞系相关产品:H1944细胞、GM05372细胞、CT26.CL25细胞
74Int细胞系相关产品:RT-BM细胞、H-1581细胞、H6c7细胞
G401细胞系相关产品:PaTu-8988s细胞、GM03571细胞、H322细胞
Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品:Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞
C22 (Clara)细胞系相关产品:EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞
B16-F10--RED细胞系相关产品:3T3(A31)细胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞、HO-8910PM细胞
BMSCs(mBMSCs)细胞系相关产品:U-2OS细胞、Cloudman S91 melanoma细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞
GM00215细胞系相关产品:OS-RC-2细胞、NCIH524细胞、OCI AML2细胞
SW-579细胞系相关产品:OCI/AML3细胞、M-G63细胞、MAVER细胞
PANC0327细胞系相关产品:3T3 L1细胞、EU-2细胞、Granta-519细胞
S91细胞系相关产品:EFM192细胞、Walker-256细胞、MDAMB134细胞
M-14细胞系相关产品:SW626细胞、NIH 3T6细胞、BNL-CL.2细胞
MOLP-8细胞系相关产品:Hs 742.T细胞、HSC-4细胞、SNU475细胞
ONS-76细胞系相关产品:3D4/21细胞、SC细胞、KRC Y细胞
P3X63Ag8653细胞系相关产品:A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞
HEL 299细胞系相关产品:H2085细胞、MM.1S细胞、L-5178-Y细胞
MDA-MB415细胞系相关产品:VMCUB-1细胞、CAL 85-1细胞、Y-1细胞
MDAMB436细胞系相关产品:SW-1990细胞、UMR-106细胞、SJRH-30细胞
Suzhou Human Glioma-44细胞系相关产品:52PE细胞、H-157细胞、B16 melanoma F10细胞
Co320细胞系相关产品:HOMEC细胞、H-508细胞、SU-DHL1细胞
U87-MG细胞系相关产品:NCI-H1385细胞、C3H10T1-2细胞、C33-A细胞
ATDC-5细胞系相关产品:KMST-6细胞、OVCAR-3细胞、MBMEC细胞
PE CA PJ34细胞系相关产品:H-716细胞、H-2286细胞、U-hth74细胞
PLA 802细胞系相关产品:MCF-7ADR细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、MGH-UI细胞
Mc Coy细胞系相关产品:FHs74 Int细胞、526细胞、KASUMI1细胞
MDAMB415细胞系相关产品:293F细胞、SCL-I细胞、MDA436细胞
J45.01细胞系相关产品:H-87细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、KYSE0030细胞
BXPC3细胞系相关产品:ARPE-19细胞、Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、H-7721细胞
D10细胞系相关产品:HDLM2细胞、ACC-2细胞、AAV293细胞
NCI-SNU-387细胞系相关产品:Scott and White No. 13细胞、SK-BR-3细胞、Y1细胞
2V6.11细胞系相关产品:IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞
F36P细胞系相关产品:MiaPaCa-2细胞、WM-266-4细胞、373MG细胞
OVCAR.3细胞系相关产品:Vero C1008细胞、SKNEP1细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞
HD-LM-2细胞系相关产品:EOC 20细胞、GM04679细胞、FU-MMT-1细胞
M-O7e细胞系相关产品:HCE-T细胞、EFO27细胞、NCIH548细胞
R 1610细胞系相关产品:E0771细胞、PA1细胞、MLE12细胞
LAPC4细胞系相关产品:EVSAT细胞、SNU886细胞、Bovine ENDometrial cells细胞
RPMI1846细胞系相关产品:KYSE50细胞、RSC-96细胞、HASMC细胞
U266-B1细胞系相关产品:PANC0403细胞、SK-MEL-5细胞、Super Tube细胞
SW626细胞系相关产品:XWLC-05细胞、VMRC-LCD细胞、HCV29细胞
Chang Cells细胞系相关产品:Z138细胞、G-361细胞、KYSE450细胞
MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠颅顶前骨细胞系
SCaBER细胞系相关产品:QGY7703细胞、Panc327细胞、870细胞
SCL-II细胞系相关产品:C41细胞、GM04154细胞、SNU119细胞
NCI-SNU-620细胞系相关产品:NCI-441细胞、C-33 A细胞、TGBC11TKB细胞
SKNAS细胞系相关产品:MV 3细胞、CoCL3细胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞
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