"Hca-F epithelioid cells小鼠肝癌细胞系
细胞背景资料:肝癌
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
JHH2细胞系相关产品:DMS 153细胞、KCL22细胞、675T细胞
NCI-SNU-5细胞系相关产品:HRMC细胞、RIN-14B细胞、THC-8307细胞
MA-104细胞系相关产品:Rin-M-5F细胞、RT4-D6P2T细胞、UMR106细胞
细胞生长:贴壁
Hca-F epithelioid cells小鼠肝癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
冷冻细胞解冻程序:依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例,制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类,若因实验需要,必须有所不同时,务必以缓慢比例渐次改变培养基组成,确定细胞适应后,方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于37°C水槽中回温,回温后喷以70%酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。取出冷冻管,立即放入37°C水槽中快速解冻,水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿,否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后,以70%ethanol擦拭冷冻管外部,移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度,于无菌操作台内取10ml培养基加至T25或T75flask中。取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25或T75flask内之培养基,混合均匀,放入37°C,5%CO2培养箱培养。对绝大多数细胞而言,1%以下之冷冻保护剂DMSO,不会对细胞之贴附或活化有不良影响,不需立刻由解冻细胞中去除,待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞,需立即去除DMSO者,则可将解冻后之细胞悬浮液放入5-10ml培养基中,离心300xg(约1000rpm),5分钟,小心移去上清液,加入适量新鲜培养基,将细胞均匀混合后,转移至培养瓶中,再放入37°C,5%CO2培养箱培养。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
UPCI:SCC90细胞系相关产品:Jurkat (clone E6-1)细胞、NCIH1155细胞、GM00637B细胞
HuT-78细胞系相关产品:LLC-PK1细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞、LS-513细胞
OVCAR 433细胞系相关产品:COLO394细胞、SMMC7721细胞、RPMI 8226细胞
Co-115细胞系相关产品:RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞
COLO-684细胞系相关产品:DMS 273细胞、NCI-SNU-668细胞、Hs852细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Hca-F epithelioid cells小鼠肝癌细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
H69/P细胞系相关产品:Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞
OV-2008细胞系相关产品:IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞
PANC 1005细胞系相关产品:BEP2D细胞、Psi-2-DAP细胞、JVM-3细胞
hEM15A细胞系相关产品:NCI-H2591细胞、U-251_MG细胞、M-14细胞
SCC-25细胞系相关产品:ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞
786O细胞系相关产品:OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞
RPMI no. 8226细胞系相关产品:BHT-101细胞、G292细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞
SKMEL-24细胞系相关产品:MDA-134细胞、AE 1201细胞、MV4II细胞
Medical Research Council cell strain-5细胞系相关产品:SupT1细胞、G 292 Clone A 141B1细胞、IR983F细胞
NIH-3T3细胞系相关产品:TM-4细胞、CAL-85-1细胞、HA1800细胞
Hca-F epithelioid cells小鼠肝癌细胞系
HRA-19细胞系相关产品:NCI-H441细胞、aTC1-6细胞、HL 60细胞
U118-MG细胞系相关产品:SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞系相关产品:GLRK 13细胞、EJ1细胞、HTR-8/SVneo细胞
NCI-HUT-292细胞系相关产品:NCIH2291细胞、H322T细胞、SUDHL4细胞
HCC-78细胞系相关产品:H358细胞、RPMC细胞、L-Wnt-3A细胞
Nthy ori 3.1细胞系相关产品:SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞
Nthy ori 3.1细胞系相关产品:SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞
CCD19-Lu细胞系相关产品:UCD-MLA-144细胞、NG 108-15细胞、AAV-293细胞
BIC1细胞系相关产品:NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞
NCI-H820细胞系相关产品:P31/FUJ细胞、Caco 2细胞、HHUA细胞
HCC 94细胞系相关产品:624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞
SNU-C1细胞系相关产品:NGP细胞、GLAG-66细胞、Ly7细胞
MOLT16细胞系相关产品:J774A1细胞、NCIH292细胞、NeHepLxHT细胞
NCIH510细胞系相关产品:N-9细胞、HCT GEO细胞、SNU-886细胞
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LICR-HN6细胞系相关产品:NK10a细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞、T-ALL 1细胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞系相关产品:NCIH2107细胞、NCI-H1581细胞、NFS-60细胞
UPCI-SCC090细胞系相关产品:L M (TK-)细胞、Panc 1细胞、NCI.H460细胞
LS 174 T细胞系相关产品:WILL2细胞、HepG2-luc细胞、MPP89细胞
MDA-MB-157细胞系相关产品:A 172细胞、KGN细胞、LOUNH91细胞
TW-039细胞系相关产品:RT-4细胞、102PT细胞、GalK 1细胞
Centre Antoine Lacassagne-78细胞系相关产品:H-548细胞、LNT-229细胞、NTERA2-cloneD1细胞
Medical University of Graz-Chordoma 1细胞系相关产品:HEH2细胞、CA46细胞、B95-8细胞
A-204细胞系相关产品:COLO 205细胞、P31/FUJ细胞、NCI H345细胞
OVCAR-8/ADR细胞系相关产品:Psi2 DAP细胞、MDAMB134VI细胞、X63-Ag8-653细胞
P3HRI细胞系相关产品:SCL I细胞、CCF-STTG1细胞、MDST8细胞
PK (15)细胞系相关产品:GM07404D细胞、Hs-578T细胞、NCIH2286细胞
HEL-92_1_7细胞系相关产品:SKG-IIIa细胞、H4-IIE-C3细胞、NCI H226细胞
QG-56细胞系相关产品:SY5Y细胞、Tu-686细胞、SB细胞
BEL 7404细胞系相关产品:Colo205细胞、JiyoyeP-2003细胞、HIMEC细胞
H2591细胞系相关产品:Hep G2-Luc细胞、SKOV-3细胞、CEMC7细胞
NMCG-1细胞系相关产品:GM00215细胞、TE-32细胞、CAL 62细胞
CHO细胞系相关产品:MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞
INS1细胞系相关产品:OVCAR-8细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、MRCV细胞
MDA-MB415细胞系相关产品:VMCUB-1细胞、CAL 85-1细胞、Y-1细胞
LICCF细胞系相关产品:Emory University-3细胞、DB细胞、EJ1细胞
WEHI3B细胞系相关产品:OS-732细胞、HepG2/C3A细胞、Madison细胞
TE-85 clone 5细胞系相关产品:TE6细胞、MRC-5细胞、FT-293细胞
CV 1细胞系相关产品:hADSCs细胞、BALL-1细胞、Z310细胞
Ku812F细胞系相关产品:159PT细胞、GC-2细胞、CD-18细胞
EB-1细胞系相关产品:SUP-M2细胞、CTLA4 Ig-24细胞、SUD6细胞
P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品:NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞
NCI-H2347细胞系相关产品:KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞
SNU423细胞系相关产品:OCILY-10细胞、GOTO细胞、EFM192A细胞
HConEpic细胞系相关产品:Vero 76 clone E-6细胞、KP-N-RT细胞、NCIH929细胞
Panc-813细胞系相关产品:IA-LM细胞、PCI:SG-231细胞、OE-19细胞
OUMS-27细胞系相关产品:KYSE270细胞、H774细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞
HuT78细胞系相关产品:P3J HR1-K细胞、MHCC 97细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞
MGH-U3 (RN)细胞系相关产品:P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品:H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞
OSRC2细胞系相关产品:GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞
Hca-F epithelioid cells小鼠肝癌细胞系
H-727细胞系相关产品:293A细胞、U251细胞、PK-13细胞
KCL22细胞系相关产品:GC9811-P细胞、Mo7e细胞、NCI-H1105细胞
HPB/ALL细胞系相关产品:SP-2/0-AG14细胞、95D细胞、MDA-MB468细胞
PANC 1005细胞系相关产品:BEP2D细胞、TCCPAN2细胞、CCC-HEL-1细胞
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