"MPC-5 epithelioid cells小鼠肾足细胞系
细胞背景资料:肾足细胞;SV40转化
细胞形态:上皮细胞样
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
SACCLM细胞系相关产品:HEK 293细胞、HCT/Taxo1细胞、Det. 562细胞
JROECL 19细胞系相关产品:BI-Mel细胞、KRC Y细胞、HBSMC细胞
Pt K1细胞系相关产品:Ly18细胞、PZ-HPV-7细胞、H2452细胞
细胞生长:贴壁
MPC-5 epithelioid cells小鼠肾足细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品:NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
NHRF细胞系相关产品:D-341 Med细胞、MB 157细胞、IOSE 29细胞
X63-Ag8-653细胞系相关产品:CemT4细胞、C-4-I细胞、NCIH1155细胞
RASMC细胞系相关产品:OCI-Ly8细胞、TPC-1细胞、WSU-DLCL-2细胞
HDF-a细胞系相关产品:MDA-330细胞、HCC-38细胞、MILE SVEN 1细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MPC-5 epithelioid cells小鼠肾足细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
Eca109细胞系相关产品:H283细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞、H1341细胞
LS-123细胞系相关产品:Hs 739.T细胞、HEK293-F细胞、H2330细胞
VAESBJ细胞系相关产品:ELD-1细胞、NCI-H322T细胞、MyLa2059细胞
SK-MES细胞系相关产品:624-mel细胞、BBE细胞、MPP 89细胞
OVTOKO细胞系相关产品:RL-65细胞、Tn 5B1-4细胞、ketr 3细胞
KCL-22细胞系相关产品:Central Adrenergic TH-expressing a细胞、MKN28细胞、SaOS细胞
NTera 2细胞系相关产品:N1E115细胞、NK62a细胞、NCI-H295细胞
RA-FLSs细胞系相关产品:HCC0044细胞、ZR75-30细胞、L6细胞
HANK-1细胞系相关产品:HPAF-II/CD18细胞、Hs274T细胞、NCI-H1618细胞
LTEP-sm细胞系相关产品:NCI-H146细胞、293/EBNA细胞、HFL-I细胞
MPC-5 epithelioid cells小鼠肾足细胞系
MOLT16细胞系相关产品:J774A1细胞、NCIH292细胞、NeHepLxHT细胞
MFM223细胞系相关产品:TMD8细胞、Hepatoma 22细胞、P3J-HR-1细胞
ZR75-1细胞系相关产品:MSB-1细胞、SF126细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞
JeKo 1细胞系相关产品:HPAF-2细胞、TE-8细胞、hOMF细胞
OKT 3细胞系相关产品:SNU-638细胞、ROS17/2.8细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞
NCI-H1944细胞系相关产品:RBL2H3细胞、RA细胞、NCI-H596细胞
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Line 207细胞系相关产品:HCC1806细胞、BC-022细胞、U251-MG细胞
HOS (TE85, Clone F5)细胞系相关产品:JurkatE6-1细胞、HGE细胞、OCI-Ly03细胞
NCIH889细胞系相关产品:LS180细胞、SK-HEP-1细胞、FHL 124细胞
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YAC细胞系相关产品:NUGC-2细胞、SUDHL5细胞、MCA-205细胞
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ATN1细胞系相关产品:NOR 10细胞、GM-215细胞、H-727细胞
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Centre Antoine Lacassagne-39细胞系相关产品:Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、High 5细胞、CD 18细胞
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CTSC-3细胞系相关产品:HFF细胞、Nb2-11细胞、SU-DHL-5细胞
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Swiss 3T6细胞系相关产品:GM02219D细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞、KM-12细胞
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MPC-5 epithelioid cells小鼠肾足细胞系
OVCA-433细胞系相关产品:HOS细胞、NCC-IT细胞、Bowes melanoma cells细胞
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