"HES [Human embryonic skin fibroblast] fibroblast cells人皮肤成纤维细胞系
细胞背景资料:皮肤;成纤维细胞
细胞形态:成纤维细胞样
细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻,细胞内外的水分会很快形成冰晶,从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高,pH值改变,部分蛋白质由于上述原因而变性,引起细胞内部空间结构紊乱,溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶,使细胞内结构成分造成破坏,线粒体肿胀,功能丢失,并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变,使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多,随冷冻温度的降低,冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤,而致细胞死亡。因此,细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分,减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质分子量小,溶解度大,易穿透细胞,可以使冰点下降,提高细胞膜对水的通透性,且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外,减少胞内形成冰结晶的机会,从而减少冰晶对细胞的损伤。
COLO 320F细胞系相关产品:G-402细胞、IAR-20细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞
RPMI8402细胞系相关产品:C-33 A细胞、MDCC MSB1细胞、Rat 1细胞
NHLF细胞系相关产品:149PT细胞、A-1847细胞、Anglne细胞
细胞生长:贴壁
HES [Human embryonic skin fibroblast] fibroblast cells人皮肤成纤维细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Porcine Kidney-15细胞系相关产品:PLA801C细胞、LS-1034细胞、8305C_1细胞
HeLa细胞系相关产品:Panc2_03细胞、SK-N-SH细胞、PC-9S1细胞
UMNSAH/DF#1细胞系相关产品:SUM 149细胞、HELF细胞、IEC-18细胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞系相关产品:Mono Mac 6细胞、HOS-MNNG细胞、LN-229细胞
KG1A细胞系相关产品:Colon-26细胞、UWB1.289+BRCA1细胞、Anip973细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HES [Human embryonic skin fibroblast] fibroblast cells人皮肤成纤维细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因比较复杂,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浑细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟,转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离;rpm为离心机每分钟的转数;RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
P560细胞系相关产品:HuT-78细胞、H889细胞、OVCAR-10细胞
EOC 20细胞系相关产品:SK-N-BE(1)n细胞、HRMC细胞、CORL23细胞
HCC0015细胞系相关产品:COV434细胞、IBMF-7细胞、IMCD-3细胞
MADISON LUNG TA-109细胞系相关产品:PK136细胞、MIA PaCa-2细胞、C666-1细胞
RASMC细胞系相关产品:OCI-Ly8细胞、TPC-1细胞、WSU-DLCL-2细胞
RPMI 7951细胞系相关产品:X63.Ag8.653细胞、BEAS 2B细胞、SU-DHL-4细胞
Hs 343.T细胞系相关产品:TN5B14细胞、HKC细胞、V79-1细胞
CTSC-3细胞系相关产品:HFF细胞、Nb2-11细胞、SU-DHL-5细胞
CAL 39细胞系相关产品:MM1S细胞、NCI-H1522细胞、MMAc.SF细胞
MDA-330细胞系相关产品:SPC-A-1细胞、H87细胞、10RGB细胞
HES [Human embryonic skin fibroblast] fibroblast cells人皮肤成纤维细胞系
CTLL-2细胞系相关产品:M14细胞、CemT4细胞、KLM-1细胞
MARC 145细胞系相关产品:CoCL2细胞、CP70细胞、T-T细胞
KP-N-NS细胞系相关产品:CV 1细胞、NTERA-2cl.D1细胞、OVCAR420细胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞系相关产品:CHP-212细胞、Caco2BBe细胞、MDA330细胞
RS1细胞系相关产品:HT 144细胞、MSTO-211细胞、Namalwa细胞
Y3-Ag1.2.3细胞系相关产品:HuH1细胞、NBL-1细胞、ETCC007细胞
Y3-Ag1.2.3细胞系相关产品:HuH1细胞、NBL-1细胞、ETCC007细胞
Human Liver-7702细胞系相关产品:JiyoyeP-2003细胞、ATDC5细胞、LICR-HN-6细胞
CEM clone 7细胞系相关产品:NKM-1细胞、BTI-TN5B1-4细胞、SW-620细胞
NIH/3T3细胞系相关产品:MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞
MDA453细胞系相关产品:EMT-6细胞、CEM clone 7细胞、P3/X63-Ag8细胞
CHP-212细胞系相关产品:RGM-1细胞、NCl-H157细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞
HT 1197.T细胞系相关产品:RBSMC细胞、RMS 13细胞、KNS-42细胞
NCIH2452细胞系相关产品:B-3细胞、NMCG1细胞、HPMEC细胞
M-14细胞系相关产品:SW626细胞、NIH 3T6细胞、BNL-CL.2细胞
WB F344细胞系相关产品:T-HSC细胞、LS-174T细胞、RPMI8226/S细胞
PK-15细胞系相关产品:PIGI细胞、SK Mel28细胞、GB1细胞
MiaPaca.2细胞系相关产品:MGHU1细胞、L-428细胞、MDA-MB-330细胞
NCI-H2444细胞系相关产品:MPC-5细胞、NCI-H2009细胞、KPL4细胞
Psi-2-DAP细胞系相关产品:EAC-E2G8细胞、IEC-6细胞、OKa-C-1细胞
H283细胞系相关产品:U266 Bl细胞、beta TC6细胞、Gerner 7666细胞
SW-1417细胞系相关产品:Jurkat FHCRC细胞、NCI-H889细胞、JURKAT E-6.1细胞
HSC4细胞系相关产品:H1105细胞、mIMCD-3细胞、NSH细胞
PL45细胞系相关产品:4T1细胞、NHDF细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞
OC-3-VGH细胞系相关产品:SUDHL-6细胞、PJ34细胞、SUD-4细胞
J45.01细胞系相关产品:H-87细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、KYSE0030细胞
VERO C 1008细胞系相关产品:IMCD3细胞、FDCP-1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞
NCIH209细胞系相关产品:LA-N-5细胞、Capan 1细胞、VE细胞
BMSCs(mBMSCs)细胞系相关产品:U-2OS细胞、Cloudman S91 melanoma细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞
NCI-SNU-475细胞系相关产品:PANC-02-03细胞、Madison细胞、BHP-10细胞
T98G细胞系相关产品:RS4:11细胞、130T细胞、NSI/1-Ag4-1细胞
YD38细胞系相关产品:AG06814-J细胞、OVCAR-8/ADR细胞、143B细胞
Calu 3细胞系相关产品:MV-1-Lu细胞、SW780细胞、RT4-D6-P2T细胞
LIXC-002细胞系相关产品:B4G12细胞、MRC9细胞、M059J细胞
MDA134细胞系相关产品:RBL 1细胞、H-1993细胞、MDCK细胞
GM03320细胞系相关产品:SK.OV.3细胞、675T细胞、L-02细胞
P3 88 D1细胞系相关产品:UM-UC-14细胞、SF-539 BT细胞、MES13细胞
Mel526细胞系相关产品:LC-MS细胞、KCL-22细胞、KRC/Y细胞
P3X63 Ag8.653细胞系相关产品:Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、HHL-5细胞、MDA231-LM2-4175细胞
C518细胞系相关产品:MES-SA/Dx-5细胞、SV40 MES 13细胞、HLE-SRA-01/04细胞
MM6细胞系相关产品:Kit225细胞、Rabbit Kidney 13细胞、C3A细胞
Hs 746.T细胞系相关产品:SK_N_BE2C细胞、U87 MG细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞
MDA-MB-435细胞系相关产品:NCI-H28细胞、3T3 L1细胞、HEK 293FT细胞
HEP-3B2细胞系相关产品:CNE-2Z细胞、OCLY8细胞、KMM-1细胞
BEAS-2B细胞系相关产品:PA-1细胞、143TK-细胞、HCC0078细胞
SW1463细胞系相关产品:H69细胞、SF539细胞、TE1细胞
Panc 2.03细胞系相关产品:CC-LP-1细胞、SNU-368细胞、SKML-28细胞
SH-SY5Y细胞系相关产品:HMEC1细胞、COR L279细胞、ES-2细胞
Walker 256细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、GBC-SD细胞、BHP 10-3细胞
MDA-MB435细胞系相关产品:BHK-21细胞、Me-Wo细胞、NCI-H1238细胞
NS653细胞系相关产品:H1869细胞、LAPC-4细胞、PLA-802细胞
HES [Human embryonic skin fibroblast] fibroblast cells人皮肤成纤维细胞系
FM88细胞系相关产品:BaF3细胞、NCTC-1469细胞、SKO007细胞
MIA Paca2细胞系相关产品:HUT-28细胞、K-562细胞、BT.549细胞
RPMI 1788细胞系相关产品:Ca Ski细胞、OVCAR.8细胞、NKT细胞
HCC 94细胞系相关产品:624mel细胞、kms 11细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞
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