"IB-RS-2 epithelioid cells猪肾细胞系
细胞背景资料:肾;自发永生
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
NCIH2122细胞系相关产品:LN-382细胞、OVTOKO细胞、NCIH1581细胞
QGY 7701细胞系相关产品:NCI H23细胞、HOPC细胞、MS1细胞
Hs274T细胞系相关产品:NCI-H1437细胞、CAOV3细胞、PC-9/S1细胞
细胞生长:贴壁
IB-RS-2 epithelioid cells猪肾细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NeHepLxHT细胞系相关产品:SNU-C2A细胞、SLMT1细胞、SNU449细胞
TE 32细胞系相关产品:Pro-5 Lec1.3c细胞、T-ALL 1细胞、NCI-H23细胞
MuM-2B细胞系相关产品:MNNG细胞、KYSE 70细胞、CL34细胞
Cates 1B细胞系相关产品:KP2细胞、67NR细胞、A549细胞
EMT-6细胞系相关产品:CTLL2细胞、MCM细胞、GA-10细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
IB-RS-2 epithelioid cells猪肾细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
CCRF SB细胞系相关产品:H-1355细胞、KTCTL-140细胞、A101D细胞
HTh74细胞系相关产品:NCI-H1568细胞、KG1A细胞、KY-50细胞
UACC-812细胞系相关产品:HT144-mel细胞、CL 1-5细胞、H69C细胞
H1838细胞系相关产品:DCS细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞、MDAMB157细胞
H-2066细胞系相关产品:OVCA433_Bast细胞、RKO-AS-45-1细胞、Panc 02细胞
COLO320 DM细胞系相关产品:RCC 7860细胞、A431/P细胞、MDA-1386细胞
SKNF1细胞系相关产品:HAC-84细胞、SNU638细胞、AtT-20细胞
HEK 293 c18细胞系相关产品:HBEpiC细胞、OVCAR 420细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞
SUM52PE细胞系相关产品:AtT-20细胞、451Lu细胞、JM1细胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞系相关产品:T-84细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、PA I细胞
IB-RS-2 epithelioid cells猪肾细胞系
Lu-99A细胞系相关产品:P3X63 Ag8细胞、HPAF II细胞、CHO K1细胞
Nthy ori 3.1细胞系相关产品:SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞
L5178Y-R细胞系相关产品:mIMCD3细胞、RT-BM细胞、HK2细胞
SUM 149细胞系相关产品:Detroit-562细胞、CHL1细胞、HT(H9)细胞
H87细胞系相关产品:LNCaP-ATCC细胞、HEK293F细胞、RC-2细胞
SW 1088细胞系相关产品:NTera2/D1细胞、Hs888T细胞、ECV 304细胞
SC1细胞系相关产品:H-1105细胞、3AO细胞、RH30SJ细胞
NCIH1618细胞系相关产品:CFSC-2G细胞、LAN1细胞、KP-N-YN细胞
SK-MEL 28细胞系相关产品:NS1-Ag4细胞、OSC19细胞、IHC-ST1细胞
Ishikawa细胞系相关产品:C166细胞、CCD19Lu细胞、SUM-102PT细胞
MGH-U1 (EJ)细胞系相关产品:Lewis lung carcinoma line 1细胞、HBL-100细胞、H1436细胞
A2780 CP70细胞系相关产品:Cor L88细胞、B958细胞、HELA-GFP细胞
COLO-699细胞系相关产品:LI7细胞、CMT-64细胞、BSC-1细胞
H2108细胞系相关产品:MES-13细胞、H-2405细胞、NCIH69细胞
HARAB细胞系相关产品:EA. hy 926细胞、Jurkat FHCRC细胞、FUOV1细胞
SGC-7901细胞系相关产品:NCIH596细胞、NK-92细胞、V-79-4细胞
KP-N-RT细胞系相关产品:NCIH1563细胞、Ca-Ski细胞、HG2855细胞
Suzhou Human Glioma-44细胞系相关产品:52PE细胞、H-157细胞、B16 melanoma F10细胞
MAVER细胞系相关产品:HuH 6细胞、FL-83B细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞
OC 316细胞系相关产品:SF-539 BT细胞、Nittby-Salford 1细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞
B16/F0细胞系相关产品:P3/ag细胞、SW-839细胞、ATN1细胞
MBT-2细胞系相关产品:HEY-A8细胞、HT-1376细胞、EC109细胞
NCI H82细胞系相关产品:SP2/0 Ag-14细胞、SNU668细胞、Clone Y-1细胞
RPMI2650细胞系相关产品:H747细胞、HEC-1-A细胞、HS688AT细胞
C-Li-7细胞系相关产品:SW-780细胞、SJSA1细胞、KU 812F细胞
JROECL33细胞系相关产品:LS-411N细胞、HEK AD293细胞、OCI-AML5细胞
WERI-Rb 1细胞系相关产品:C4-2细胞、RK13细胞、Y3-Ag1,2,3细胞
OCI-Ly 10细胞系相关产品:IEC 18细胞、HLE B-3细胞、WILL-2细胞
TE15细胞系相关产品:N-Tera-2细胞、PAEC细胞、4T1-LUC细胞
H522细胞系相关产品:HUASMC细胞、JHH-2细胞、Daudi细胞
AGS细胞系相关产品:Glioma 261细胞、B 95.8细胞、H-596细胞
MDA231细胞系相关产品:JURKAT E-61细胞、Panc813细胞、KU-812细胞
RPMI1846细胞系相关产品:KYSE50细胞、RSC-96细胞、HASMC细胞
P-36细胞系相关产品:HCT_116细胞、Chinese Hamster Ovary细胞、VM-CUB-1细胞
UO31细胞系相关产品:MHH-CALL-2细胞、MV-4:11细胞、293 HEK细胞
CCC-HHM-2细胞系相关产品:CL40细胞、NCIH2171细胞、CCD19-Lu细胞
SW 982细胞系相关产品:Danio rerio Gill细胞、UWB1.289细胞、WERI-Rb 1细胞
TE-671细胞系相关产品:LM8细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞、ROS 17/28细胞
KYSE 510细胞系相关产品:NCIH1105细胞、RK 13细胞、Hs737T细胞
Huh 7.5.1细胞系相关产品:LM(TK-)细胞、SuDHL 2细胞、UM2细胞
CCC-HHM-2细胞系相关产品:CL40细胞、NCIH2171细胞、CCD19-Lu细胞
HUT-226细胞系相关产品:RCC23细胞、COLO-699细胞、OVCAR10细胞
P3X63Ag8-6-5-3细胞系相关产品:SUM102PT细胞、RINm5F细胞、RT112细胞
NCI-H660细胞系相关产品:SK-MEL5细胞、GM03573细胞、LS 1034细胞
BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品:NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
ID8细胞系相关产品:IPI-2I细胞、RA 1细胞、FHs 74 Int细胞
MEF细胞系相关产品:OKAC1细胞、SNT-8细胞、C8-D1A细胞
Hs888 Lu细胞系相关产品:NE-4C细胞、NTERA-2 cl.D1细胞、Ca9-22细胞
Madin Darby Bovine Kidney细胞系相关产品:LU65细胞、JB6 [Mouse]细胞、H1623细胞
SKRC-20细胞系相关产品:NCI-H2342细胞、JOSK-M细胞、SUM 52细胞
OK-WT细胞系相关产品:BBE细胞、AML-193细胞、PLA-801C细胞
IB-RS-2 epithelioid cells猪肾细胞系
U-118MG细胞系相关产品:PK-15细胞、293EBNA细胞、HPDEC细胞
ECV304细胞系相关产品:H82细胞、MCF-7/AdrR细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞
16-HBEo细胞系相关产品:Normal Rat Kidney-49F细胞、Pan02细胞、GB-1细胞
UACC-812细胞系相关产品:HT144-mel细胞、SKMEL28细胞、ELD-1细胞
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