"MTEC1 epithelioid cells小鼠胸腺上皮细胞系
细胞背景资料:胸腺;上皮细胞;自发永生
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
Metastatic Variant-522细胞系相关产品:NCI-H2291细胞、GH 3细胞、Granta 519细胞
H-2122细胞系相关产品:SF126细胞、MDA231-LM2-4175细胞、TF1细胞
HPAF细胞系相关产品:Hs 729细胞、SKMEL-24细胞、SNK1细胞
细胞生长:贴壁
MTEC1 epithelioid cells小鼠胸腺上皮细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
冷冻细胞解冻程序:依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例,制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类,若因实验需要,必须有所不同时,务必以缓慢比例渐次改变培养基组成,确定细胞适应后,方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于37°C水槽中回温,回温后喷以70%酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。取出冷冻管,立即放入37°C水槽中快速解冻,水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿,否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后,以70%ethanol擦拭冷冻管外部,移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度,于无菌操作台内取10ml培养基加至T25或T75flask中。取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25或T75flask内之培养基,混合均匀,放入37°C,5%CO2培养箱培养。对绝大多数细胞而言,1%以下之冷冻保护剂DMSO,不会对细胞之贴附或活化有不良影响,不需立刻由解冻细胞中去除,待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞,需立即去除DMSO者,则可将解冻后之细胞悬浮液放入5-10ml培养基中,离心300xg(约1000rpm),5分钟,小心移去上清液,加入适量新鲜培养基,将细胞均匀混合后,转移至培养瓶中,再放入37°C,5%CO2培养箱培养。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
OAC-P4C细胞系相关产品:Hut292细胞、Karpas 422细胞、AG06814-M细胞
K-562细胞系相关产品:GFP-Olig2细胞、Colo205细胞、H3255细胞
KMB 17细胞系相关产品:MCF10A细胞、COV362细胞、SNU216细胞
Rat1细胞系相关产品:INS-1细胞、HPaSteC(HPSC)细胞、SW 780细胞
C57/B6-L细胞系相关产品:Hs611T细胞、CCD-112CoN细胞、P3 88 D1细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MTEC1 epithelioid cells小鼠胸腺上皮细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
NCTC-929细胞系相关产品:SW1417细胞、HGSMC细胞、HO8910PM细胞
HKF细胞系相关产品:H-157细胞、OV1063细胞、NCIH520细胞
JROECL 19细胞系相关产品:BI-Mel细胞、KRC Y细胞、HBSMC细胞
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EFO 27细胞系相关产品:TU 686细胞、Kit-225细胞、JB6 [Mouse]细胞
Colo205细胞系相关产品:KBM-7细胞、RAG细胞、MHCC 97细胞
MTEC1 epithelioid cells小鼠胸腺上皮细胞系
SW780细胞系相关产品:TOV-21G细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Vero E6细胞
LSC-1细胞系相关产品:NCIH1703细胞、NIH 3T3细胞、CF-1 MEF细胞
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P3/NS1/Ag4-1细胞系相关产品:2008细胞、AA-Mel细胞、SMMC-7721细胞
3T3 L1细胞系相关产品:NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞
3T3 L1细胞系相关产品:NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞
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SNU-739细胞系相关产品:A-498细胞、HGBEC细胞、AM-38细胞
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LL/2细胞系相关产品:MDA-436细胞、TCCPAN2细胞、BEP2D细胞
DF1细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞、H838细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞
CHO-ori细胞系相关产品:FL 62891细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞、HCASMC细胞
IA-LM细胞系相关产品:CCD-19Lu细胞、H2009细胞、H-220细胞
HOS (TE85, Clone F5)细胞系相关产品:JurkatE6-1细胞、HGE细胞、OCI-Ly03细胞
NFS-60细胞系相关产品:Hs-600-T细胞、MeSoTheliOma-211H细胞、293 H细胞
NCIH1651细胞系相关产品:KG-1细胞、HuT 78细胞、NCIH1792细胞
IHHA-1细胞系相关产品:G402细胞、BEL 7405细胞、TE-32细胞
KYSE 180细胞系相关产品:H2108细胞、OVCAR-8细胞、SBC-3细胞
U937细胞系相关产品:Kasumi-6细胞、Rat Lung-65细胞、SF 126细胞
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H4IIE细胞系相关产品:H-1975细胞、M109细胞、C4I细胞
AML-EOL-1细胞系相关产品:HSAS1细胞、FAK+/+细胞、NCI-H2009细胞
H1522细胞系相关产品:Swiss 3T3细胞、AML193细胞、CTLA4Ig-24细胞
Panc 03.27细胞系相关产品:Scott细胞、PANC-04-03细胞、MAVER1细胞
801-D细胞系相关产品:IPEC1细胞、Panc02细胞、PANC0813细胞
NCIH82细胞系相关产品:HT55细胞、NTera 2细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞
MeT-5A细胞系相关产品:A-549细胞、SK-ES1细胞、PANC 327细胞
Human Liver-7702细胞系相关产品:JiyoyeP-2003细胞、ATDC5细胞、LICR-HN-6细胞
GM05384细胞系相关产品:RWPE1细胞、MCF10-A细胞、SW403细胞
FHL 124细胞系相关产品:38C13细胞、L-M[TK-]细胞、FRO 81-2细胞
HPMC细胞系相关产品:FF-WT-BJ细胞、HEL-92_1_7细胞、RFL6细胞
HSC5细胞系相关产品:SW 900细胞、AR42J细胞、H-510A细胞
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253J-Bladder-V细胞系相关产品:LA 4细胞、KMST-6细胞、PAI细胞
BN-CL2细胞系相关产品:SW-1271细胞、B16 BL6细胞、SNU-886细胞
T98-G细胞系相关产品:H-28细胞、WEHI 164细胞、HEL细胞
JOSK-M细胞系相关产品:SKNO-1细胞、CCRF/CEM/0细胞、HEK293A细胞
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