"Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤细胞系
细胞背景资料:1967年,该细胞系KleinE和KleinG建系,源于一名16岁患有Burkitt's淋巴瘤的黑人男性,beta-2-微球蛋白阴性,表达EBNA,VCA,sIg。该细胞携带EB病毒,是一个典型的B淋巴母细胞系,可用于白血病发病机制的研究。
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
P3 (Jiyoye)细胞系相关产品:hMSC-BM细胞、CCD-1095Sk细胞、B-95-8细胞
HO1-N1细胞系相关产品:SU-DHL-8细胞、Dakiki细胞、YH-13细胞
NK92细胞系相关产品:HSC5细胞、PC-9/S1细胞、N1S1细胞
细胞生长:悬浮
Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞传代方法:1:2传代
H295R细胞系相关产品:Mia PACA 2细胞、MM134细胞、H660细胞
NMCG-1细胞系相关产品:GM00215细胞、TE-32细胞、CAL 62细胞
NALM-6-M1细胞系相关产品:HCC-15细胞、KRCY细胞、LAD 2细胞
SUP-B1细胞系相关产品:RPMI 7951细胞、Hep-G2细胞、SKLMS1细胞
CHP100细胞系相关产品:NIH:OVCAR-5细胞、NCI-1155细胞、PLB985细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤细胞系
细胞生长特性:悬浮生长
细胞形态特性:淋巴母细胞样
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
NG10815细胞系相关产品:P30-OHK细胞、B78细胞、IOSE-80细胞
BNL-CL.2细胞系相关产品:NW-MEL-38细胞、HSF细胞、P31-FUJ细胞
DH-82细胞系相关产品:PANC-03-27细胞、CMT167细胞、BC-009细胞
TOV112D细胞系相关产品:MKN7细胞、EB1细胞、HIC细胞
HRGEC细胞系相关产品:OCI-LY-18细胞、HTR8svn细胞、RERF-LCMS细胞
293 HEK细胞系相关产品:FAO-1细胞、Huh 7.5细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞
C57 Mouse Tumor 64细胞系相关产品:BALB/3T3细胞、MDAPCa2b细胞、RT-4细胞
RKOE6细胞系相关产品:SUM 190PT细胞、BCECs细胞、BC-3-H-I细胞
Hep-3B细胞系相关产品:Hs445细胞、T24细胞、HOS/MNNG细胞
Hs940.T细胞系相关产品:293 HEK细胞、UMNSAH-DF 1细胞、IGROV细胞
Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤细胞系
CAL 148细胞系相关产品:TPC-1细胞、SNK-1细胞、HRA-19细胞
MCA-205细胞系相关产品:HEK-293 c18细胞、NCI-SNU-1040细胞、Nb2a细胞
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MCF 10A细胞系相关产品:OCI-Ly01细胞、HBdSMC细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞
CCD-841-CoN细胞系相关产品:DOK细胞、SK MEL 28细胞、LK 2细胞
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KCL22S细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞
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Swiss/3T3细胞系相关产品:Human Fetal Thymocyte-8810细胞、LL/2 (LLC1)细胞、NCI-H2085细胞
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NCI-H1648细胞系相关产品:CT26-clone 25细胞、UPCI:SCC154细胞、MSTO-211H细胞
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MDAMB330细胞系相关产品:Sarcoma OSteogenic-2细胞、OsA-CL细胞、MADISON LUNG TA-109细胞
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Daudi Lymphoblastoid cells人Burkkit淋巴瘤细胞系
293AD细胞系相关产品:AHH-1细胞、GC-1spg细胞、UCLA-SO-14细胞
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DH-82细胞系相关产品:PANC-03-27细胞、WSU-DLCL-2细胞、WEHI 164细胞
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