"Z310 epithelioid cells大鼠脉络从上皮细胞系
细胞背景资料:脉络从;上皮;SV40永生化;SD大鼠
细胞形态:上皮细胞样
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
DHL-8细胞系相关产品:NS-1细胞、CAL-51细胞、PTK 2细胞
Leukemic 1210细胞系相关产品:NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞
FDC-P1细胞系相关产品:CMT-93细胞、NCTC clone 929细胞、COLO 829细胞
细胞生长:贴壁
Z310 epithelioid cells大鼠脉络从上皮细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CCLP-1细胞系相关产品:NPC-TW-039细胞、CORL51细胞、A20细胞
H-748细胞系相关产品:Mel624细胞、MARC 145细胞、SK-RC 39细胞
Hs-274-T细胞系相关产品:GI-1细胞、HeLa S-3细胞、Pfeiffer细胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞系相关产品:QBC(939)细胞、JB 6细胞、HIT T15细胞
HCC70细胞系相关产品:NCIH1819细胞、KHYG-1细胞、MCF-10 Attached细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Z310 epithelioid cells大鼠脉络从上皮细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
TE7细胞系相关产品:NCI-H1417细胞、CPA 47细胞、UM-UC-14细胞
RL-65细胞系相关产品:U266S细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞、MDA468细胞
MRASMC细胞系相关产品:Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、EC9706细胞、CCD-18Co细胞
GOTO细胞系相关产品:MTC-TT细胞、OV 1063细胞、KRC-Y细胞
NCI-H676B细胞系相关产品:J82细胞、CPAE细胞、A-427细胞
NCI-H2195细胞系相关产品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、HEK 293 EBNA细胞、VMCUB1细胞
CAL78细胞系相关产品:MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞
MonoMac1细胞系相关产品:HSC-3细胞、95C细胞、C38细胞
Nittby-Salford 1细胞系相关产品:FAK+/+细胞、H-1522细胞、Dx5细胞
IPLB-Sf21细胞系相关产品:OV-2008细胞、HNTEC细胞、KYSE-510细胞
Z310 epithelioid cells大鼠脉络从上皮细胞系
MNNG-HOS (Cl#5)细胞系相关产品:P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞
SU-86-86细胞系相关产品:HCA 7细胞、NCIH820细胞、OVCA8细胞
NCI-H2108细胞系相关产品:COLO 684细胞、D6P2T细胞、University of Arizona Cell Culture-893细胞
CCD841CoTr细胞系相关产品:A-72细胞、MFM223细胞、U-343细胞
DH-82细胞系相关产品:PANC-03-27细胞、CMT167细胞、BC-009细胞
BHP-10细胞系相关产品:SK-Mel 2细胞、FCCH1018细胞、OE33细胞
BHP-10细胞系相关产品:SK-Mel 2细胞、FCCH1018细胞、OE33细胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞系相关产品:Hs822T细胞、SNU-449细胞、U266 B1细胞
HFT 8810细胞系相关产品:CAL-85-1细胞、MPC 11细胞、HEC-151细胞
CCRF/CEM/0细胞系相关产品:H9c2(2-1)细胞、HCC-1419细胞、H661细胞
TGBC-11-TKB细胞系相关产品:RPMI7951细胞、J82 COT细胞、LC-1 sq细胞
INS1-E细胞系相关产品:PLA801-95D细胞、WEHI 3B细胞、COLO 699细胞
OAW-42细胞系相关产品:SKNDZ细胞、Granta519细胞、NCIH2085细胞
Tb1Lu细胞系相关产品:J-774细胞、SUM-52细胞、BE(2)C细胞
MV-4:11细胞系相关产品:SUM-159-PT细胞、FHs74 Int细胞、H-1755细胞
ARH-77细胞系相关产品:RFL-6细胞、NCI-N87细胞、HEK/EBNA细胞
SNU-878细胞系相关产品:HR8348细胞、OCI-Ly 1细胞、NCI-SNU-878细胞
NCI-841细胞系相关产品:AML-2细胞、Rat1细胞、LS180细胞
P3HRI细胞系相关产品:SCL I细胞、CCF-STTG1细胞、MDST8细胞
NOZAWA细胞系相关产品:ME180细胞、NCI-SNU-878细胞、HepaRG细胞
CEF细胞系相关产品:Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、343 MG细胞、MALME 3M细胞
KS-SLK细胞系相关产品:SNU-668细胞、Mink Lung细胞、Nthy-ori 3-1细胞
BALB/3T3 clone A31细胞系相关产品:CHO-ori细胞、RC-2细胞、LS-174细胞
COR-L 105细胞系相关产品:CHP212细胞、MDCKII细胞、HCCLM3细胞
V79-1细胞系相关产品:MM96L细胞、Capan1细胞、HEY-A8细胞
HUC-1细胞系相关产品:NCI-H187细胞、Astrocyte type I clone细胞、TE-12细胞
MDA-MB 231细胞系相关产品:HCT 116细胞、UM-UC-1细胞、HCC1806细胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞系相关产品:SHSY5Y细胞、QBI-293A细胞、NCIH1623细胞
NCIH23细胞系相关产品:mIMCD-3细胞、SUPM2细胞、U-118-MG细胞
SUM159PT细胞系相关产品:DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞
BJA-B1细胞系相关产品:Me Wo细胞、Granta 519细胞、TR146细胞
AR-42J细胞系相关产品:SCC4细胞、RAEC细胞、RCC_7860细胞
FHs74Int细胞系相关产品:D341细胞、KP-N-RT-BM细胞、CAL85-1细胞
Med 341细胞系相关产品:373MG细胞、HG2855细胞、U-87 MG细胞
Capan-1细胞系相关产品:COLO-1细胞、SNU-520细胞、RPMI1846细胞
HO1N1细胞系相关产品:Case 3细胞、Clone M-3细胞、VMM5A细胞
293 H细胞系相关产品:RGC5细胞、NCI-H2291细胞、H-125细胞
HCC202细胞系相关产品:NKM1细胞、WEHI 164 TC细胞、SUDHL16细胞
HCC202细胞系相关产品:NKM1细胞、WEHI 164 TC细胞、SUDHL16细胞
Epstein-Barr-1细胞系相关产品:HIT T-15细胞、HCC1359细胞、MDCC-MSB-1细胞
HCS2/8细胞系相关产品:SUSM-1细胞、CHP126细胞、H-2227细胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞系相关产品:Okayama University Medical School-27细胞、H929细胞、SW480E细胞
COS-1细胞系相关产品:OACP4C细胞、H-2172细胞、CL-34细胞
HEK-293FT细胞系相关产品:B16F10细胞、Jiyoye(P-2003)细胞、High 5细胞
H2227细胞系相关产品:ARPE19细胞、TW01细胞、COLO 741细胞
EB2细胞系相关产品:CX1细胞、786O细胞、NCIH524细胞
SNU484细胞系相关产品:Hs819T细胞、NCIH64细胞、OV-2008细胞
SCC090细胞系相关产品:A673细胞、MOLM13细胞、Lewis Lung细胞
MDCK supertube细胞系相关产品:MF2059细胞、NCIH1693细胞、NBL-4细胞
H1522细胞系相关产品:Swiss 3T3细胞、AML193细胞、CTLA4Ig-24细胞
HuT 78细胞系相关产品:LS 174T细胞、SKMEL3细胞、ST细胞
Z310 epithelioid cells大鼠脉络从上皮细胞系
TMK-1细胞系相关产品:MGHU3细胞、SF 295细胞、BOWES细胞
BC3H-1细胞系相关产品:769P细胞、MES 13细胞、Calu3细胞
HEC251细胞系相关产品:CL1-0细胞、MUTZ-3细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞
MRASMC细胞系相关产品:Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、BOWES细胞、JEKO细胞
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