"JM-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
UCH-1细胞系相关产品:RCC10RGB细胞、LA-N-5细胞、H1944细胞
U118-MG细胞系相关产品:SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞
SK UT 1细胞系相关产品:SNU216细胞、HD11细胞、MN60细胞
细胞生长:悬浮
JM-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:换液2-3次一周
Wistar Institute, Susan Hayflick细胞系相关产品:HEK293-EBNA1细胞、RPMI-1846细胞、JROECL 21细胞
H-1651细胞系相关产品:A431/P细胞、SC1细胞、LTEP-sm细胞
A2058细胞系相关产品:SW-480细胞、AMC-HN8细胞、A7r5细胞
Institute for Medical Research-90细胞系相关产品:CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
SKMEL-2细胞系相关产品:M-20细胞、GC-2spd(ts)细胞、BAC1.2F5细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
JM-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
细胞生长特性:悬浮生长
细胞形态特性:淋巴母细胞样
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
University of Arizona Cell Culture-893细胞系相关产品:GM2132细胞、SKBr3细胞、Sp2/O细胞
H-2195细胞系相关产品:H-226细胞、Hs683细胞、D324 Med细胞
FRO 81-2细胞系相关产品:hTERT-RPE1细胞、Ect1/E6E7细胞、IMCD3细胞
HET-1A细胞系相关产品:GM3190细胞、Caco2-BBE细胞、LX-2细胞
SNU668细胞系相关产品:Malme-3M细胞、H-446细胞、DU 4475细胞
DMS-114细胞系相关产品:MDAMB-231细胞、253J细胞、293AD细胞
KYSE 510细胞系相关产品:NCIH1105细胞、RK 13细胞、Hs737T细胞
UMNSAH/DF#1细胞系相关产品:SUM 149细胞、HELF细胞、IEC-18细胞
SK.MEL.2细胞系相关产品:Strain KB细胞、NIH-3T3-L1细胞、95-D细胞
NCIH1568细胞系相关产品:THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞
JM-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
CAKI.1细胞系相关产品:SK-ChA1细胞、NKM1细胞、HGMC细胞
H4IIE细胞系相关产品:H-1975细胞、M109细胞、C4I细胞
HEK 293-F细胞系相关产品:TR 146细胞、Chang liver细胞、RPMI No. 1846细胞
YD38细胞系相关产品:AG06814-J细胞、OVCAR-8/ADR细胞、143B细胞
IPLB-Sf21-AE细胞系相关产品:SNU1细胞、H-1648细胞、MT-2J细胞
EFM-192C细胞系相关产品:C-33A细胞、MDAPC2B细胞、293-H细胞
EFM-192C细胞系相关产品:C-33A细胞、MDAPC2B细胞、293-H细胞
Wistar Institute, Susan Hayflick细胞系相关产品:HEK293-EBNA1细胞、RPMI-1846细胞、JROECL 21细胞
IM9细胞系相关产品:Chang Cells细胞、W256细胞、FTC133细胞
Chinese Hamster Ovary细胞系相关产品:Hs934T细胞、SKBR-3细胞、MGC-803细胞
COLO206F细胞系相关产品:TC7细胞、INS1细胞、MonoMac6细胞
Mo7e细胞系相关产品:H-2196细胞、CAKI 2细胞、NCI-H510细胞
MDA-MB436细胞系相关产品:LA-795细胞、X63Ag8.653细胞、Colon 38细胞
MADISON LUNG TA-109细胞系相关产品:PK136细胞、MIA PaCa-2细胞、C666-1细胞
SW 756细胞系相关产品:G422细胞、RBL-1细胞、CCD 966SK细胞
H-2073细胞系相关产品:Sf21细胞、KMB17细胞、Huh-7细胞
HCAEC细胞系相关产品:NCIH522细胞、H.Ep.-2细胞、PLC细胞
CCD-18Co细胞系相关产品:TW 01细胞、NCI-157细胞、A2780 CP70细胞
HHFK细胞系相关产品:HEMCSS细胞、MDA-MB-134细胞、Michigan Cancer Foundation-10A细胞
SK-N-BE(1)n细胞系相关产品:NSC34细胞、H-2023细胞、EAHY-926细胞
Human Corneal Endothelial Cells-12细胞系相关产品:SGC-7901/DDP细胞、BAEC细胞、UPCI-SCC-154细胞
H2087细胞系相关产品:MIN6细胞、HCC0827细胞、CCD-33Co细胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞系相关产品:SHEE细胞、NCI-H660细胞、NS-1-Ag4-1细胞
KM-H2细胞系相关产品:HMC-1细胞、CaSki细胞、KP-2细胞
SK MEL-28细胞系相关产品:Mv 1 Lu细胞、SK-ChA1细胞、RGCs细胞
LU65细胞系相关产品:130 T细胞、H2405细胞、SW 1573细胞
NCI-H196细胞系相关产品:NIE-115细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、L615细胞
LNT-229细胞系相关产品:H1435细胞、MAVER-1细胞、C-33A细胞
H1770细胞系相关产品:H-209细胞、HuH1细胞、Ku812细胞
HCO细胞系相关产品:SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞
GAK细胞系相关产品:RSC-364细胞、C-28I2细胞、SVEC4-10细胞
CHO K1细胞系相关产品:CAL 78细胞、NCIH1623细胞、NCI-H82细胞
KU19-19细胞系相关产品:LTEPa2细胞、GalK1细胞、PLB-985细胞
SUP-M2细胞系相关产品:SW1271细胞、D283MED细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞
H1581细胞系相关产品:HSC-6细胞、L 132细胞、SPDC-CCL141细胞
NCI H548细胞系相关产品:HCC 38细胞、MDAMB175VII细胞、AQ-Mel细胞
NCI-SNU-16细胞系相关产品:IHH细胞、NTERA-2细胞、T98细胞
J774细胞系相关产品:LuCL4细胞、SKM1细胞、H-2066细胞
University of Arizona Cell Culture-812细胞系相关产品:WEHI 231细胞、HCC-1143细胞、NCIH460细胞
J-111细胞系相关产品:Vero 76 clone E6细胞、LAD2细胞、HT-22细胞
AG06814-N细胞系相关产品:H-838细胞、SKNO1细胞、TE8细胞
HEK-293-F细胞系相关产品:201T细胞、NCI-H1048细胞、STO细胞
SCC25细胞系相关产品:Hs-940细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、P3-Jiyoye细胞
SCCVII/St细胞系相关产品:Panc-327细胞、LNCaP-ATCC细胞、LS 180细胞
D562细胞系相关产品:MIA-PaCa-2细胞、HFT8810细胞、SHSY5Y细胞
P3JHR-1细胞系相关产品:SV40-MES13细胞、NCI-H920细胞、SKNBE细胞
H3255细胞系相关产品:RCC-4细胞、KP4细胞、KU-812F细胞
PLB-985细胞系相关产品:NCI-H676细胞、CAL 12细胞、KMH2细胞
NCI-H322细胞系相关产品:CEM-T4细胞、MCA205细胞、BT 20细胞
UCLA-SO-14细胞系相关产品:NCI-H650细胞、HDSMC细胞、H-711细胞
JB6 Cl 30细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞、HEY-A8细胞、NCIH1184细胞
JM-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
HNE-1细胞系相关产品:SP-2细胞、DMS 79细胞、NCI-SNU-119细胞
SLMT1细胞系相关产品:L 428细胞、LN-18细胞、HEK 293T/17细胞
OCUM-1细胞系相关产品:MDA-MB-157细胞、QGY-7703细胞、LOU-NH91细胞
FRO 81-2细胞系相关产品:hTERT-RPE1细胞、CC-LP-1细胞、Hela-mock细胞
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