"HL-60 Lymphoblastoid cells人原髓细胞白血病细胞系
细胞背景资料:该细胞由CollinsSJ从一位患有急性早幼粒细胞性白血病的36岁白人女性的外周血中分离建立;可自发分化,或在盐、次黄嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1%to1.5%)、D和视黄酸的刺激下发生分化;PMA刺激后可分泌TNF-α。该细胞具有吞噬活性和趋化反应,癌基因myc阳性,表达补体受体和FcR。
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
T-24细胞系相关产品:SK-ML2细胞、Walker 256细胞、BL-6细胞
WILL-2细胞系相关产品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、BMF细胞、NCIH2172细胞
H1048细胞系相关产品:IGROV1细胞、HT55细胞、NL20细胞
细胞生长:悬浮
HL-60 Lymphoblastoid cells人原髓细胞白血病细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:维持细胞浓度在1×105-1×106/ml,每2-3天换液1次。
Clone 929细胞系相关产品:Mv1Lu细胞、HET1A细胞、N1E-115细胞
Jurkat E6-1细胞系相关产品:CLL-CII细胞、Colon-26细胞、HB 611细胞
TR-146细胞系相关产品:MDA-231细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、CHO细胞
JAR细胞系相关产品:SkChA-1细胞、BL1339细胞、HEL-92.1.7细胞
HS578细胞系相关产品:CAMA-1细胞、SCCVII/St细胞、MT-3 [Human leukocytes]细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HL-60 Lymphoblastoid cells人原髓细胞白血病细胞系
细胞生长特性:悬浮生长
细胞形态特性:髓母细胞样
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
NB-4细胞系相关产品:NCI-HUT-125细胞、HCC-1438细胞、HT clone H9细胞
DoTc2 4510细胞系相关产品:COLO201细胞、SACC-83细胞、T-47-D细胞
UM-UC-14细胞系相关产品:CF-1 MEF细胞、GL261细胞、ZYM-DIEC02细胞
Murine Lung Epithelial-12细胞系相关产品:OCI-LY-10细胞、JEG3细胞、HBVP细胞
ESC-410细胞系相关产品:HOS-143B细胞、FOXNY细胞、HANK-1细胞
MES-13细胞系相关产品:OSK-1细胞、CTLL(2)细胞、Calu3细胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞系相关产品:THP 1细胞、IGR-OV1细胞、BHK-21细胞
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3T3-Swiss细胞系相关产品:SK Mel 24细胞、LIPF155C细胞、DMS-79细胞
HEK-293-FT细胞系相关产品:NP-69细胞、32D:cl3细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞
HL-60 Lymphoblastoid cells人原髓细胞白血病细胞系
PaTu 8988 S细胞系相关产品:Panc 02细胞、PLC细胞、NCTC clone 929细胞
SN12C-PM6细胞系相关产品:NBL-5细胞、SK-N-FI细胞、Strain KB细胞
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HcaF细胞系相关产品:H8细胞、YD-15细胞、RT-112细胞
ML2细胞系相关产品:HARA-B细胞、H-526细胞、SGC996细胞
ML2细胞系相关产品:HARA-B细胞、H-526细胞、SGC996细胞
P116细胞系相关产品:MH-22a细胞、DMS 114细胞、CHP 126细胞
Cor L88细胞系相关产品:NCI-H1573细胞、SW-900细胞、CV1细胞
C518细胞系相关产品:MES-SA/Dx-5细胞、SV40 MES 13细胞、HLE-SRA-01/04细胞
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Walker-Ca.256细胞系相关产品:Tu 177细胞、WSU-DLCL(2)细胞、KNS42细胞
C-Lu-65细胞系相关产品:CMT-167细胞、AU565细胞、RH7777细胞
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OCM1A细胞系相关产品:686LN-M4e细胞、C-Lu-65细胞、HUT 226细胞
PANC 1005细胞系相关产品:BEP2D细胞、Psi-2-DAP细胞、JVM-3细胞
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U251-MG细胞系相关产品:Leukemia L1210细胞、DMS-153细胞、CCD33Co细胞
MCF-7细胞系相关产品:MONO-MAC 6细胞、NCIH1436细胞、LS 513细胞
Pt K1 (NBL-3)细胞系相关产品:Jurkat 77细胞、Hs-281-T细胞、Huh-7.5.1细胞
MCA38细胞系相关产品:U-hth74细胞、DMS 273细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞
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T24细胞系相关产品:KCL22S细胞、GA-10细胞、UCLA-RO 81细胞
H1819细胞系相关产品:HEL细胞、NCI-H446细胞、NCI-H1395细胞
HCC-2935细胞系相关产品:746T细胞、MOLT4细胞、253JBV细胞
MES-SA细胞系相关产品:MCF-12A细胞、SUNE 1细胞、6-10B细胞
Co320细胞系相关产品:HOMEC细胞、H-508细胞、SU-DHL1细胞
3T3 Swiss Albino细胞系相关产品:OVTOKO细胞、BNL CL2细胞、CCK81细胞
GM05372细胞系相关产品:J 774A.1细胞、HF-91细胞、FaDu细胞
NCIH2227细胞系相关产品:OK细胞、RCC-JF细胞、HMrSV5细胞
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LN 229细胞系相关产品:RBMVEC细胞、SUM 52PE细胞、COLO-679细胞
NCIH1417细胞系相关产品:SUP-T1细胞、E.L.4细胞、Panc 2.03细胞
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H341细胞系相关产品:MTEC1细胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞、MDAMB435细胞
Gejiu Lung Carcinoma-82细胞系相关产品:NCI-H1395细胞、87 MG细胞、OCILY-3细胞
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Gejiu Lung Carcinoma-82细胞系相关产品:NCI-H1395细胞、87 MG细胞、OCILY-3细胞
TE-85细胞系相关产品:Calf Pulmonary Artery 47细胞、MDCK Type II细胞、COLO-320细胞
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HL-60 Lymphoblastoid cells人原髓细胞白血病细胞系
TGW细胞系相关产品:Clone Y-1细胞、ARO细胞、RCC-JF细胞
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