"697 Lymphoblastoid cells人前B细胞白血病细胞系
细胞背景资料：B淋巴细胞白血病；男性
细胞形态：淋巴母细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
CHO-K1细胞系相关产品：V 79细胞、MCF 7细胞、NCI-HUT-69细胞
Hmy.2 CIR细胞系相关产品：Balb/c3T3细胞、NE1细胞、KYSE 450细胞
BC-3-H-I细胞系相关产品：CHP126细胞、Lewis Lung细胞、NBL-3细胞
细胞生长：悬浮
697 Lymphoblastoid cells人前B细胞白血病细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-７０℃~-１９６℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-７０℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过０~２０℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。１ml冻存细胞使用１０~２０ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在３×１０(５)活细胞/ml；培养细胞１２到２４小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml冻存细胞加入到大约２５ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约８０x离心２到３分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为３×１０(５)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约１０１２个，可以区分为２００多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G１期开始时一个确定的点G０点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Monomac-1细胞系相关产品：H2228细胞、Panc 10.05细胞、SUM190细胞
NPA87细胞系相关产品：DU 145细胞、Sc-1细胞、SHEP1细胞
He-La细胞系相关产品：NCI-H1703细胞、J 82细胞、THP1细胞
L-1210细胞系相关产品：Cattle chondrocytes细胞、3T3J2细胞、MJ细胞
OCI-AML-5细胞系相关产品：SNU398细胞、16HBE细胞、SK-N-BE(2C)细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
697 Lymphoblastoid cells人前B细胞白血病细胞系
细胞生长特性：悬浮
细胞形态特性：详见细胞说明书
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
SK MEL 28细胞系相关产品：Fetal Human Colon细胞、NP69细胞、HREC细胞
C8166细胞系相关产品：T 84细胞、Pa17C细胞、L-929细胞
RD-ES细胞系相关产品：BSC1细胞、H-810细胞、OCI-AML-4细胞
COLO_320DM细胞系相关产品：HANK-1细胞、SUDHL-8细胞、H22细胞
HUVEC-C[HUVEC]细胞系相关产品：N1S1细胞、M-07e细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞
MOLT-4细胞系相关产品：HEL92.1.7细胞、RGC-5细胞、SNU668细胞
P30/Ohkubo细胞系相关产品：OVCAR 433细胞、SUM 149细胞、CEM T4细胞
Douglas Foster-1细胞系相关产品：NCI-H2227细胞、APRE-19细胞、NIH:OVCAR-3细胞
CTV1细胞系相关产品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、NEC细胞、PANC.1细胞
Molm 14细胞系相关产品：M-O7e细胞、HCO细胞、38C-13细胞
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HSC-6细胞系相关产品：PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞
WiDrTC细胞系相关产品：SNU-251细胞、H-1954细胞、CHO-K1细胞
K562细胞系相关产品：SUM52细胞、LWnt-3A细胞、EO771细胞
NW38细胞系相关产品：H1648细胞、MDA MB 361细胞、NTERA2-D1细胞
GTL16细胞系相关产品：NCI-H1184细胞、H-1341细胞、MBVP细胞
WM-266-mel细胞系相关产品：H2066细胞、SK-RC-39细胞、SPC-A1细胞
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CORL88细胞系相关产品：H-1819细胞、Vx2细胞、MESSA/Dx5细胞
RFL6细胞系相关产品：HT-1197细胞、CAKI.1细胞、COLO 738细胞
NIH-OVCAR-3细胞系相关产品：251 MG细胞、Mono-Mac-6细胞、High-5细胞
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PC3-M细胞系相关产品：Hs 611.T细胞、H-647细胞、HO-8910细胞
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Rat1细胞系相关产品：INS-1细胞、HPaSteC(HPSC)细胞、SW 780细胞
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H-660细胞系相关产品：P3X63细胞、WM266mel细胞、Y3-Ag123细胞
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Turbot Embryonic Cell line细胞系相关产品：RAOEC细胞、SKNEP细胞、Caco-2/BBe细胞
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CT-26 WT细胞系相关产品：Line 697细胞、CAL33细胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞
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H1299细胞系相关产品：C-4-I细胞、Jurkat细胞、T8细胞
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HCC0366细胞系相关产品：MCF/Adr细胞、RN-c细胞、NTC200细胞
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LM3细胞系相关产品：HCC1500细胞、UCLA-SO-M14细胞、H-35细胞
697 Lymphoblastoid cells人前B细胞白血病细胞系
Colo699细胞系相关产品：H-2330细胞、H-661细胞、HCT116/L细胞
SW-579细胞系相关产品：OCI/AML3细胞、P30/0HK细胞、CAL 78细胞
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