"MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病细胞系
细胞背景资料:急性髓系白血病;女性
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
HS-5细胞系相关产品:HEK293-F细胞、HEK293细胞、TN5B14细胞
CORL26细胞系相关产品:WM-239A细胞、KMS11细胞、MDAPC2B细胞
VM Cub 1细胞系相关产品:INS1E细胞、HLEpiC细胞、22Rv1细胞
细胞生长:悬浮
MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H1954细胞系相关产品:Eca109细胞、HEK-293-FT细胞、EAC细胞
NUGC-2细胞系相关产品:LNCaP C4-2细胞、HBE 135-E6/E7细胞、H1703细胞
HAVSMC细胞系相关产品:HCC95细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞、Colon-38细胞
NuTu-19细胞系相关产品:SUP-B15细胞、WI 38细胞、Tb 1-Lu细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞系相关产品:GLRK 13细胞、EJ1细胞、HTR-8/SVneo细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病细胞系
细胞生长特性:悬浮
细胞形态特性:详见细胞说明书
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
WM115-mel细胞系相关产品:L-Wnt3A细胞、SK-MES1细胞、Pt K1细胞
Calf Pulmonary Artery 47细胞系相关产品:SKRC-20细胞、MKN-74细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞
HOS (TE85)细胞系相关产品:H4-IIE-C3细胞、HT-1080细胞、PANC-08-13细胞
HKBML细胞系相关产品:HL-1细胞、8226细胞、SW 962细胞
A3细胞系相关产品:SF-763细胞、X63-Ag8-653细胞、NPA87细胞
GM 2132细胞系相关产品:GM04154B细胞、GI-1细胞、EFM-192A细胞
CCRF-CEM/S细胞系相关产品:Panc05.04细胞、PANC0403细胞、MLOY4细胞
OPM-2细胞系相关产品:NK-92MI细胞、OVCAR-420细胞、MSC细胞
ATC241细胞系相关产品:HT 1080.T细胞、CA922细胞、MDBK细胞
MDA-MB-468细胞系相关产品:V79-4细胞、H82细胞、Ra No. 1细胞
MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病细胞系
H211细胞系相关产品:UCLA-SO-M21细胞、HCa/16A3-F细胞、HGE细胞
COLO 206细胞系相关产品:H-1650细胞、MC-3T3-E1细胞、HEC-1-A细胞
OVCAR 432细胞系相关产品:ME16C细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞、HEI193细胞
NRK细胞系相关产品:DC2.4细胞、Sp2/O-Ag14细胞、NCTC-3960细胞
SW48细胞系相关产品:NCI-H2452细胞、LAN5细胞、RS4:11细胞
F442-A细胞系相关产品:MOLT-16细胞、DH 82细胞、UCLA-SO-M14细胞
F442-A细胞系相关产品:MOLT-16细胞、DH 82细胞、UCLA-SO-M14细胞
GA10细胞系相关产品:H-322细胞、HCT116/L细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞
PNT1-a细胞系相关产品:DHL4细胞、GC-1细胞、MSTO-211细胞
MSTO-211细胞系相关产品:HSC2细胞、TFK1细胞、SK.MEL.2细胞
YES 2细胞系相关产品:SNU520细胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞、SUM-159细胞
MDA MB 134VI细胞系相关产品:KYSE410细胞、DHL-4细胞、PK-136细胞
HuCC-T1细胞系相关产品:HOP 62细胞、P3HR1-BL细胞、H-209细胞
3T3-J2细胞系相关产品:Potorous tridactylus Kidney 1细胞、C-127细胞、VK2细胞
TE 85 ClF-5细胞系相关产品:IGROV细胞、Neuro 2a细胞、NCI-SNU-886细胞
NSI/1-Ag4-1细胞系相关产品:NCI-H2066细胞、Nthy-ori 3.1细胞、alpha TC1 clone 6细胞
CAOV4细胞系相关产品:G-292, clone A141B1细胞、Hs 766细胞、Panc08.13细胞
H295R-S1细胞系相关产品:AU565细胞、AN3-CA细胞、HEK-2细胞
J 111细胞系相关产品:NCI-H2030细胞、MRMT-1细胞、L929细胞
GC-1 spg细胞系相关产品:NCI-H3255细胞、CHL-CL-11细胞、NMC-G1细胞
WM-115细胞系相关产品:NCIH1944细胞、MHHCALL2细胞、SK-BR-3细胞
NTC-200细胞系相关产品:Panc-05.04细胞、MDAMB-231细胞、K7M2 wt细胞
Hs688(A)T细胞系相关产品:WM266-4细胞、mousepodocyte细胞、HTR8/SVneo细胞
SCL-2细胞系相关产品:BNCL-2细胞、LNCaP subline C4-2细胞、PIG3细胞
SP-2细胞系相关产品:FBHE细胞、U-226AR1细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞
MDA 231-LM2-4175细胞系相关产品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、Ca761细胞、H719细胞
MDA435细胞系相关产品:NUGC-3细胞、MFE280细胞、JEG3细胞
MAVER-1细胞系相关产品:AML-193细胞、NCI-H2170细胞、SNU-520细胞
MPC 11细胞系相关产品:KLE细胞、H1105细胞、SEG-1细胞
H-510A细胞系相关产品:HUT28细胞、Line 207细胞、McCoy细胞
WB F344细胞系相关产品:T-HSC细胞、LS-174T细胞、RPMI8226/S细胞
NCIH1650细胞系相关产品:MUTZ1细胞、Anip973细胞、32Dc3细胞
NOMO-1细胞系相关产品:786-O细胞、CII细胞、HEK293T/17细胞
NCI-H2347细胞系相关产品:KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞系相关产品:MDCKII细胞、NCI-HUT-596细胞、SK-ES细胞
HO-8910PM细胞系相关产品:3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
MC-116细胞系相关产品:SBC3细胞、NPA87-1细胞、H-510细胞
VeroE6细胞系相关产品:HANK细胞、SF 767细胞、A-20细胞
MDA-MB-134-VI细胞系相关产品:MDA-MB436细胞、TGW-nu细胞、RAOEC细胞
H-EMC-SS细胞系相关产品:BSC-40细胞、HS 683T细胞、U-373 MG细胞
HuP-T3细胞系相关产品:SK-CO-1细胞、SMMC-7721细胞、HCT-116细胞
CLONE M3细胞系相关产品:P3-X63-Ag 8.653细胞、A3细胞、HPAF-II细胞
LAC细胞系相关产品:SGC 7901细胞、CFSC-8B细胞、Panc 5.04细胞
EB-1细胞系相关产品:SUP-M2细胞、CTLA4 Ig-24细胞、SUD6细胞
R3/1细胞系相关产品:JS1细胞、NK-10A细胞、HSC2细胞
OS-732细胞系相关产品:6T-CEM细胞、H-EMC-SS细胞、M-1细胞
NCIH2023细胞系相关产品:CHP 100细胞、COLO 206细胞、Glioma-261细胞
G361细胞系相关产品:EBNA-293细胞、H-1755细胞、Ly10细胞
CAL39细胞系相关产品:SK-UT-1细胞、RBE细胞、BT-20细胞
COLO 699细胞系相关产品:TE671/RD细胞、UCD-MLA-144细胞、ZR-75-30细胞
ChaGo-K-1细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-7细胞、LS123细胞、CAKI1细胞
MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病细胞系
KU-812-F细胞系相关产品:SEM细胞、Mevo细胞、OCIAML2细胞
EFO27细胞系相关产品:NCIH2171细胞、SNU601细胞、Human Liver-7702细胞
EU-3细胞系相关产品:PANC0203细胞、H-358细胞、MM96L细胞
Hopkins-92细胞系相关产品:SKBr3细胞、PC.3细胞、LTPA细胞
"