"P3HR-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:淋巴母细胞样
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
DSL6A/C1细胞系相关产品:HSC-4细胞、SW 900细胞、LK-2细胞
201T细胞系相关产品:Fetal Bovine Heart Endothelial细胞、KALS-1细胞、MDBK (NBL-1)细胞
NCIH2085细胞系相关产品:Hs840T细胞、Mino细胞、IEC6细胞
细胞生长:悬浮
P3HR-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞传代方法:每2-3天换液
C918细胞系相关产品:BNL CL.2细胞、HCT-15细胞、MDA435细胞
MS1细胞系相关产品:H1522细胞、MS-751细胞、YES-2细胞
NCI-H2087细胞系相关产品:SW962细胞、2B4细胞、KYSE30细胞
SKGT2细胞系相关产品:Hs 895 T细胞、SK LU 1细胞、TE 32细胞
Caco2BBe细胞系相关产品:Tn-5B1-4细胞、OVCAR4细胞、LS174T细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
P3HR-1 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞瘤细胞系
细胞生长特性:悬浮生长
细胞形态特性:淋巴母细胞样
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
P30 OHK细胞系相关产品:Ly1细胞、M-1细胞、SK-MEL-31细胞
KYSE410细胞系相关产品:PTK-1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、WPE-int细胞
NP-69细胞系相关产品:H-4-II-E细胞、Huh7.5细胞、NCIH1105细胞
LM1细胞系相关产品:MDA231-LM2-4175细胞、TCC Sup细胞、149PT细胞
Colo-201细胞系相关产品:NK-92 MI细胞、BEL 7404细胞、Ha Fe细胞
LC-MS细胞系相关产品:NCIH1963细胞、SNU601细胞、NCI-H2170细胞
F56 [Human neoplasm]细胞系相关产品:CL-11细胞、PANC-02-03细胞、TE-85 clone 5细胞
GC9811-P细胞系相关产品:Anip973细胞、HNE-3细胞、BE2_C细胞
NOR-10细胞系相关产品:ROS-17/2.8细胞、H146细胞、SKNFI细胞
SK RC 20细胞系相关产品:OV1-P细胞、3T3-J2细胞、P3X63Ag8细胞
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MES 13细胞系相关产品:MCA38细胞、HLEB-3细胞、SUM 149PT细胞
HIT clone T15细胞系相关产品:NL20细胞、SVEC4-10细胞、NW-38细胞
Malme-3M细胞系相关产品:NCI-H920细胞、HEK-EBNA细胞、Hs 343.T细胞
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PA-TU S细胞系相关产品:NCI-H322T细胞、IMR 32细胞、NCI-ADR-RES细胞
PA-TU S细胞系相关产品:NCI-H322T细胞、IMR 32细胞、NCI-ADR-RES细胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞系相关产品:PC 12细胞、NCI-H810细胞、Hs 578.T细胞
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Epithelioma Papulosum Cyprini细胞系相关产品:EOMA细胞、McCoy B细胞、MES-SA Dx5细胞
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SK RC 20细胞系相关产品:OV1-P细胞、3T3-J2细胞、P3X63Ag8细胞
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MOLT.4细胞系相关产品:H295细胞、A2780S细胞、DCS细胞
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F-36P细胞系相关产品:Hepa 1-6细胞、NB9细胞、PLMVEC细胞
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H-524细胞系相关产品:SRA01/04细胞、FC33细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞
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AU-Mel细胞系相关产品:RKO-AS45-1细胞、B 95-8细胞、NCI-157细胞
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H292细胞系相关产品:SNU620细胞、BALB/3T3 clone A31细胞、NCI-H157细胞
BC-028细胞系相关产品:FHC细胞、H446细胞、IAR20细胞
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BXPC3细胞系相关产品:ARPE-19细胞、Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、H-7721细胞
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