"RPTEC/TERT1 epithelioid cells人肾近端小管上皮细胞系
细胞背景资料:肾;近端小管上皮;HGNC-TERT转化;男性
细胞形态:上皮细胞样
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
IOSE29细胞系相关产品:C32r细胞、SCC7细胞、CORL26细胞
Hu-P-T4细胞系相关产品:COV362细胞、697细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞
NTera 2细胞系相关产品:N1E115细胞、NK62a细胞、NCI-H295细胞
细胞生长:贴壁
RPTEC/TERT1 epithelioid cells人肾近端小管上皮细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BIC-1细胞系相关产品:BALB/c 3T3 clone A31细胞、SW-756细胞、ONS76细胞
Leukemic 1210细胞系相关产品:NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞
RAEC细胞系相关产品:HCC2279细胞、NCIH2122细胞、HM06.A1细胞
3LL细胞系相关产品:HT-22细胞、PA-TU S细胞、SH-SY5Y Parental细胞
MHCC97细胞系相关产品:SK N SH细胞、BPH1细胞、LN299细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RPTEC/TERT1 epithelioid cells人肾近端小管上皮细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
RMS 13细胞系相关产品:NCI-H1793细胞、EBC1细胞、LC-1Sq细胞
Panc_04_03细胞系相关产品:YD38细胞、J 111细胞、SNU-739细胞
MHCC 97-L细胞系相关产品:CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞
FCCH1018细胞系相关产品:VP 229细胞、210RCY3-Ag1.2.3细胞、EFM-192C细胞
RT4-D6-P2T细胞系相关产品:CAKI.1细胞、H-2196细胞、AR-42J细胞
EHEB细胞系相关产品:KYSE-270细胞、SK-N-DZ细胞、Rh30细胞
BL-6细胞系相关产品:CAL62细胞、Hs729细胞、HemECs细胞
CORL105细胞系相关产品:HT-29细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞、MDA-MB 361细胞
MonoMac6细胞系相关产品:DMS53细胞、SUM190细胞、NCI-H810细胞
NCI-H28细胞系相关产品:Nittby-Salford 1细胞、L929(NCTC)细胞、H774细胞
RPTEC/TERT1 epithelioid cells人肾近端小管上皮细胞系
Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞系相关产品:NCIH1755细胞、NCI H69细胞、WEHI-3B细胞
SK-N-BE(1)细胞系相关产品:AZ-521细胞、NOR-10细胞、RAMOS2G64C10细胞
MDST8细胞系相关产品:NCIH2286细胞、A-704细胞、MBdSMC细胞
Alpha Mouse Liver 12细胞系相关产品:KTC-1细胞、COV-362细胞、EAhy 926细胞
PC10细胞系相关产品:MIMVEC细胞、BNCL2细胞、NCI-H2106细胞
LYR细胞系相关产品:SU-DHL6细胞、XuanWei Lung Cancer-05细胞、HSC6细胞
LYR细胞系相关产品:SU-DHL6细胞、XuanWei Lung Cancer-05细胞、HSC6细胞
JM-1细胞系相关产品:RPMI No. 1846细胞、Clone Y-1细胞、H7721细胞
NCI-H322T细胞系相关产品:Rh30细胞、H-660细胞、BC-PAP细胞
GM00346B细胞系相关产品:ReNcell CX细胞、RCC10 RGB细胞、TR-146细胞
32D.cl3细胞系相关产品:Mouse Podocyte Clone-5细胞、LS-411N细胞、QBC939细胞
NOMO-1细胞系相关产品:786-O细胞、CII细胞、HEK293T/17细胞
GP2-293细胞系相关产品:AM38细胞、COLO320-DM细胞、NCI-H1944细胞
HEK-293-H细胞系相关产品:LK-2细胞、Reh细胞、SHG 44细胞
MHCC 97-H细胞系相关产品:NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞
Tregs细胞系相关产品:Epstein-Barr-3细胞、SCC9细胞、SKNBE2细胞
Med 283细胞系相关产品:MeT5A细胞、CHO-Lec1细胞、MS751细胞
U-87MG细胞系相关产品:D341Med细胞、B16/BL6细胞、TT细胞
190PT细胞系相关产品:Hs 888.T细胞、OCM1A细胞、Calu 3细胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞系相关产品:GH3细胞、DrG细胞、Hs 819.T细胞
MHCCLM3细胞系相关产品:HCC0095细胞、H2110细胞、SNU-719细胞
FHs 74 Int细胞系相关产品:KPL1细胞、H-510细胞、HEC-251细胞
PLC细胞系相关产品:Hs739T细胞、RPMI-1788细胞、OVCA-432细胞
D341Med细胞系相关产品:NCI-H2405细胞、U20S细胞、MDA-MB-157细胞
JF305细胞系相关产品:HT115细胞、HT22细胞、HTh74细胞
CHO Lec1细胞系相关产品:Caco-2/BBe细胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、A375S2细胞
NCIH1755细胞系相关产品:FET细胞、RGM-1细胞、MILE SVEN1细胞
no.11细胞系相关产品:HCE-2 [50.B1]细胞、THC-8307细胞、HCA-7细胞
GM03573细胞系相关产品:L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、GM03320细胞、H-2141细胞
HR1K细胞系相关产品:JB6 Cl 30-7b细胞、TM-4细胞、IB-RS2细胞
MM1.S细胞系相关产品:TKB1细胞、LM8细胞、V-79细胞
LC2/Ad细胞系相关产品:RCM1细胞、McG-1细胞、Hep II细胞
IM-95细胞系相关产品:A-204细胞、AMJ2-C8细胞、JB6 Cl 30-7b细胞
Psi-2-DAP细胞系相关产品:EAC-E2G8细胞、IEC-6细胞、OKa-C-1细胞
NOMO-1细胞系相关产品:786-O细胞、CII细胞、HEK293T/17细胞
INS1细胞系相关产品:OVCAR-8细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、MRCV细胞
251MG细胞系相关产品:Hs-578T细胞、IMCD-3细胞、HN 4细胞
CAL-78细胞系相关产品:NCI-H1435细胞、COLO 680N细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞
H157细胞系相关产品:CCRF-CEM C1细胞、NCIH1048细胞、NCIH841细胞
JiyoyeP-2003细胞系相关产品:UCLA SO M14细胞、B5537SKIN细胞、Panc813细胞
B16BL6细胞系相关产品:HEI193细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞、MSF细胞
NCIH358细胞系相关产品:NOMO-1细胞、Giant Cell Tumor细胞、COS-1细胞
MCF10-A细胞系相关产品:ME-1 [Human leukemia]细胞、SNU387细胞、SNU251细胞
N1E115细胞系相关产品:ST-2细胞、Calu-6细胞、Kit225 K6细胞
PANC-08-13细胞系相关产品:SUM102细胞、JROECL21细胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞
VCaP细胞系相关产品:Hs274T细胞、LNCaP-C4-2细胞、SKOV-3细胞
PC3M-1E8细胞系相关产品:CEMx721.174.T2细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞、Hs839.T细胞
UO.31细胞系相关产品:MDA-MB-134 VI细胞、GB-1细胞、NBL-1细胞
MB157细胞系相关产品:SNU-1细胞、18G3.cl 1细胞、SK-ChA-1细胞
C4I细胞系相关产品:V 79-4细胞、SL-1细胞、MUM2B细胞
H8细胞系相关产品:SNU-354细胞、HCC-78细胞、Jurkat Clone E6-1细胞
RPTEC/TERT1 epithelioid cells人肾近端小管上皮细胞系
SU-86-86细胞系相关产品:HCA 7细胞、NCIH820细胞、OVCA8细胞
CaES-17细胞系相关产品:MDA453细胞、ACC-M细胞、TE-11细胞
SUNE1细胞系相关产品:GM06141B细胞、Ramos 1细胞、H-889细胞
MHCC 97-L细胞系相关产品:CT-26 WT细胞、SW 620细胞、Mac-1细胞
"