"NCI-BL1339 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:淋巴母细胞样
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
JOSK-M细胞系相关产品:SKNO-1细胞、Colo699细胞、HcaF细胞
TH1细胞系相关产品:A9(Hamprecht)细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞、SC1细胞
HCC1428细胞系相关产品:P-388细胞、CTLL-2细胞、NR8383.1细胞
细胞生长:悬浮
NCI-BL1339 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:3-4天换液1次。
3T3F442A细胞系相关产品:Microbiological Associates-104细胞、JB-6 Cl 30细胞、NWA细胞
Renal Carcinoma细胞系相关产品:LNCaP subline C4-2细胞、H9c2细胞、Hs 888.T细胞
KYSE-450细胞系相关产品:MHHCALL2细胞、LA-N-1细胞、SW480细胞
SUDHL1细胞系相关产品:GC-1 spg细胞、ZR7530细胞、Huh 7.5.1细胞
BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品:NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-BL1339 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞系
细胞生长特性:悬浮生长
细胞形态特性:淋巴母细胞样
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
MN-9D细胞系相关产品:Mono Mac6细胞、BT549细胞、H-2405细胞
OVCAR8/ADR细胞系相关产品:CTLA4 Ig-24细胞、RBL-2H3细胞、LN229细胞
THP-1(ATCC)细胞系相关产品:J.E6-1细胞、BLO-11细胞、Vero 76细胞
N1S1细胞系相关产品:NTera2 cl.D1细胞、373MG细胞、RCF细胞
SUM159PT细胞系相关产品:DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞
KYSE0520细胞系相关产品:Caki-1细胞、RM-1细胞、S16细胞
KOSC-2细胞系相关产品:OAW42细胞、Mel-MeWo细胞、T-ALL-1细胞
LAC细胞系相关产品:SGC 7901细胞、CFSC-8B细胞、Panc 5.04细胞
H345细胞系相关产品:NPC-TW039细胞、UMR106细胞、P3-X63-Ag8细胞
BHT101细胞系相关产品:NBL-7细胞、MB231细胞、UMUC-3细胞
NCI-BL1339 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞系
McG-1细胞系相关产品:Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞
High-5细胞系相关产品:NCIH446细胞、CL-40细胞、HCC-1359细胞
JM-Jurkat细胞系相关产品:PFSK-1细胞、TE85细胞、Hs274T细胞
H-2108细胞系相关产品:HEK;293细胞、KM932细胞、HS578细胞
GDM-1细胞系相关产品:MCF7-GFP细胞、B16 melanoma F10细胞、UWB1289细胞
H220细胞系相关产品:H-676细胞、L cells细胞、EL 4细胞
H220细胞系相关产品:H-676细胞、L cells细胞、EL 4细胞
MSB1细胞系相关产品:LIPF178C细胞、HGC-27细胞、KPL1细胞
NCI-H735细胞系相关产品:OVCA433细胞、MES-SA Dx5细胞、OsACL细胞
Hs888 Lu细胞系相关产品:NE-4C细胞、NTERA-2 cl.D1细胞、Ca9-22细胞
NCI-H1770细胞系相关产品:SKGIIIA细胞、HuH28细胞、TK.10细胞
KY70细胞系相关产品:MC3T3-E1 Subclone 4细胞、SNU398细胞、Malme-3M细胞
B16/F10细胞系相关产品:Panc_05_04细胞、CAL 39细胞、HCC366细胞
CAL-27细胞系相关产品:CAL-51细胞、My-La 2059细胞、NCI-747细胞
Mouse podocyte细胞系相关产品:PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞
T98细胞系相关产品:SUPB-15细胞、CF PAC-1细胞、MV-4-11细胞
Tn5B1-4细胞系相关产品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、B16/F10细胞、RCC10RGB细胞
WERI-Rb1细胞系相关产品:GCT细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、CAOV3细胞
Hs746T细胞系相关产品:CEMC1细胞、TE-6细胞、U-87细胞
Hs746T细胞系相关产品:CEMC1细胞、TE-6细胞、U-87细胞
CT 26细胞系相关产品:NCI/ADR-RES细胞、CMT 64细胞、GM-346细胞
LCLC-103H细胞系相关产品:Mouse Forestomach Carcinoma细胞、RPMI 7666细胞、PA-TU-8988S细胞
MUGCHOR1细胞系相关产品:no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞
Hs 683.T细胞系相关产品:TPC1细胞、RPTC细胞、HS5细胞
293AD细胞系相关产品:AHH-1细胞、GC-1spg细胞、UCLA-SO-14细胞
SW.620细胞系相关产品:GM-215细胞、MCCAR细胞、SK-NMC细胞
SW-579细胞系相关产品:OCI/AML3细胞、M-G63细胞、MAVER细胞
NP69细胞系相关产品:H-2023细胞、LM(TK-)细胞、NCI-H1573细胞
HEK 293FT细胞系相关产品:CBRH7919细胞、HBE细胞、IAR 20细胞
HCGC细胞系相关产品:BC3H-1细胞、PG-BE1细胞、OCUM-1细胞
LS1034细胞系相关产品:NRK-52E细胞、NCL-H548细胞、SK-N-F1细胞
32D:cl3细胞系相关产品:Farage OL细胞、LS174细胞、HepG2/C3A细胞
SACCLM细胞系相关产品:HEK 293细胞、HCT/Taxo1细胞、Det. 562细胞
T9细胞系相关产品:PLA801D细胞、CWR22-R1细胞、NCIH250细胞
OCI-Ly 1细胞系相关产品:TE8细胞、RGCs细胞、A549 ATCC细胞
MDA-MB-436细胞系相关产品:CCRF/CEM/0细胞、MRASMC细胞、SCC090细胞
HuPT4细胞系相关产品:MC-38细胞、Loucy细胞、SJSA1细胞
H2081细胞系相关产品:hFOB细胞、NCI-H2171细胞、CP70细胞
H2081细胞系相关产品:hFOB细胞、NCI-H2171细胞、CP70细胞
Normal fibroblast-10细胞系相关产品:58F细胞、PNT1A细胞、JVM-2细胞
IB-RS-2细胞系相关产品:CNE细胞、RIMEC细胞、MDA-MB-435-S细胞
L540细胞系相关产品:MES-SA/Dx5细胞、P31 FUJ细胞、RS(4;11)细胞
Hs294细胞系相关产品:HIT细胞、COLO 201细胞、MDA-MB435细胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞系相关产品:H9c2 (2-1)细胞、R1800[RA]细胞、M059K细胞
HANK-1细胞系相关产品:HPAF-II/CD18细胞、Hs274T细胞、NCI-H1618细胞
HNE-3细胞系相关产品:SK ES 01细胞、SK 1细胞、HOS-MNNG细胞
PC3-M细胞系相关产品:Hs 611.T细胞、H-647细胞、HO-8910细胞
HepaRG细胞系相关产品:Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞
HS 445T细胞系相关产品:MDA.MB.435细胞、PK15细胞、L-cells细胞
AR41P细胞系相关产品:SW527细胞、P3/X63/Ag8.653细胞、EC-GI-10细胞
WI-38细胞系相关产品:RD细胞、LMTK-细胞、OCI-AML3细胞
NCI-BL1339 Lymphoblastoid cells人B淋巴细胞系
HRC-99细胞系相关产品:CW-2细胞、HA1800细胞、MO59J细胞
LN382细胞系相关产品:526mel细胞、NCI-H28细胞、LN-382细胞
PL-45细胞系相关产品:KPNRTBM1细胞、MN60细胞、HCa/16A3-F细胞
THP-1(ATCC)细胞系相关产品:J.E6-1细胞、HUT 125细胞、Caco-2 BBe细胞
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