"NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依赖性小鼠白血病细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
CESS细胞系相关产品：EFM-19细胞、B16 melanoma细胞、CaSki细胞
HuT-102细胞系相关产品：102PT细胞、SK-UT-1细胞、P3-X63Ag8细胞
VSC4.1细胞系相关产品：UCH-1细胞、KE-37细胞、118 MG细胞
细胞生长：悬浮
NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依赖性小鼠白血病细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法：１：３传代
DoTc2-4510细胞系相关产品：MS-751细胞、RPMI no. 8226细胞、SG231细胞
HONE1细胞系相关产品：T2 (174 x CEM.T2)细胞、TR-146细胞、Rin-M-5F细胞
OCI/AML-5细胞系相关产品：EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞
Tu 177细胞系相关产品：KP-4细胞、NCI-SNU-1细胞、H-82细胞
SACCLM细胞系相关产品：HEK 293细胞、HCT/Taxo1细胞、Det. 562细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依赖性小鼠白血病细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞形态特性：上皮细胞样
细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度(最高不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
RIN Cl-5F细胞系相关产品：SNB19细胞、HCC9204细胞、GM15452细胞
EC-GI细胞系相关产品：MV-3细胞、PK13细胞、293-GP细胞
CEM C7细胞系相关产品：NPC-TW 039细胞、A2008细胞、BeWo细胞
NSC-34细胞系相关产品：CMK细胞、FRhK-4细胞、SKRC 39细胞
A498细胞系相关产品：H-196细胞、C2-C12细胞、OSC19细胞
NIH:OVCAR4细胞系相关产品：Ly8细胞、CHL-1细胞、DK-MG细胞
SK-N-SH细胞系相关产品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、DMS-79细胞、STC-1细胞
HIBEC细胞系相关产品：NCI-BL1339细胞、DOK细胞、NG-108-15细胞
F442A细胞系相关产品：TO 175.T细胞、H23细胞、SN12-PM6细胞
MC-CAR细胞系相关产品：NSH细胞、SKLU1细胞、BE2M17细胞
NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依赖性小鼠白血病细胞系
NCI-H2172细胞系相关产品：Pt K1细胞、NPC-TW 039细胞、Detroit 562细胞
HeLa S-3细胞系相关产品：HeLa 229细胞、RFL 6细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞
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MiaPaCa-2细胞系相关产品：TW-039细胞、FET细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞
CaES-17细胞系相关产品：MDA453细胞、MNNGHOS细胞、H211细胞
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EJ-1细胞系相关产品：Functional Liver Cell-7细胞、FHCRC subclone 11细胞、Cor L88细胞
Pt K1细胞系相关产品：Ly18细胞、PZ-HPV-7细胞、H2452细胞
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P30-OHKUBO细胞系相关产品：BALB/3T3 (clone A31)细胞、SW13细胞、Renal Carcinoma细胞
HT(H9)细胞系相关产品：Jurkat E6-1细胞、PLA-801C细胞、CG-4细胞
NCIH2126细胞系相关产品：GM05862细胞、H1954细胞、HS-766T细胞
H-522细胞系相关产品：HEK-293-F细胞、HTR8/SVneo细胞、H-1703细胞
GDM1细胞系相关产品：Jurkat-FHCRC细胞、WPMY-1细胞、MKN-1细胞
TO175T细胞系相关产品：CMT167细胞、U-343 MG细胞、LM TK negative细胞
A549/ATCC细胞系相关产品：DU-4475细胞、ReNcell CX细胞、CCD-841CoTr细胞
EFM-19细胞系相关产品：SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞
Swiss 3T6细胞系相关产品：GM02219D细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞、KM-12细胞
BetaTC6细胞系相关产品：NIH-OVCAR-3细胞、Hs895.T细胞、A-172细胞
PANC-10-05细胞系相关产品：SNU-878细胞、TGBC11TKB细胞、B16 BL6细胞
RPMI7951细胞系相关产品：SK-N-BE(2)-C细胞、HT144细胞、TGW-nu细胞
MAntle cell VERona-1细胞系相关产品：CORL88细胞、PASMCS细胞、Tu686细胞
Hs739T细胞系相关产品：OCI-Ly 7细胞、B-cell with DC Morphology细胞、H-2171细胞
SK-N-BE细胞系相关产品：ROS 17/2.8细胞、CCD841CoN细胞、KYSE-410细胞
Hs940-T细胞系相关产品：NCI-H2228细胞、SNU-886细胞、DMS 79细胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞系相关产品：GTL16细胞、T47-D细胞、MDA-468细胞
TE8细胞系相关产品：RASMC细胞、NKM-1细胞、PLA-801D细胞
NCI-H358细胞系相关产品：OCI Ly3细胞、3T3F442A细胞、WPMY1细胞
BeWo细胞系相关产品：SU-DHL-5细胞、TE-3A细胞、UM-UC-3细胞
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BE(2)-M17细胞系相关产品：H-774细胞、A2780细胞、beta-TC6细胞
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LTEP a2细胞系相关产品：P3X63 AG 8.653细胞、870细胞、Malme-3 M细胞
LNCaP细胞系相关产品：Y79细胞、CCK81细胞、PE/CA-PJ34细胞
COLO-741细胞系相关产品：HPAF2细胞、Swiss/3T3细胞、MDA-435细胞
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HDQ-P1细胞系相关产品：HCT.116细胞、A-673细胞、HIEC细胞
MDA-MB-468-RED细胞系相关产品：GM346细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞、Me Wo细胞
NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依赖性小鼠白血病细胞系
HEK 293 c18细胞系相关产品：HBEpiC细胞、OVCAR 420细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞
HS-294细胞系相关产品：KPL-4细胞、NCI-H2009细胞、Porcine Kidney-15细胞
BL1339细胞系相关产品：L363细胞、PATU-S细胞、UM-RC-2细胞
CEM C7细胞系相关产品：NPC-TW 039细胞、MDCKII-WT细胞、COLO-679细胞
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