"NCI-H929 Lymphoblastoid cells人浆细胞白血病细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
SK-ES1细胞系相关产品:HS-5细胞、PSN1细胞、PFSK1细胞
SW1463细胞系相关产品:H69细胞、SF539细胞、TE1细胞
Caco2-BBE细胞系相关产品:Hs729细胞、OCI-AML5细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞
细胞生长:悬浮
NCI-H929 Lymphoblastoid cells人浆细胞白血病细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞传代方法:保持细胞密度在5×105—1×106 cells/ml之间,每周换液2—3次
P-3J细胞系相关产品:TE14细胞、NCI-H1944细胞、VMCUB-1细胞
NCTC-3960细胞系相关产品:JVM-2细胞、HuT102细胞、TPC-1细胞
F9细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞
SW 1783细胞系相关产品:BEL7404细胞、P-388细胞、LTPA细胞
SUM159PT细胞系相关产品:DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H929 Lymphoblastoid cells人浆细胞白血病细胞系
细胞生长特性:悬浮生长
细胞形态特性:淋巴母细胞样
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
NCI-H446细胞系相关产品:WM 451-Lu细胞、TALL1细胞、H-226细胞
RN细胞系相关产品:SCC-4细胞、4T1细胞、NCI-H1963细胞
16HBE140细胞系相关产品:NCI-SNU-475细胞、LCLC-103H细胞、BTI-TN5B1-4细胞
Calu3细胞系相关产品:PY8119细胞、CV1细胞、TM3细胞
KP-N-RT-BM细胞系相关产品:HCT-116细胞、190PT细胞、VERO C 1008细胞
Human Kidney-2细胞系相关产品:NCI-H1975细胞、B16-F10细胞、H-1876细胞
MOLM-16细胞系相关产品:McA-RH8994细胞、Hs 766T细胞、L-428细胞
CEM/C1细胞系相关产品:H-2106细胞、DH-82细胞、NK-92.05细胞
NIHOVCAR3细胞系相关产品:FL62891细胞、H2052细胞、MC-116细胞
LPC-H12细胞系相关产品:SK-RC 42细胞、MCF7/WT细胞、Kuramochi细胞
NCI-H929 Lymphoblastoid cells人浆细胞白血病细胞系
L(TK-)细胞系相关产品:MC57G细胞、SUNE-1细胞、RKO-AS-45-1细胞
TGW细胞系相关产品:Clone Y-1细胞、ARO细胞、RCC-JF细胞
C3H/10T1/2 clone 8细胞系相关产品:TE 32细胞、PIG1细胞、RPMI-8402细胞
OLN-93细胞系相关产品:SRA 01/04细胞、C3H/10T1/2细胞、NS1/1-Ag4.1细胞
Panc 03.27细胞系相关产品:Scott细胞、PANC-04-03细胞、MAVER1细胞
C4-I细胞系相关产品:BpRc1细胞、D-341 Med细胞、Hs 888.Lu细胞
C4-I细胞系相关产品:BpRc1细胞、D-341 Med细胞、Hs 888.Lu细胞
NMCG1细胞系相关产品:HBVSMC细胞、SaOS-2细胞、HEK-EBNA细胞
RCM1细胞系相关产品:J-82细胞、RMS 1598细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞
SUPT-1细胞系相关产品:RIN14B细胞、Hs852T细胞、Cates 1B细胞
NALM-6细胞系相关产品:RCCJF细胞、NIH:OVCAR3细胞、MCF.7细胞
Hs870T细胞系相关产品:JG细胞、NCI-H748细胞、SK-MEL-1细胞
HCC1599细胞系相关产品:ARO 81-1细胞、ChaGo-K-1细胞、HCC95细胞
Panc_05_04细胞系相关产品:JIMT1细胞、H2172细胞、McARH7777细胞
Human Kidney-2细胞系相关产品:NCI-H1975细胞、B16-F10细胞、H-1876细胞
L-132细胞系相关产品:CAL851细胞、EVSA/T细胞、OCI/AML5细胞
LTEP-a2细胞系相关产品:S37细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞、WRL68细胞
PANC-28细胞系相关产品:CHAGOK1细胞、NCI-H510A细胞、H-EMC-SS细胞
SUD4细胞系相关产品:HNTEC细胞、T HEECs细胞、Hs688(A)T细胞
MDCC MSB1细胞系相关产品:MLA-144细胞、DoTc2-4510细胞、Porcine Kidney-13细胞
PA I细胞系相关产品:GM00637H细胞、P3J.HR1K细胞、EU-2细胞
HSAS3细胞系相关产品:PE/CA-PJ-34细胞、Buffalo Rat Liver-3A细胞、HUTU80细胞
Hs611T细胞系相关产品:B16-F0细胞、MFD-1细胞、NCIH1385细胞
DSL-6A/C1细胞系相关产品:OVCAR-420细胞、MDA175细胞、A427细胞
H-1693细胞系相关产品:3 LL细胞、Hs 274细胞、IHH4细胞
P3.653细胞系相关产品:Ect1/E6E7细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、H446细胞
Jurkat细胞系相关产品:Pt-K1细胞、ACC2细胞、mRMEC细胞
P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品:NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞
8402细胞系相关产品:VMCUB1细胞、BMDC细胞、WM 2664细胞
SK-MEL-2-LUC细胞系相关产品:VE细胞、CORL105细胞、B16-F10细胞
HSC-1细胞系相关产品:293 H细胞、HOP 62细胞、WI-38细胞
P30/Ohkubo细胞系相关产品:OVCAR 433细胞、SUM 149细胞、CEM T4细胞
CNLMG-B5537SKIN细胞系相关产品:UPCI:SCC90细胞、L 540细胞、SK-N-BE2细胞
U-266细胞系相关产品:EA.hy 926细胞、NCI H508细胞、HCC-1500细胞
FBHE细胞系相关产品:NCI-H1781细胞、A2780/CP细胞、MHCC97L细胞
RBMVEC细胞系相关产品:DoTc2 4510细胞、G401细胞、IPLB-SF-21-AE细胞
OCI-Ly7细胞系相关产品:NRK 49F细胞、HFT 8810细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞
L cells细胞系相关产品:HMC3细胞、M619细胞、MKN 28细胞
L cells细胞系相关产品:HMC3细胞、M619细胞、MKN 28细胞
MC3T3-L1细胞系相关产品:C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞
NCI-H1876细胞系相关产品:H-647细胞、RBL细胞、RKO细胞
Raji细胞系相关产品:VAESBJ细胞、Hs737T细胞、HGC-27细胞
Immortal Pig Intestinal-2I细胞系相关产品:CHO Lec1细胞、LM TK negative细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞
C3H10T1/2细胞系相关产品:NCIH1573细胞、PCI-04B细胞、HCEpiC细胞
746T细胞系相关产品:MNNG-HOS (Cl#5)细胞、PC3M-2B4细胞、VM-CUB1细胞
JVM-3细胞系相关产品:KYSE180细胞、HEL92.1.7细胞、Tca8113细胞
DH82细胞系相关产品:IM-95细胞、J774 A1细胞、NCIH1793细胞
SNU-C2A细胞系相关产品:AAV293细胞、SNU-354细胞、SNU-5细胞
NCTC clone 1469细胞系相关产品:Hs 729T细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM 239细胞
AML-2细胞系相关产品:OCI-Ly7细胞、NCI-H1755细胞、C-28I2细胞
TE354.T细胞系相关产品:S.B.细胞、HCC44细胞、RS1细胞
NCI-H929 Lymphoblastoid cells人浆细胞白血病细胞系
MRC9细胞系相关产品:HLEB-3细胞、NCI-H226细胞、NCIH510细胞
GM01232E细胞系相关产品:P3.times.63 Ag8.653细胞、FL-83B细胞、NCTC-929细胞
OVCAR5细胞系相关产品:SK-NSH细胞、RPMI 6666细胞、Caco2BBe细胞
16HBE140细胞系相关产品:NCI-SNU-475细胞、NCTC 929细胞、HO1N1细胞
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