"OCI-Ly1 Lymphoblastoid cells人弥漫大B淋巴瘤细胞系
细胞背景资料:弥漫大B淋巴瘤;男性
细胞形态:淋巴母细胞样
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
Tu-212细胞系相关产品:SNU-475细胞、NCI-H526细胞、V79-4细胞
SKCO-1细胞系相关产品:FAT细胞、EU-3细胞、293GP细胞
MCF10A细胞系相关产品:NCI-H647细胞、GP5d细胞、CV-1.K细胞
细胞生长:悬浮
OCI-Ly1 Lymphoblastoid cells人弥漫大B淋巴瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NIH:OVCAR4细胞系相关产品:Ly8细胞、CHL-1细胞、DK-MG细胞
HS852.T细胞系相关产品:HEL-299细胞、NCIH1915细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞
mRMEC细胞系相关产品:A375mel细胞、SCL-II细胞、SK-GT-2细胞
HSC/mHSC细胞系相关产品:Human Embryonic Kidney 293细胞、Danio rerio Gill细胞、hESC细胞
EAhy 926细胞系相关产品:SU86_86细胞、SK-MES-1细胞、huH 1细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
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细胞生长特性:悬浮
细胞形态特性:详见细胞说明书
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
GM05372细胞系相关产品:J 774A.1细胞、HF-91细胞、FaDu细胞
JiyoyeP-2003细胞系相关产品:UCLA SO M14细胞、B5537SKIN细胞、Panc813细胞
G401细胞系相关产品:PaTu-8988s细胞、GM03571细胞、H322细胞
PLC/PRF5细胞系相关产品:KYSE 510细胞、SUPB15细胞、LC1sq细胞
190PT细胞系相关产品:Hs 888.T细胞、OCM1A细胞、Calu 3细胞
ARO细胞系相关产品:2PK3细胞、MOLM-14细胞、A375.S2细胞
HCT15细胞系相关产品:P-3J细胞、HuT 102细胞、OVCAR 8细胞
TE-671细胞系相关产品:LM8细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞、ROS 17/28细胞
HPF细胞系相关产品:2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞
OC-3-VGH细胞系相关产品:SUDHL-6细胞、PJ34细胞、SUD-4细胞
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SNU-368细胞系相关产品:AML12细胞、MS 751细胞、5-8F细胞
Ca 9-22细胞系相关产品:Caco-2 BBe细胞、CHL细胞、CHP212细胞
16HBEo-细胞系相关产品:NCIH3255细胞、MH7A细胞、aNK细胞
Cloudman M3细胞系相关产品:Dami细胞、Hs600T细胞、H1650细胞
HCC94细胞系相关产品:HCC-2218细胞、AN-3细胞、H2227细胞
CBRH-7919细胞系相关产品:MH-S细胞、J774A.1细胞、BT20细胞
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G361-mel细胞系相关产品:KBM-5细胞、TK-1细胞、REC 1细胞
Bac 1.2F5细胞系相关产品:130-T细胞、K422细胞、NTERA-2cl.D1细胞
PECAPJ34细胞系相关产品:BT细胞、C518细胞、Hs611T细胞
PA12细胞系相关产品:R-1059-D细胞、Tadarida brasiliensis 1 lung细胞、EMT-6细胞
HS-766T细胞系相关产品:SW-1353细胞、NCI-H2085细胞、C32r细胞
V-79细胞系相关产品:NCI-SNU-5细胞、H9细胞、SKM1细胞
MOLM-16细胞系相关产品:McA-RH8994细胞、Hs 766T细胞、L-428细胞
H8细胞系相关产品:SNU-354细胞、HCC-78细胞、Jurkat Clone E6-1细胞
A2780-CP细胞系相关产品:Hs 578.T细胞、NG10815细胞、KM-H2细胞
D324细胞系相关产品:IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞
COR-L88细胞系相关产品:FLC-7细胞、JCA1细胞、H-1385细胞
Ly19细胞系相关产品:CRFK细胞、SuperTube细胞、NB9细胞
Hs888 Lu细胞系相关产品:NE-4C细胞、NTERA-2 cl.D1细胞、Ca9-22细胞
Roswell Park Memorial Institute 1788细胞系相关产品:EM3细胞、SGC7901/DDP细胞、C3H10T1/2细胞
SAS细胞系相关产品:GA-10-Clone-4细胞、NPA细胞、H-650细胞
SUM159PT细胞系相关产品:DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞
SW 527细胞系相关产品:UMUC-3细胞、H1435细胞、A375-S2细胞
WIL2S细胞系相关产品:TGW细胞、HOC细胞、SF-539细胞
SN12C细胞系相关产品:H727细胞、D283-MED细胞、TJ905细胞
Ramos(RA1)细胞系相关产品:IPEC-J2细胞、SK-Mel 2细胞、COLO320/DM细胞
SK-N-BE-2c细胞系相关产品:H-1915细胞、Human Foreskin Fibroblast细胞、ABC-1细胞
MDAMB435细胞系相关产品:NCIH647细胞、PTK1细胞、UACC 812细胞
PCI-4.2细胞系相关产品:CWR22-R1细胞、D-283细胞、DMS114细胞
EVSAT细胞系相关产品:MB49细胞、HCC0044细胞、PVEC细胞
mRTEC细胞系相关产品:MOLM-14细胞、MES13细胞、LL2细胞
DLD-1细胞系相关产品:HCC1419细胞、BGC-823细胞、LS1034细胞
H1915细胞系相关产品:MNNG/HOS细胞、AD293细胞、SCC 25细胞
RS4:11细胞系相关产品:PC-3/M细胞、Ramos (RA 1)细胞、COLO-394细胞
RPMI 8226/S细胞系相关产品:AC16 [Human hybrid]细胞、NCIH1650细胞、PANC-1细胞
C4-2 Bone metastatic细胞系相关产品:H-82细胞、SW-527细胞、NBL-7细胞
OCI/AML-5细胞系相关产品:EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞
NCI H226细胞系相关产品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC78细胞、BAR-T细胞
OV90细胞系相关产品:McG-1细胞、Hs 821.T细胞、PANC-03-27细胞
H1882细胞系相关产品:HONE1细胞、L cell细胞、LY细胞
TE-8细胞系相关产品:Wien-133细胞、Daudi细胞、Wien 133细胞
SW 403细胞系相关产品:NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞
NRK52E细胞系相关产品:HCC-1500细胞、SK-MEL-2细胞、SKNEP1细胞
Ku812F细胞系相关产品:159PT细胞、GC-2细胞、CD-18细胞
A2780 CP70细胞系相关产品:Cor L88细胞、B958细胞、HELA-GFP细胞
MDAMB175VII细胞系相关产品:HCV-29细胞、CT-26细胞、WM451细胞
HCC-1395细胞系相关产品:SCaBER细胞、MOLP8细胞、HO1-N1细胞
NCI-H2227细胞系相关产品:H-2286细胞、HC11细胞、FAT细胞
NCM-460细胞系相关产品:H-2227细胞、H-220细胞、Roswell Park Memorial Institute 8226细胞
SKMEL28细胞系相关产品:Panc 05.04细胞、Pt K1细胞、PC3M-1E8细胞
OCI-Ly1 Lymphoblastoid cells人弥漫大B淋巴瘤细胞系
SCC15细胞系相关产品:H1092细胞、NCI-H1694细胞、Colo699细胞
SUNE1细胞系相关产品:GM06141B细胞、Ramos 1细胞、H-889细胞
Jurkat-77细胞系相关产品:Human fetal lung fibroblast 1细胞、SNU-1细胞、SK-MEL3细胞
G401细胞系相关产品:PaTu-8988s细胞、NPC-039细胞、CMT-93细胞
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