"KM12-SM Cells|人结肠癌肝转移细胞系
细胞背景资料：结肠癌
细胞形态：上皮细胞样
SW 403细胞系相关产品：NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞
KP-2细胞系相关产品：NBL-S细胞、Colo-206F细胞、NCI-SNU-16细胞
EA.Hy926细胞系相关产品：NCI-H1770细胞、SCCVII细胞、P36细胞
细胞生长：贴壁
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。
KM12-SM Cells|人结肠癌肝转移细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
Sup T-1细胞系相关产品：NTERA-2 cl.D1细胞、MC116细胞、SK-MEL-MeWo细胞
SK-MEL28细胞系相关产品：Hs 606.T细胞、Hs863T细胞、FRTL-5 Cl 2细胞
A2780 CP70细胞系相关产品：Cor L88细胞、B958细胞、HELA-GFP细胞
LNCaP C4-2B细胞系相关产品：EB1细胞、HCE细胞、MAD109细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
KM12-SM Cells|人结肠癌肝转移细胞系
细胞生长特性：贴壁
KE39细胞系相关产品：HFT8810细胞、ChaGo K-1细胞、HBE 135-E6/E7细胞
Giant Cell Tumor细胞系相关产品：L- cell细胞、NCI-H69细胞、E.L.4细胞
C3H/10T1/2-clone8细胞系相关产品：MSF细胞、SW-962细胞、NSC-34细胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞系相关产品：451Lu细胞、BNL CL.2细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞
细胞培养中常用设施及设备：实验室设计：细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。常用设施及设备：1)超净工作台：也称净化工作台，分为侧流式、直流式和外流式三大类。2)无菌操作间：一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒好的无菌物品等。3)操作间：普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物。4)洗刷消毒间：烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。5)分析室：显微镜、计算机及打印机等。
IB-RS-2细胞系相关产品：CNE细胞、RIMEC细胞、MDA-MB-435-S细胞
Balb/3T3-4-Cl31细胞系相关产品：PL-5细胞、Tb1.Lu细胞、CHG5细胞
HS578T细胞系相关产品：MDA-468细胞、EAhy 926细胞、LA-N-6(OAN)细胞
RPMI2650细胞系相关产品：H747细胞、HEC-1-A细胞、HS688AT细胞
HL-60细胞系相关产品：Panc-813细胞、CX-1细胞、KNS62细胞
AHH-1细胞系相关产品：Be Wo细胞、3T6-Swiss albino细胞、WEHI231细胞
SK MEL 28细胞系相关产品：Fetal Human Colon细胞、NP69细胞、HREC细胞
Mv1Lu细胞系相关产品：P3X63-Ag8.653细胞、KU-812细胞、BIU-87细胞
KM12-SM Cells|人结肠癌肝转移细胞系
MUTZ-3细胞系相关产品：H1915细胞、NCIH1734细胞、DV-90细胞
SW579细胞系相关产品：Human ErythroLeukemia细胞、HS766T细胞、Ej138细胞
U-251_MG细胞系相关产品：SKGT4细胞、MDA-MB-134VI细胞、A673细胞
HECCL-1细胞系相关产品：K422细胞、OK细胞、H-1694细胞
SP-2细胞系相关产品：FBHE细胞、U-226AR1细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞
OV 2008细胞系相关产品：FOXNY细胞、HFF-1细胞、NCI-H78细胞
SNU-C1细胞系相关产品：NGP细胞、GLAG-66细胞、Ly7细胞
HBL-100细胞系相关产品：NS-I/1细胞、SKMel-28细胞、Hs27细胞
HBL-100细胞系相关产品：NS-I/1细胞、SKMel-28细胞、Hs27细胞
H-295R细胞系相关产品：SNU-182细胞、HCMEC细胞、UCH1细胞
SNU484细胞系相关产品：Hs819T细胞、NCIH64细胞、OV-2008细胞
Transformed Human Liver Epithelial-3细胞系相关产品：NRCC细胞、TE-1细胞、S.B.细胞
ISHI细胞系相关产品：SF17细胞、MC-26细胞、NCI-SNU-387细胞
H-1688细胞系相关产品：MDA330细胞、LLC-PK-1细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞
OVCAR432细胞系相关产品：LU-65M细胞、Malme-3M细胞、H-2030细胞
SW756细胞系相关产品：UCLA-SO-M14细胞、7860细胞、CAL120细胞
THLE2细胞系相关产品：7860细胞、SCC90细胞、SNK-6细胞
IGROV-1细胞系相关产品：G361细胞、PC-9/GR细胞、RPE-1细胞
CHO K1细胞系相关产品：CAL 78细胞、NCIH1623细胞、NCI-H82细胞
HSAS1细胞系相关产品：hEM15A细胞、NSH细胞、rHSC-99细胞
H-2087细胞系相关产品：PL-12细胞、NIH/3T3细胞、MDA-MB-453细胞
Caov-4细胞系相关产品：IR983F细胞、Cor L51细胞、SW13细胞
IR 983F细胞系相关产品：MDA-MB-231 #4175细胞、Detroit-562细胞、HCT GEO细胞
NW-38细胞系相关产品：Y3-Ag1.2.3细胞、BEAS-2B细胞、Mevo细胞
rRTEC细胞系相关产品：H596细胞、NCI-H1105细胞、MCF7ADR细胞
HRIF细胞系相关产品：CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
L929细胞系相关产品：NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞
751细胞系相关产品：SK-NEP-1细胞、H-1792细胞、RIN-14B细胞
HECV细胞系相关产品：CCD 19Lu细胞、NCTC 3960细胞、PANC-28细胞
Hs870T细胞系相关产品：JG细胞、NCI-H748细胞、SK-MEL-1细胞
HS-445细胞系相关产品：PC.3细胞、HLE-SRA-01/04细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞
SCC-9细胞系相关产品：Ls-174-T细胞、TU 686细胞、A2780/CP70细胞
MDCKII-WT细胞系相关产品：MMAc-SF细胞、HRGEC细胞、JVM2细胞
National Medical Center-Glioma 1细胞系相关产品：HBE 135-E6E7细胞、HSCT6细胞、KYSE 410细胞
Daoy细胞系相关产品：KMB-17细胞、UMRC-2细胞、Rat-2细胞
Malme-3M细胞系相关产品：NCI-H920细胞、HEK-EBNA细胞、Hs 343.T细胞
Hi-5细胞系相关产品：HCC1438细胞、SNU-C2A细胞、As-PC1细胞
Hi-5细胞系相关产品：HCC1438细胞、SNU-C2A细胞、As-PC1细胞
Cattle chondrocytes细胞系相关产品：L5178YR细胞、S37细胞、P3JHR1细胞
GM07404D细胞系相关产品：H1838细胞、NS20Y细胞、KP2细胞
PF382细胞系相关产品：FRTL-5 Cl 2细胞、RWPE1细胞、PC 61 5.3细胞
266 Bl细胞系相关产品：GM03671C细胞、KM-H2细胞、SACC-83细胞
IHC-ST1细胞系相关产品：Be-Wo细胞、H-3255细胞、HPC-Y5细胞
P3-X63-Ag8-6-5-3细胞系相关产品：JJN-3细胞、CT26细胞、HEK293-EBNA1细胞
SUD-4细胞系相关产品：CHOK1细胞、H4-II-E-C3细胞、CHL-IU细胞
HTh74细胞系相关产品：NCI-H1568细胞、KG1A细胞、KY-50细胞
C2BBe1细胞系相关产品：PC3-M细胞、GT39细胞、HPAF2细胞
NCTC929细胞系相关产品：OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞
PLC细胞系相关产品：Hs739T细胞、RPMI-1788细胞、OVCA-432细胞
SKGT4细胞系相关产品：BEND细胞、HCC15细胞、CCRF SB细胞
Clone 166细胞系相关产品：CCD-33Co细胞、COLO 320F细胞、SV40 MES 13细胞
KM12-SM Cells|人结肠癌肝转移细胞系
Hs27细胞系相关产品：K299细胞、H220细胞、GM07404D细胞
Panc 02.03细胞系相关产品：HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞、KP-N-NS细胞、Chinese Hamster Lung细胞
Hs-578-T细胞系相关产品：H2196细胞、SNU-398细胞、Walker-256细胞
P3X63 Ag8.653细胞系相关产品：Panc327细胞、Adeno 293细胞、LS 123细胞
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