"JeKo-1 Lymphoblastoid cells人套细胞淋巴瘤细胞系
细胞背景资料:一位套细胞淋巴瘤患者的巨细胞变种显示白血病转变,从其外周血单核细胞出发建立了MCL细胞株JeKo-1。 JeKo-1细胞EB病毒阴性,并表达一种B细胞表型的IgM。 细胞过表达cyclin D1, Bcl-2, c-Myc 及 Rb 蛋白。 Bcl-1/J(H)基因重排得到了PCR证实。 JeKo-1细胞在SCID小鼠中高成瘤。 [PubMed: 9753063]
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
KYSE 270细胞系相关产品:HOP92细胞、Hs739T细胞、G-361细胞
MO59J细胞系相关产品:PIG3细胞、LICR-LON-HN6细胞、TE7细胞
32D.3细胞系相关产品:TKB-1细胞、Hs 636.T细胞、Capan1细胞
细胞生长:悬浮
JeKo-1 Lymphoblastoid cells人套细胞淋巴瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满。
NCI-H226细胞系相关产品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H820细胞、RA细胞
COLO-320-DM细胞系相关产品:GEO细胞、KYSE-520细胞、SW1353细胞
UMC11细胞系相关产品:U-373-MG细胞、KRC/Y细胞、NTERA-2 cl.D1细胞
Mink Lung细胞系相关产品:NCI-H1915细胞、HCC-44细胞、LNCaP clone FGC细胞
Farage OL细胞系相关产品:F-36P细胞、SK-RC 52细胞、SK-MEL5细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
JeKo-1 Lymphoblastoid cells人套细胞淋巴瘤细胞系
细胞生长特性:悬浮生长
细胞形态特性:淋巴母细胞样
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
N-9细胞系相关产品:PK15细胞、MSF细胞、CG4细胞
HNTEC细胞系相关产品:MES-SA细胞、NRK clone 52E细胞、MCM细胞
CWR22-R1细胞系相关产品:Bat lung细胞、MCF-7B细胞、LS-411细胞
KYSE270细胞系相关产品:2780CP细胞、P3JHR1细胞、BALB/3T3细胞
SH-SY5Y Parental细胞系相关产品:KYSE-70细胞、YD38细胞、Calu6细胞
IPLB-Sf21-AE细胞系相关产品:SNU1细胞、H-1648细胞、MT-2J细胞
A-9细胞系相关产品:LAD 2细胞、IOSE 29细胞、ETCC-007细胞
CMT167细胞系相关产品:NS1/1-Ag4.1细胞、LIM-1215细胞、MC/CAR细胞
OE-21细胞系相关产品:Colon26细胞、Jurkat E6.1细胞、H250细胞
HTori3细胞系相关产品:GM637A细胞、MDA330细胞、P30/Ohkubo细胞
JeKo-1 Lymphoblastoid cells人套细胞淋巴瘤细胞系
ATDC5细胞系相关产品:L23/P细胞、RGC-6细胞、Calf Pulmonary Artery 47细胞
T-98G细胞系相关产品:COLO 320DM细胞、TC7细胞、MV-522细胞
Hs445细胞系相关产品:SK-RC-39细胞、CAL85-1细胞、CEM-C1细胞
Detroit 562细胞系相关产品:SUDHL6细胞、PaTu 8988s细胞、Hs746T细胞
Jurkat, Clone E6-1细胞系相关产品:H2452细胞、HEYA8细胞、MC3T3E1细胞
VeroC1008细胞系相关产品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、CEMO-1细胞、EST81细胞
Panc327细胞系相关产品:KPL-1细胞、BEL-7402细胞、COLO-320HSR细胞
HRIF细胞系相关产品:CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
NCI-H1975细胞系相关产品:LS-174细胞、H-889细胞、Jurkat-E6细胞
MDA361细胞系相关产品:HCC0038细胞、RCC 786-O细胞、QG56细胞
HLE B-3细胞系相关产品:M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Ly1细胞、CZ-1细胞
NCI-H1395细胞系相关产品:NCI-HUT-520细胞、MESSA细胞、H-748细胞
Hs 695T细胞系相关产品:P3/NS1/1-Ag4-1细胞、L-6细胞、Hos TE-85细胞
U-373-MG细胞系相关产品:MC 3T3-E1细胞、WSU-DLCL-2细胞、PANC0327细胞
HN-6细胞系相关产品:ANA-1细胞、MDA-MB 453细胞、OSA细胞
H4-IIE-C3细胞系相关产品:CAL 27细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞、Walker-Ca.256细胞
SU-DHL6细胞系相关产品:HuT78细胞、NCI-H661细胞、IOSE-29细胞
CLONE M3细胞系相关产品:P3-X63-Ag 8.653细胞、A3细胞、HPAF-II细胞
SW839细胞系相关产品:RC-2细胞、Kit 225 K6细胞、SNU182细胞
OAW 42细胞系相关产品:RMG-I细胞、ME-180细胞、RPMI no 8226细胞
L(TK-)细胞系相关产品:MC57G细胞、SUNE-1细胞、RKO-AS-45-1细胞
AKR细胞系相关产品:PA-TU S细胞、RS 4;11细胞、184A1细胞
CMT-167细胞系相关产品:SCLC21H细胞、Hs-578-T细胞、SU8686细胞
SW 579细胞系相关产品:ATN-1细胞、WM 115细胞、EPC细胞
HuNS1细胞系相关产品:HHFK细胞、MPASMC细胞、ACHN细胞
YES-2细胞系相关产品:NCI-H889细胞、OCI-LY-18细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞
Hs683T细胞系相关产品:H1836细胞、PBL细胞、HTori3细胞
KE-39细胞系相关产品:Hs706T细胞、SUP-B1细胞、T47D:A细胞
H-187细胞系相关产品:Hs27F细胞、MDA-MB468细胞、JTC-39细胞
MCF/Adr细胞系相关产品:BE(2)M-17细胞、BEL-7404细胞、CCC-ESF-1细胞
Hs 934.T细胞系相关产品:MV4-11细胞、NCIH2030细胞、G 401细胞
TOV21细胞系相关产品:H-1563细胞、MDA-231细胞、OCI-Ly18细胞
KGN细胞系相关产品:SO-RB50细胞、HS688AT细胞、SKCO1细胞
QBI-HEK 293A细胞系相关产品:EU-2细胞、MN9D细胞、CHAGOK1细胞
RPMI-1788细胞系相关产品:NCIH1693细胞、LK2细胞、SCC-1395细胞
CWR22R-V1细胞系相关产品:HLE-SRA-01/04细胞、NG-108-15细胞、CAL12T细胞
CAOV4细胞系相关产品:G-292, clone A141B1细胞、Hs 766细胞、Panc08.13细胞
MES13细胞系相关产品:FTC-133细胞、COLO201细胞、A-2780细胞
IGR-OV1细胞系相关产品:H1734细胞、EMT6细胞、MFD-1细胞
CP70细胞系相关产品:HUTU80细胞、HEL-92-1-7细胞、NCI-N87细胞
OCI-Ly19细胞系相关产品:T84细胞、K-1735细胞、TNC-1B12B4细胞
SNU368细胞系相关产品:NB-4细胞、GM02219细胞、Detroit562细胞
H650细胞系相关产品:K1细胞、SK HEP 01细胞、RLE-6TN细胞
OCUM-1细胞系相关产品:MDA-MB-157细胞、NCI-H1666细胞、HEK (AD293)细胞
Walker-Ca.256细胞系相关产品:Tu 177细胞、WSU-DLCL(2)细胞、KNS42细胞
SK-N-MC细胞系相关产品:Panc-02细胞、TE354T细胞、MDA-MB231细胞
PG-4细胞系相关产品:SuDHL 5细胞、786-O细胞、Karpas299细胞
NCI-A549细胞系相关产品:M14-MEL细胞、AdHek细胞、U266 Bl细胞
MDCK Type II细胞系相关产品:LMH细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞、HEC-1A细胞
SUDHL-4细胞系相关产品:NCI H345细胞、NW-MEL-38细胞、H-676B细胞
H-1993细胞系相关产品:Panc02细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞、293A细胞
JeKo-1 Lymphoblastoid cells人套细胞淋巴瘤细胞系
NS-1-Ag4-1细胞系相关产品:H661细胞、Tb1Lu细胞、OUMS27细胞
293 c18细胞系相关产品:NCI-SNU-668细胞、C666-1细胞、NCI H226细胞
KP4细胞系相关产品:NS653细胞、OC 316细胞、Hs-578Bst细胞
CWR22-R1细胞系相关产品:Bat lung细胞、H125细胞、M-NFS-60细胞
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