"MyLa 2059 Lymphoblastoid cells人皮肤T淋巴细胞瘤细胞系
细胞背景资料:皮肤;T淋巴细胞瘤
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
MOLM-13细胞系相关产品:NCI N87细胞、Sol8细胞、WEHI3B细胞
MPC-11细胞系相关产品:U2OS细胞、SJSA细胞、HIT.T15细胞
HEK 293-H细胞系相关产品:Hs870T细胞、KYSE510细胞、PLA801-95C细胞
细胞生长:悬浮
MyLa 2059 Lymphoblastoid cells人皮肤T淋巴细胞瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RWPE1细胞系相关产品:Walker-256细胞、mIMCD3细胞、P3-X63-Ag8.653细胞
U-87MG ATCC细胞系相关产品:BJ [Human fibroblast]细胞、SW 1222细胞、HT-1376细胞
B95.8细胞系相关产品:BC-3-H-I细胞、HT29细胞、Kit-225-K6细胞
A-10细胞系相关产品:Co-115细胞、CF-PAC1细胞、SJ-RH30细胞
H2286细胞系相关产品:KU-812F细胞、MUVEC细胞、SuDHL 8细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MyLa 2059 Lymphoblastoid cells人皮肤T淋巴细胞瘤细胞系
细胞生长特性:悬浮
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
BALB/3T3 (clone A31)细胞系相关产品:OVCAR5细胞、MUTZ3细胞、BNL CL2细胞
MM6细胞系相关产品:Kit225细胞、Rabbit Kidney 13细胞、C3A细胞
Mo7e细胞系相关产品:H-2196细胞、CAKI 2细胞、NCI-H510细胞
SK.OV.3细胞系相关产品:HME1细胞、NUGC2细胞、Emory University-2细胞
OV1/P细胞系相关产品:CA46细胞、MDAMB435细胞、CCD18细胞
Kasumi-1细胞系相关产品:NCIH1623细胞、HL-60 Clone 15细胞、NCI-H1155细胞
PC3M-1E8细胞系相关产品:CEMx721.174.T2细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞、Hs839.T细胞
L- cell细胞系相关产品:UMR 106细胞、32D CL3细胞、SK MEL-28细胞
HT 1376细胞系相关产品:PG-4(S+L-)细胞、Panc-327细胞、NCIH1993细胞
GH 3细胞系相关产品:HLCL9B10细胞、SP-2/0-AG14细胞、SU-DHL2细胞
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NCIH1693细胞系相关产品:C4-2 B细胞、Metastatic Variant-522细胞、COLO-320DM细胞
CT26.CL25细胞系相关产品:MDA-435细胞、H-64细胞、H2122细胞
HCC-2185细胞系相关产品:hTERT RPE-1细胞、SU-DHL-8细胞、KYSE140细胞
H2452细胞系相关产品:BrCL12细胞、PTK2细胞、EB2细胞
PC-10细胞系相关产品:NCI-HUT-69细胞、NCIH2591细胞、P3X63NS1细胞
Hs 821.T细胞系相关产品:RH-35细胞、SK Mel 24细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞
Hs 821.T细胞系相关产品:RH-35细胞、SK Mel 24细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞
NCI-H187细胞系相关产品:RCK8细胞、Y 1细胞、HEK-293H细胞
NCIH838细胞系相关产品:MAVER1细胞、KMM-1细胞、NE-4C细胞
HEM-L细胞系相关产品:Z310细胞、SU.86.86细胞、ECC-12细胞
T-CAM2细胞系相关产品:SUM-52PE细胞、Clone Y1细胞、H1993细胞
XWLC-05细胞系相关产品:H1770细胞、V79-1细胞、Hela-mock细胞
HCT15细胞系相关产品:P-3J细胞、HuT 102细胞、OVCAR 8细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞系相关产品:Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、Okayama University Medical School-23细胞、FHL124细胞
HLE-SRA-01/04细胞系相关产品:Panc2.03细胞、CEMC7细胞、NTera 2细胞
WERI细胞系相关产品:OV3121细胞、AHH1细胞、HAC-84细胞
H128细胞系相关产品:Caco2BBe细胞、MBVP细胞、MGH-U3 (RN)细胞
HuNS1细胞系相关产品:HHFK细胞、MPASMC细胞、ACHN细胞
Hs 274.T细胞系相关产品:KU.812细胞、HECV细胞、NCIH23细胞
Hs 729T细胞系相关产品:MDA175细胞、3T3-F442A细胞、SW1463细胞
NCIH1915细胞系相关产品:SW260细胞、293细胞、MDA 435细胞
Hs 888.T细胞系相关产品:SPDC-CCL141细胞、LC-MS细胞、TCC-PAN2细胞
WM266mel细胞系相关产品:Hepatoma-22细胞、HEK-293细胞、CEMC1细胞
U 937细胞系相关产品:EAHY-926细胞、N1S1细胞、HBdSMC细胞
U266B1细胞系相关产品:OV433细胞、EO771细胞、OV1063细胞
MV3细胞系相关产品:TE7细胞、IHH-4细胞、RD-2细胞
Hs27F细胞系相关产品:LWnt3A细胞、IPLB-Sf21-AE细胞、HLEpiC细胞
SW 1573细胞系相关产品:Sp 2817细胞、CBRH7919细胞、MDA231细胞
SACC-LM细胞系相关产品:HIEC6细胞、HCC-1187细胞、Tu-177细胞
RM1细胞系相关产品:NCIH208细胞、RAMSCs细胞、CFPAC-1细胞
P3J HR1-K细胞系相关产品:A-101D细胞、HCC1008细胞、NCIH1563细胞
PC-3/M细胞系相关产品:184A1细胞、NCM356细胞、H1155细胞
Ocular Choroidal Melanoma-1细胞系相关产品:XuanWei Lung Cancer-05细胞、A375-SM细胞、CHP 212细胞
LS1034细胞系相关产品:NRK-52E细胞、NCL-H548细胞、SK-N-F1细胞
OCIAML2细胞系相关产品:DF1细胞、Hk-2细胞、GM00637I细胞
38C-13细胞系相关产品:MAVER细胞、HT-3细胞、U343细胞
DHL4细胞系相关产品:IALM细胞、CALU 1细胞、GDM1细胞
Nb 2细胞系相关产品:3T3F442A细胞、A-549细胞、G401细胞
RPPVEC细胞系相关产品:H209细胞、HCT FET细胞、UACC893细胞
SK-MES-1细胞系相关产品:NEC细胞、SU-86-86细胞、Simpson细胞
A 375细胞系相关产品:Hs 746T细胞、MCF-7/ADR细胞、451Lu细胞
SK-RC-42细胞系相关产品:LoMeT-ccRcc细胞、U87细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞
TE32细胞系相关产品:NIH-3T3细胞、LC1-Sq细胞、MDA-MB-415细胞
HNE3细胞系相关产品:GM04678细胞、KYSE-410细胞、LM-TK-细胞
A101D细胞系相关产品:SNU-C2B细胞、NCI-A549细胞、B6Tert-1细胞
LIM-1215细胞系相关产品:PANC0327细胞、CEMx721.174.T2细胞、GM00637F细胞
JB6 clone 30, subclone 7b细胞系相关产品:JB6 Cl 30细胞、RS4;11细胞、RC92A细胞
RGCs细胞系相关产品:SK-MES-1细胞、C81-61细胞、3T6 Swiss Albino细胞
LNCaP C4-2B细胞系相关产品:EB1细胞、HCE细胞、MAD109细胞
RGC-5细胞系相关产品:B16F0细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞、A 72细胞
Lewis Lung Cancer细胞系相关产品:Embryonic Bovine Tracheal cells细胞、HEL-1细胞、Caki-1细胞
MyLa 2059 Lymphoblastoid cells人皮肤T淋巴细胞瘤细胞系
OACP4 C细胞系相关产品:H1581细胞、LLCPK1细胞、MOLT4细胞
Keio University-19-19细胞系相关产品:SF539细胞、SW 626细胞、NKL细胞
SW-756细胞系相关产品:CD-18细胞、GC-2细胞、LTEP-s细胞
Mo7e细胞系相关产品:H-2196细胞、BC-019细胞、UCLA SO M21细胞
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