"HPAF fibroblast cells人肺动脉成纤维细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：成纤维细胞样
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
COLO-394细胞系相关产品：H810细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞、NBL-12细胞
C28/I2细胞系相关产品：CHO/dhFr-细胞、Hos TE-85细胞、526 mel细胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞系相关产品：SW-1088细胞、NK92-MI细胞、HAEC细胞
细胞生长：贴壁
HPAF fibroblast cells人肺动脉成纤维细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HPAF/CD18细胞系相关产品：MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞
MKN-74细胞系相关产品：RMS 1598细胞、IHHA-1细胞、alpha-TC1-6细胞
NCI-522细胞系相关产品：SR细胞、He La细胞、TE14细胞
PFSK细胞系相关产品：NCI H548细胞、RAW264细胞、SUSM-1细胞
D-283MED细胞系相关产品：293 Ad5细胞、KMS-18细胞、P3-NS1/1-Ag4-1细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HPAF fibroblast cells人肺动脉成纤维细胞系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞形态特性：详见细胞说明书
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
NCIH1395细胞系相关产品：C2-C12细胞、MH-S细胞、BJAB-1细胞
ECV细胞系相关产品：S91细胞、NCIH522细胞、H1954细胞
Hs-578T细胞系相关产品：MV411细胞、SGC-996细胞、H-2126细胞
HEK-293-F细胞系相关产品：201T细胞、NCI-H1048细胞、STO细胞
ATN1细胞系相关产品：NOR 10细胞、GM-215细胞、H-727细胞
SK-CO-1细胞系相关产品：H-1734细胞、NCI-H1437细胞、CV 1细胞
D-324MED细胞系相关产品：SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞
OCI/AML-5细胞系相关产品：EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞
RA.1细胞系相关产品：TT细胞、H-1092细胞、COLO 680N细胞
GL-261细胞系相关产品：Hs-746T细胞、NCI-H1623细胞、CCLP-1细胞
HPAF fibroblast cells人肺动脉成纤维细胞系
GM05887A细胞系相关产品：MDCK Type II细胞、H2196细胞、CORL51细胞
GLRK 13细胞系相关产品：IB-RS-2细胞、RCC_7860细胞、67NR细胞
SN12CPM6细胞系相关产品：SV40-HCEC细胞、COLO 320HSR细胞、Hs-274-T细胞
SKRC20细胞系相关产品：C32 mel细胞、SV40-HCEC细胞、CCD-112CoN细胞
GC-1spg细胞系相关产品：SK.MEL.2细胞、NCI-H1299细胞、YES 2细胞
RL-952细胞系相关产品：B16细胞、BEND细胞、TE3A细胞
RL-952细胞系相关产品：B16细胞、BEND细胞、TE3A细胞
HANK1细胞系相关产品：MCA-38细胞、H-1781细胞、NCI-H322细胞
NOR10细胞系相关产品：NCI-SNU-387细胞、SL-29细胞、UM-UC14细胞
NCI-H1299细胞系相关产品：COR-L23细胞、Madison 109细胞、C643细胞
Epstein-Barr-3细胞系相关产品：SHG44细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、NEC-8细胞
NCI-H2029细胞系相关产品：Ku812细胞、P30 OHK细胞、SK-NEP-1细胞
HCEpiC细胞系相关产品：C2BBe1细胞、Meat Animal Research Center-145细胞、RFL-6细胞
NALM-6-M1细胞系相关产品：HCC-15细胞、KRCY细胞、LAD 2细胞
SW579细胞系相关产品：Human ErythroLeukemia细胞、HS766T细胞、Ej138细胞
HUT 28细胞系相关产品：NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞
H-716细胞系相关产品：CHL-IU细胞、KYSE140细胞、MGH-U3细胞
T241细胞系相关产品：JeKo 1细胞、VMCUB1细胞、MRC5细胞
VB细胞系相关产品：NCI-H526细胞、H-2452细胞、CCC-HEH-2细胞
TE5细胞系相关产品：MN-9D细胞、NCI-H2066细胞、TE-5细胞
NCIH1838细胞系相关产品：High Five细胞、A-20细胞、RMS 1598细胞
HepG2/C3A细胞系相关产品：SUM-102PT细胞、HUCCT1细胞、LS411细胞
H2.35细胞系相关产品：LNT-229细胞、CCD1112Sk细胞、Karpas 299细胞
LTEPa2细胞系相关产品：SNU-484细胞、PTK-1细胞、MADB106细胞
U-87 MG细胞系相关产品：LAC细胞、L-6TG细胞、ST 486细胞
NCIH2405细胞系相关产品：H-865细胞、SHG 44细胞、143TK-细胞
HCO细胞系相关产品：SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞
BL6细胞系相关产品：UO-31细胞、MC-38细胞、NIH:OVCAR-8细胞
293EBNA细胞系相关产品：GM-3573细胞、A375-MEL细胞、Hs-281-T细胞
KU.812细胞系相关产品：J-774A.1细胞、Hi-five细胞、HEK-293-H细胞
HCEpiC细胞系相关产品：C2BBe1细胞、Meat Animal Research Center-145细胞、RFL-6细胞
P3.times.63 Ag8.653细胞系相关产品：KYSE-520细胞、NCI.H460细胞、MM1-S细胞
BTI-Tn-5B1-4细胞系相关产品：RMC细胞、H1581细胞、OKT 3细胞
293FT细胞系相关产品：Panc327细胞、BC3 H1细胞、C4-2 B细胞
Los Angeles Prostate Cancer-4细胞系相关产品：SF295细胞、HKBML细胞、HRVEC细胞
H9细胞系相关产品：8402细胞、TE-10细胞、HEK 293细胞
HS-294T细胞系相关产品：HF-91细胞、Hep 2细胞、LIXC002细胞
NCI-H1876细胞系相关产品：H-647细胞、RBL细胞、RKO细胞
NCI-H1876细胞系相关产品：H-647细胞、RBL细胞、RKO细胞
Lewis lung carcinoma line 1细胞系相关产品：MDA157细胞、IPEC-1细胞、SNU119细胞
Ketr-3细胞系相关产品：C42细胞、CCD 966SK细胞、MES-SA/Dx5细胞
NCI-SNU-16细胞系相关产品：IHH细胞、NTERA-2细胞、T98细胞
SPC-A-1细胞系相关产品：CEM.C1细胞、BC-024细胞、751细胞
Centre Antoine Lacassagne-51细胞系相关产品：LWnt-3A细胞、HT 1197.T细胞、SRA01/04细胞
MC9细胞系相关产品：CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞
H146细胞系相关产品：NCTC 3960细胞、CWR22-Rv1细胞、HFLS-OA细胞
MHCC 97细胞系相关产品：LL2细胞、EL-4细胞、MDA-kb2细胞
NP69SV40T细胞系相关产品：MC3T3E1细胞、HOEC细胞、MGHU1细胞
PL-45细胞系相关产品：KPNRTBM1细胞、SAOS 2细胞、DHL-4细胞
H-1437细胞系相关产品：H-64细胞、L02细胞、PA-TU S细胞
RCC_7860细胞系相关产品：U-2 OS细胞、IOSE80UBC细胞、OLN93细胞
HPAF fibroblast cells人肺动脉成纤维细胞系
KYSE510细胞系相关产品：Eph4 1424细胞、AE1201细胞、Ramos 2G6.4C10细胞
HT29细胞系相关产品：SW 962细胞、SW962细胞、AX-Mel细胞
MN 60细胞系相关产品：NCI-H719细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、MDCK Type II细胞
HS578T细胞系相关产品：MDA-468细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞、JF305细胞
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