"SL-29 fibroblast cells鸡胚成纤维细胞系
细胞背景资料:胚成纤维细胞; White Leghorn SPAFAS
细胞形态:成纤维细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
MCF.10A细胞系相关产品:HEP-3B2细胞、P1-Raji细胞、F442A细胞
H2291细胞系相关产品:RGC-6细胞、H841细胞、HCV-29细胞
OCI-Ly 19细胞系相关产品:SK-HEP-1细胞、UCLA RO-81-A-1细胞、J 82细胞
细胞生长:贴壁
SL-29 fibroblast cells鸡胚成纤维细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
UM-UC-1细胞系相关产品:FM88细胞、YT细胞、C3H/10T1/2细胞
GM02219D细胞系相关产品:RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞
WB F344细胞系相关产品:T-HSC细胞、LS-174T细胞、RPMI8226/S细胞
PAa细胞系相关产品:ML2细胞、HCC2218细胞、C-8161细胞
P3/NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品:EU-3细胞、GM 2132细胞、SHP-77细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SL-29 fibroblast cells鸡胚成纤维细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞系相关产品:293GP细胞、KY70细胞、CHO-ori细胞
HuT78细胞系相关产品:P3J HR1-K细胞、MHCC 97细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞
GM04679细胞系相关产品:HEK-2细胞、CO115细胞、SK-RC-42细胞
DC2.4细胞系相关产品:Psi-2-DAP细胞、PK136细胞、HNSC细胞
Nb2a细胞系相关产品:CEM clone 7细胞、PIGI细胞、Kato-III细胞
HCC0038细胞系相关产品:U-373MG细胞、Hs688(A)T细胞、J-774细胞
HCPEpiC细胞系相关产品:PT-67细胞、NCIH2172细胞、C2-C12细胞
HOS细胞系相关产品:S16细胞、COLO680N细胞、MIA-PaCa-2细胞
C 643细胞系相关产品:NPC-TW 01细胞、HTh74细胞、MDA-453细胞
SU-DHL-4细胞系相关产品:NCI-522细胞、SW 579细胞、NIHOVCAR3细胞
SL-29 fibroblast cells鸡胚成纤维细胞系
Institute for Medical Research-90细胞系相关产品:CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
AZ 521细胞系相关产品:A72细胞、H1651细胞、U-343-MG细胞
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KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞系相关产品:NCIH1299细胞、SUP-B15细胞、C6细胞
FRH-0201细胞系相关产品:LNCaP-Clone-FGC细胞、H-125细胞、SCLC-21H细胞
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MOLT 4细胞系相关产品:NCI-H676B细胞、NBLAN5T细胞、TMK-1细胞
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Hs-611-T细胞系相关产品:HCC-202细胞、H-1618细胞、Sol8细胞
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NCI-SNU-C2B细胞系相关产品:X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞
CAL-78细胞系相关产品:NCI-H1435细胞、COLO 680N细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞
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SKRC20细胞系相关产品:C32 mel细胞、SV40-HCEC细胞、CCD-112CoN细胞
Madison细胞系相关产品:RF/6A细胞、SF 126细胞、CBRH7919细胞
KATOIII细胞系相关产品:NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞
DMS273细胞系相关产品:CF PAC-1细胞、CC-LP-I细胞、P-815细胞
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Strain KB细胞系相关产品:6-T CEM细胞、RPMI 8226细胞、H-1792细胞
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CEM C7细胞系相关产品:NPC-TW 039细胞、A2008细胞、BeWo细胞
HEK293A细胞系相关产品:NK62a细胞、Panc 4.03细胞、L-540细胞
VeroE6细胞系相关产品:HANK细胞、SF 767细胞、A-20细胞
WBF344细胞系相关产品:HCC1428细胞、TF-1细胞、WRL 68细胞
PC-10细胞系相关产品:NCI-HUT-69细胞、NCIH2591细胞、P3X63NS1细胞
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PANC 813细胞系相关产品:HCT GEO细胞、MESSADX5细胞、PM6细胞
SL-29 fibroblast cells鸡胚成纤维细胞系
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NCI-H1650细胞系相关产品:P30/0HK细胞、L5178YR细胞、Hepa-RG细胞
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GM04678细胞系相关产品:P388细胞、HEC1-B细胞、KLE细胞
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