"6T-CEM Lymphoblastoid cells人T细胞白血病细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
NCI-522细胞系相关产品:SR细胞、He La细胞、TE14细胞
HCC-1569细胞系相关产品:WSUDLCL2细胞、AN3 CA细胞、Hs606T细胞
hTERT RPE-1细胞系相关产品:QGY-7703细胞、CCRFCEM细胞、G519细胞
细胞生长:悬浮
6T-CEM Lymphoblastoid cells人T细胞白血病细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:1:2传代
Kelly细胞系相关产品:OSC19细胞、CHL-IU细胞、CCD-1095Sk细胞
OCIAML4细胞系相关产品:NG10815细胞、A2780/Taxol细胞、3T3 clone A31细胞
NHLF细胞系相关产品:149PT细胞、A-1847细胞、Anglne细胞
HEK 293FT细胞系相关产品:CBRH7919细胞、HBE细胞、IAR 20细胞
Hs695细胞系相关产品:NB4细胞、C-33-A细胞、M109细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
6T-CEM Lymphoblastoid cells人T细胞白血病细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:详见细胞说明书
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
Centre Antoine Lacassagne-148细胞系相关产品:ARO-81细胞、A2058细胞、AdHek细胞
MCF10A细胞系相关产品:NCI-H647细胞、GP5d细胞、CV-1.K细胞
EA hy 926细胞系相关产品:GM00637B细胞、SUDHL-6细胞、HS-68细胞
B16/BL6细胞系相关产品:ketr 3细胞、Huh-7.5细胞、RWPE2细胞
SW 48细胞系相关产品:HCe-8693细胞、MFHL-2细胞、Detroit-562细胞
MLMEC细胞系相关产品:U-266细胞、GDM-1细胞、HuT-78细胞
CV-1细胞系相关产品:CCD 1112SK细胞、HCPEpiC细胞、WiDrTC细胞
CT26细胞系相关产品:H-EMC-SS细胞、GM03569B细胞、H-526细胞
NCIH1836细胞系相关产品:WM-451Lu细胞、HUT-125细胞、OVCAR 433细胞
OK-WT细胞系相关产品:BBE细胞、AML-193细胞、PLA-801C细胞
6T-CEM Lymphoblastoid cells人T细胞白血病细胞系
HMO6细胞系相关产品:NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞
BTI-TN5B1-4细胞系相关产品:HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
OSRC2细胞系相关产品:GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞
IEC 6细胞系相关产品:NCI-H865细胞、H4细胞、Hs 606.T细胞
A 253细胞系相关产品:P31 FUJ细胞、HFLS-RA细胞、FOXNY细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞系相关产品:Hep-3B细胞、KM12 SM细胞、HEK293E细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞系相关产品:Hep-3B细胞、KM12 SM细胞、HEK293E细胞
Ramos细胞系相关产品:CAL51细胞、PC-9细胞、C32 mel细胞
C-26细胞系相关产品:NCI-SNU-878细胞、NS-1-Ag4-1细胞、J-774A.1细胞
Co-115细胞系相关产品:RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞
SNU-1040细胞系相关产品:SCL-2细胞、MSC细胞、SW-1353细胞
CA 46细胞系相关产品:D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞
HSC 3细胞系相关产品:P1-Raji细胞、YES2细胞、SNU368细胞
IMR90细胞系相关产品:Natural Killer-92细胞、Line 522细胞、COLO684细胞
HTori-3.1细胞系相关产品:BEL-7405细胞、TEC细胞、P3HR-1细胞
OVMANA细胞系相关产品:SK-MEL-5细胞、LIXC-002细胞、PA317细胞
MEC-1细胞系相关产品:HPAF-I细胞、HCC-2935细胞、NCI-H889细胞
CCD-112 CoN细胞系相关产品:266 Bl细胞、H211细胞、Panc-02细胞
NuTu 19细胞系相关产品:RGE细胞、PT-K75细胞、HB611细胞
P3-X63-Ag8-6-5-3细胞系相关产品:JJN-3细胞、CT26细胞、HEK293-EBNA1细胞
AGS细胞系相关产品:Glioma 261细胞、B 95.8细胞、H-596细胞
RKOE6细胞系相关产品:SUM 190PT细胞、BCECs细胞、BC-3-H-I细胞
HAVSMC细胞系相关产品:HCC95细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞、Colon-38细胞
H740细胞系相关产品:Neuro2a细胞、SUM-190细胞、IOSE80细胞
NCIH295R细胞系相关产品:TI-73细胞、NCIH1755细胞、NCI-H2591细胞
SUM190PT细胞系相关产品:PLA-801C细胞、MLE 12细胞、NOMO1细胞
HCC366细胞系相关产品:L-363细胞、KYSE70细胞、GM00637H细胞
NCI-H2106细胞系相关产品:Institute for Medical Research-32细胞、SK-OV-433细胞、VMM-5A细胞
HCC-95细胞系相关产品:Kit-225细胞、HDQ-P1细胞、DMS-273细胞
LP-1细胞系相关产品:KYSE520细胞、Colon26细胞、HIBEC细胞
2V6.11细胞系相关产品:IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞
HBdSMC细胞系相关产品:SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞
2V6.11细胞系相关产品:IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞
SGC7901/DDP细胞系相关产品:MHCC 97-H细胞、SUM190PT细胞、Co-115细胞
NCIH548细胞系相关产品:COLO 679细胞、HGC27细胞、NCI-H838细胞
MOLT-4细胞系相关产品:HEL92.1.7细胞、RGC-5细胞、SNU668细胞
WRL-68细胞系相关产品:LS411细胞、MeT-5A细胞、SUDHL-5细胞
NTERA2-D1细胞系相关产品:TGBC11TKB细胞、H378细胞、BT-549细胞
NTERA2-D1细胞系相关产品:TGBC11TKB细胞、H378细胞、BT-549细胞
SW48细胞系相关产品:NCI-H2452细胞、LAN5细胞、RS4:11细胞
ACT-1细胞系相关产品:LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞
253JB-V细胞系相关产品:OV2008细胞、HSC-6细胞、NCI-HUT-520细胞
JJN3细胞系相关产品:DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞
P3X63 Ag8.653细胞系相关产品:Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、HHL-5细胞、MDA231-LM2-4175细胞
SK-ES-1细胞系相关产品:CD18/HPAF细胞、GCT细胞、N87细胞
C 643细胞系相关产品:NPC-TW 01细胞、HTh74细胞、MDA-453细胞
OCI/AML4细胞系相关产品:SK-N-BE-2c细胞、MPC11细胞、OCI/AML4细胞
MKN 7细胞系相关产品:MCAEC细胞、COR-L279细胞、JEG-3细胞
NCIH1623细胞系相关产品:MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞
Opossum Kidney细胞系相关产品:SK RC 52细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、NHA细胞
Calu 6细胞系相关产品:LAN6细胞、H220细胞、K299细胞
6T-CEM Lymphoblastoid cells人T细胞白血病细胞系
P3-X63-Ag8.653细胞系相关产品:IMR 32细胞、SMMC 7721细胞、HCC-15细胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞系相关产品:PC 12细胞、MONO-MAC 6细胞、KYSE0030细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品:RINm-5F细胞、AML-12细胞、SK.OV.3细胞
EA hy 926细胞系相关产品:GM00637B细胞、NCIH1155细胞、Sp 2817细胞
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