"CCD-33Co fibroblast cells人结肠成纤维细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:成纤维细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
MuM-2C细胞系相关产品:Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞
3 LL细胞系相关产品:UM-UC14细胞、NCI-H1954细胞、GM03671细胞
BI-Mel细胞系相关产品:KHYG-1细胞、SkChA1细胞、SW.620细胞
细胞生长:贴壁
CCD-33Co fibroblast cells人结肠成纤维细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
P-2003细胞系相关产品:SCC 15细胞、TYK-nu细胞、HSAS4细胞
HDF-a细胞系相关产品:MDA-330细胞、HCC-38细胞、MILE SVEN 1细胞
159 PT细胞系相关产品:T2细胞、H526细胞、HCC1937细胞
SK-MEL3细胞系相关产品:D283MED细胞、MDA-MB231细胞、PaTu 8988s细胞
H1755细胞系相关产品:Panc_04_03细胞、ME180细胞、MDAPCa-2b细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CCD-33Co fibroblast cells人结肠成纤维细胞系
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
NCIH2023细胞系相关产品:CHP 100细胞、COLO 206细胞、Glioma-261细胞
B16-F10-BL6细胞系相关产品:OVCAR.4细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NP69细胞
HUTU80细胞系相关产品:SK-LMS-1细胞、IPECJ2细胞、PCI-SG231细胞
SUM 190细胞系相关产品:SV-HUC-1细胞、SH-SY5Y Parental细胞、HPAF-II/CD18细胞
Human Corneal Endothelial Cells-12细胞系相关产品:SGC-7901/DDP细胞、BAEC细胞、UPCI-SCC-154细胞
Mouse Forestomach Carcinoma细胞系相关产品:MCA 205细胞、GM00346B细胞、Capan-1细胞
OCI-Ly19细胞系相关产品:T84细胞、K-1735细胞、TNC-1B12B4细胞
LUDLU 1细胞系相关产品:HCC9204细胞、CCD841CoTr细胞、NPC-TW-039细胞
CCRF细胞系相关产品:EC9706细胞、SP2/0 Ag-14细胞、EA hy 926细胞
HLF细胞系相关产品:HSC-T6细胞、NCI-H774细胞、SW-1222细胞
CCD-33Co fibroblast cells人结肠成纤维细胞系
WPMY-1细胞系相关产品:8226细胞、K7M2-WT细胞、VM Cub 1细胞
G 292 Clone A 141B1细胞系相关产品:T-HEECs细胞、COV504细胞、X63-AG 8.653细胞
NCI-SNU-C2B细胞系相关产品:X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞
MPC 11细胞系相关产品:KLE细胞、H1105细胞、SEG-1细胞
Human Epithelioma-2细胞系相关产品:HCC-1171细胞、SNK6细胞、TEV-1细胞
Saos2细胞系相关产品:BHK21细胞、CL MC/9细胞、RH-30细胞
Saos2细胞系相关产品:BHK21细胞、CL MC/9细胞、RH-30细胞
SF 539细胞系相关产品:SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞
HCT_116细胞系相关产品:RT4-D6P2T细胞、Hs-675-T细胞、WB F344细胞
SK-GT-2细胞系相关产品:D-407细胞、KP-N-RT-BM-1细胞、H-774细胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品:H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞
KYSE 30细胞系相关产品:P3HR1细胞、EA.Hy926细胞、PCI-04B细胞
COLO-320-DM细胞系相关产品:GEO细胞、KYSE-520细胞、SW1353细胞
RLE-6TN细胞系相关产品:C3H10T1/2CL8细胞、U-251MG细胞、RWPE-1细胞
SMC-1细胞系相关产品:GM07404A细胞、FRTL5细胞、Caki-2细胞
EJ 138细胞系相关产品:IEC18细胞、MV(4;11)细胞、MSCs(mUCMSCs)细胞
HNE-1细胞系相关产品:SP-2细胞、DMS 79细胞、NCI-SNU-119细胞
FHs74Int细胞系相关产品:D341细胞、KP-N-RT-BM细胞、CAL85-1细胞
HRIF细胞系相关产品:CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
P-388D1细胞系相关产品:OV1063细胞、L-Wnt3A细胞、Neuro 2a细胞
SK-RC-39细胞系相关产品:PE/CA-PJ34细胞、BT.549细胞、COR-L51细胞
KYSE 140细胞系相关产品:KU19-19细胞、SG231细胞、LC1/Sq细胞
HCC-1588细胞系相关产品:H-2087细胞、ARH77细胞、KU 19-19细胞
Kit225 K6细胞系相关产品:2780细胞、PA12细胞、NCI-H508细胞
BNL CL2细胞系相关产品:BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞
SKMEL-1细胞系相关产品:Walker256细胞、ST 486细胞、MC3T3-E1细胞
P30 OHK细胞系相关产品:Ly1细胞、M-1细胞、SK-MEL-31细胞
Hs 706.T细胞系相关产品:NUGC4细胞、HCC1438细胞、HCC-1599细胞
Anip-973细胞系相关产品:D 407细胞、HR-8348细胞、RKOE6细胞
CAL 12T细胞系相关产品:HOS-TE85细胞、SW-1990细胞、MES-SA/Dx-5细胞
HEK-293-EBNA细胞系相关产品:32Dcl3细胞、Bac 1.2F5细胞、BALB/3T3 clone A31细胞
C17细胞系相关产品:MDA-453细胞、SK-MEL-31细胞、Tn5B1-4细胞
HOS/MNNG细胞系相关产品:H-2347细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞、JROECL19细胞
COLO 741细胞系相关产品:NCI-H820细胞、hs 68细胞、LA-795细胞
HPAF-II/CD18细胞系相关产品:MSC细胞、GM-346细胞、SUP-B15细胞
HONE-1细胞系相关产品:PG-4 S+L-细胞、GM05372E细胞、H1522细胞
Hep G2-Luc细胞系相关产品:SUDHL-5细胞、A673细胞、Ls-174-T细胞
NCIH1623细胞系相关产品:MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞
NPC-TW 039细胞系相关产品:Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、LLC PK1细胞、CAL51细胞
U-373-MG细胞系相关产品:MC 3T3-E1细胞、WSU-DLCL-2细胞、PANC0327细胞
MPASMC细胞系相关产品:Panc_03_27细胞、H-1672细胞、T-HSC细胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞系相关产品:Capan-1细胞、HIT.T15细胞、MB 157细胞
OCI Ly3细胞系相关产品:Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDAMB436细胞、CESS细胞
HCC366细胞系相关产品:L-363细胞、KYSE70细胞、GM00637H细胞
NCI-H1522细胞系相关产品:H441细胞、GM03671细胞、SK-HEP-1细胞
RGB细胞系相关产品:RL细胞、LTEP a2细胞、SK-MES细胞
HT-29细胞系相关产品:HS578细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、HcerEpic细胞
HECV细胞系相关产品:CCD 19Lu细胞、NCTC 3960细胞、PANC-28细胞
SKCO-1细胞系相关产品:FAT细胞、EU-3细胞、293GP细胞
HCC4006细胞系相关产品:KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
NKL细胞系相关产品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞、C4-2 B细胞、SW 1222细胞
CCD-33Co fibroblast cells人结肠成纤维细胞系
NCIH128细胞系相关产品:MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、EBTr (NBL-4)细胞、G361mel细胞
HPAF-I细胞系相关产品:KM.12细胞、SNB19细胞、Capan-2细胞
RCC4细胞系相关产品:KM933细胞、HOP 92细胞、Hs 578.T细胞
HuTu-80细胞系相关产品:Alpha Mouse Liver 12细胞、NCI-H87细胞、Panc-05.04细胞
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