"BEP2D epithelioid cells人永生化支气管上皮细胞系
细胞背景资料：支气管；上皮细胞；HPV１８转化
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
UM-UC-3细胞系相关产品：16HBEo-细胞、A704细胞、AN3CA细胞
J-774细胞系相关产品：IMR 90细胞、A9细胞、Rat-1细胞
MDA-MB-231-GFP细胞系相关产品：EJ细胞、LuCL4细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞
细胞生长：贴壁
BEP2D epithelioid cells人永生化支气管上皮细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SW1990细胞系相关产品：SNU1040细胞、CACO2细胞、C-4I细胞
H-1155细胞系相关产品：143BTK-细胞、LN 229细胞、hADSCs细胞
CRFK细胞系相关产品：TCC-PAN2细胞、JVM3细胞、NCI.H522细胞
SNU-484细胞系相关产品：T.T细胞、KTC-1细胞、EBNA293细胞
NE-4C细胞系相关产品：PK-136细胞、rRMECs细胞、NuTu-19细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
BEP2D epithelioid cells人永生化支气管上皮细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
NCI-H2009细胞系相关产品：CHP 212细胞、LS 174T细胞、WEHI3细胞
D562细胞系相关产品：MIA-PaCa-2细胞、HFT8810细胞、SHSY5Y细胞
SupB15W细胞系相关产品：SNU387细胞、EOMA细胞、COLO-16细胞
Pa18C细胞系相关产品：HS-766T细胞、BSC40细胞、NCI-441细胞
NCM460细胞系相关产品：Metastatic Variant 522细胞、Panc-02细胞、NCI-H774细胞
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BEP2D epithelioid cells人永生化支气管上皮细胞系
TK 10细胞系相关产品：MC-116细胞、AG06814-N细胞、CAL851细胞
FL 62891细胞系相关产品：HL60细胞、NCI-SNU-216细胞、KPL-1细胞
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H146细胞系相关产品：NCTC 3960细胞、CWR22-Rv1细胞、HFLS-OA细胞
C33-A细胞系相关产品：OCI-Ly03细胞、A-498细胞、NGP细胞
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Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞系相关产品：Hs 294T细胞、U-118MG细胞、HNE-1细胞
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MPP 89细胞系相关产品：KY180细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞、INS1细胞
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OSKM-1细胞系相关产品：CMEC/D3细胞、Hs 839.T细胞、CCD-841-CoTr细胞
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NCI-H510A细胞系相关产品：G-292 clone A141B1细胞、H209细胞、CL1.0细胞
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U-343MG细胞系相关产品：NCI-SNU-601细胞、SW480E细胞、DB细胞
CMT 93细胞系相关产品：FaDu细胞、Hs445细胞、P3/NS-1细胞
NIE 115细胞系相关产品：B16-F10-BL6细胞、Bac1 2F5细胞、NCIH1395细胞
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C57 Mouse Tumor 64细胞系相关产品：BALB/3T3细胞、MDAPCa2b细胞、RT-4细胞
DMS79细胞系相关产品：RBL-1细胞、SK MES 1细胞、BGC-823细胞
M-1细胞系相关产品：HEEpiC细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞、RPMI7951细胞
NCTC clone 1469细胞系相关产品：Hs 729T细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM 239细胞
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Blotchy fibroblast-11细胞系相关产品：Mevo细胞、OCI-AML-3细胞、UMC11细胞
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞系相关产品：HS940细胞、S.B.细胞、Ca761细胞
MLE 12细胞系相关产品：MLA144细胞、MDA MB 453细胞、GM03569细胞
BEP2D epithelioid cells人永生化支气管上皮细胞系
SK-MEL-5细胞系相关产品：H28细胞、Mel624细胞、NCI-SNU-C1细胞
P3J.HR1K细胞系相关产品：H-510A细胞、AR42J细胞、MES-13细胞
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SupB15W细胞系相关产品：SNU387细胞、MOPC细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞
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