"PC-3 Adherent人前列腺癌细胞系
细胞背景资料:PC-3源于一位62岁白人男性IV级前列腺腺癌患者的骨转移灶;有低水平的酸性酶活性和5-α-睾酮还原酶活性。
细胞形态:上皮细胞样
传代的操作步骤注意事项:1)操作前要洗手,进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能夹取组织,吸取过营养液的用具不能再烧灼,以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分,工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤:1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许,以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。4)吸除消化液,向瓶内注入Hanks液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液冲洗,直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤:1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
PC-3 Adherent人前列腺癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞,消化温度是37℃;2)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度;(3)吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】1)吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液;2)吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中;3)平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟;4)弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】1)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记;2)分装:将细胞悬液吸出分装至2~3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖;3)继续培养:用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。
786-0细胞系相关产品:NCIH716细胞、TOG细胞、NCIH2291细胞
Merwin Plasma Cell tumor-11细胞系相关产品:PAI细胞、SUM 190细胞、MCF12A细胞
G 292 Clone A 141B1细胞系相关产品:T-HEECs细胞、COV504细胞、X63-AG 8.653细胞
细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SKNO-1细胞系相关产品:HEC-151细胞、IEC-18细胞、C32 [Human melanoma]细胞
NCI-H1417细胞系相关产品:KTCTL-140细胞、SNU-620细胞、HuT78细胞
HS-294细胞系相关产品:KPL-4细胞、RIN-m5F细胞、Huh 7.5细胞
细胞生长特性:贴壁生长,在软琼脂中成簇生长,并可悬浮生长
PC-3 Adherent人前列腺癌细胞系
细胞形态特性:上皮样
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
MFE280细胞系相关产品:EBC1细胞、MG-63细胞、BaF3细胞
VERO C 1008细胞系相关产品:IMCD3细胞、FDCP-1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞
Cates-1B细胞系相关产品:BHK 21细胞、AAV-293细胞、DC 2.4细胞
YH细胞系相关产品:NL-20细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞、NCIH596细胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞系相关产品:QGY7701细胞、CNE-2细胞、PK (15)细胞
LU165细胞系相关产品:WIL2-S细胞、hMSC-BM细胞、HCT 116细胞
PK15细胞系相关产品:WM 2664细胞、HEC151细胞、Mel RM细胞
HCE-T细胞系相关产品:Panc-8_13细胞、CBRH-7919细胞、HTh-74细胞
Clone M-3细胞系相关产品:MDA-MB435细胞、MOPC细胞、SNU-368细胞
MDCK.2细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-10A细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、Hep G2-Luc细胞
G 292 Clone A 141B1细胞系相关产品:T-HEECs细胞、COV504细胞、X63-AG 8.653细胞
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H-508细胞系相关产品:LLCPK1细胞、NCIH727细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞
PC-3 Adherent人前列腺癌细胞系
H-1882细胞系相关产品:IPECJ2细胞、K7M2细胞、MIA PaCa-2细胞
T 84细胞系相关产品:SACC83细胞、Strain L-929细胞、BCP1细胞
DU145细胞系相关产品:RKN细胞、Mc Coy细胞、1.1B4细胞
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A-9细胞系相关产品:LAD 2细胞、IOSE 29细胞、ETCC-007细胞
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RINm5F细胞系相关产品:AMO1细胞、U138MG细胞、SKHEP-1细胞
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E6-1细胞系相关产品:FRhK-4细胞、293 c18细胞、143 B细胞
MDA-MB 231细胞系相关产品:HCT 116细胞、UM-UC-1细胞、HCC1806细胞
NCI-H1954细胞系相关产品:TE13细胞、HUT-226细胞、PCI:SG-231细胞
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PC-3 Adherent人前列腺癌细胞系
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U-87-MG细胞系相关产品:MFHL-2细胞、A375细胞、T98 G细胞
373MG细胞系相关产品:624 MEL细胞、ARPE19细胞、HMEL细胞
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Cates-1B细胞系相关产品:BHK 21细胞、EFM-192C细胞、NCI-SNU-475细胞
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