"CPAE epithelioid cells牛肺血管内皮细胞系
细胞背景资料:肺血管;内皮细胞
细胞形态:上皮细胞样
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
NCI-H748细胞系相关产品:ARH 77细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞、COR-L26细胞
PC3细胞系相关产品:MDCK-2细胞、NCI-H1770细胞、NUGC3细胞
NCIH1651细胞系相关产品:KG-1细胞、HuT 78细胞、NCIH1792细胞
细胞生长:贴壁
CPAE epithelioid cells牛肺血管内皮细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
N87细胞系相关产品:HDSMC细胞、Th17细胞、L-M(TK-)细胞
MCA 38细胞系相关产品:MeSoTheliOma-211H细胞、NSI/1-Ag4-1细胞、GC-1spg细胞
Ly19细胞系相关产品:CRFK细胞、SuperTube细胞、NB9细胞
alphaTC1 Clone 6细胞系相关产品:CCRF.CEM细胞、HBE135-E6E7细胞、ZR-75-1细胞
H-1930细胞系相关产品:PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CPAE epithelioid cells牛肺血管内皮细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
32Dcl3细胞系相关产品:NIH3T3细胞、A 2780 CP细胞、WPMY-1细胞
SRA01/04细胞系相关产品:SUM-149PT细胞、MAEC细胞、Colo-201细胞
HUASMC细胞系相关产品:HC11细胞、SKLU01细胞、hTERT-HME1细胞
HPC-Y5细胞系相关产品:GM02131A细胞、H1694细胞、IEC 6细胞
SUD4细胞系相关产品:HNTEC细胞、T HEECs细胞、Hs688(A)T细胞
293 F细胞系相关产品:Huh-7.5.1细胞、RS4-11细胞、U87细胞
MCF 7细胞系相关产品:293-GP细胞、MyLa2059细胞、NCI-H2444细胞
AU 565细胞系相关产品:Det 562细胞、OCM1细胞、WC00097细胞
Helacyton gartleri细胞系相关产品:HCGC细胞、VP229细胞、RBL.2H3细胞
Kit 225细胞系相关产品:NCC-IT细胞、MC3T3-L1细胞、NFHIOSE-29细胞
CPAE epithelioid cells牛肺血管内皮细胞系
TR 146细胞系相关产品:SW1222细胞、SNB19细胞、KM H-2细胞
Calf Pulmonary Artery 47细胞系相关产品:SKRC-20细胞、MKN-74细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞
OVCAR-8/ADR细胞系相关产品:Psi2 DAP细胞、MDAMB134VI细胞、X63-Ag8-653细胞
RS4;11细胞系相关产品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞、Colo741细胞、D10G41细胞
CCD-19Lu细胞系相关产品:HTh74细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞、H358细胞
Jurkat细胞系相关产品:Pt-K1细胞、ACC2细胞、mRMEC细胞
Jurkat细胞系相关产品:Pt-K1细胞、ACC2细胞、mRMEC细胞
H-250细胞系相关产品:H520细胞、Functional Liver Cell-7细胞、OUMS-27细胞
HEB细胞系相关产品:KMS26细胞、H-847细胞、EB1细胞
Hs604T细胞系相关产品:TSCCa细胞、P3X63细胞、GA-10 clone 4细胞
LA795细胞系相关产品:Vero from pool #76细胞、HLF-a细胞、OVCAR-5细胞
HEK 293-H细胞系相关产品:Hs870T细胞、KYSE510细胞、PLA801-95C细胞
SK-NEP-1细胞系相关产品:SCL II细胞、Dunn LM8细胞、COLO-829细胞
8305C细胞系相关产品:MKN28细胞、NCI-H719细胞、SK-MEL2细胞
RIN-m 14B细胞系相关产品:SW-1783细胞、SHG44细胞、SupB15W细胞
MPC-5细胞系相关产品:NCI-SNU-886细胞、NCIH1703细胞、MOLM-14细胞
HCC1833细胞系相关产品:HBL-100细胞、NGEC细胞、HUT-125细胞
Monomac-1细胞系相关产品:H2228细胞、Panc 10.05细胞、SUM190细胞
CCC-HIE-2细胞系相关产品:HEK293EBNA细胞、293 H细胞、Gejiu Lung Carcinoma-82细胞
NCI-H1770细胞系相关产品:SKGIIIA细胞、HuH28细胞、TK.10细胞
HPAF-I细胞系相关产品:KM.12细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞、Hs 832(C).T细胞
Mel-MeWo细胞系相关产品:UK Pan-1细胞、K562细胞、P3HR1-BL细胞
MDCK.2细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-10A细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、Hep G2-Luc细胞
NCIH2286细胞系相关产品:IHH-4细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、HCT/Taxo1细胞
McARH7777细胞系相关产品:NCIADR.RES细胞、MRCV细胞、MASMC细胞
IB-RS2细胞系相关产品:SW-1417细胞、MKN-45细胞、OUMS-23细胞
KYSE 450细胞系相关产品:Med 283细胞、WM239细胞、SNU354细胞
MDA PCa 2b细胞系相关产品:COLO357细胞、NCI-H78细胞、HCT/FU细胞
Walker/LLC-WRC 256细胞系相关产品:GM05384细胞、Panc8.13细胞、HCT 8细胞
H2452细胞系相关产品:BrCL12细胞、PTK2细胞、EB2细胞
TCam-2细胞系相关产品:SKMES-1细胞、NB-9细胞、HFF细胞
CCD 1112SK细胞系相关产品:OVCAR-432细胞、OV1-P细胞、H-1650细胞
CEM-CCRF (CAMR)细胞系相关产品:H-358细胞、SKM-1细胞、Epstein-Barr-3细胞
HCa/16A3-F细胞系相关产品:SHEP1细胞、CCK-81细胞、RA.1细胞
NFS-60细胞系相关产品:Hs-600-T细胞、MeSoTheliOma-211H细胞、293 H细胞
PTK-2细胞系相关产品:MHCC97L细胞、SUDHL-1细胞、Ramos (RA 1)细胞
KE37细胞系相关产品:H2107细胞、J111细胞、M14细胞
Hs 766.T细胞系相关产品:NCIH838细胞、HPMC细胞、HT 1376.T细胞
HS-940-T细胞系相关产品:Hs940-T细胞、WILL-2细胞、HSF2细胞
FRO细胞系相关产品:NCI-H441-4细胞、hUC-MSC细胞、H716细胞
QGY7703细胞系相关产品:Jurkat77细胞、PK-15细胞、SuDHL 5细胞
HEK 293T/17细胞系相关产品:SKML-28细胞、FHs 74 Int细胞、BHT-101细胞
Wistar Institute-38细胞系相关产品:PK(15)细胞、WM115细胞、PC 61-5-3细胞
SW-1783细胞系相关产品:FRhK4细胞、CHOK1细胞、U14细胞
C3H10T1/2 clone8细胞系相关产品:COS-1细胞、MCF10A细胞、NCIH322细胞
B-cell with DC Morphology细胞系相关产品:SCL2细胞、Caco-2/ATCC细胞、CA46细胞
DMS-79细胞系相关产品:U031细胞、AM38细胞、UMUC1细胞
H2405细胞系相关产品:BALL-1细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞、P3 NS1 Ag4细胞
L5178Y细胞系相关产品:Transformed Human Liver Epithelial-3细胞、J774.A1细胞、PL-5细胞
COV 434细胞系相关产品:HEK/EBNA细胞、SKNBE2C细胞、HT1197细胞
NCI-H2171细胞系相关产品:AN3细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞、RCK8细胞
CPAE epithelioid cells牛肺血管内皮细胞系
HPAF II细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、Caki-1细胞、NUGC2细胞
TMK1细胞系相关产品:HMEC细胞、SW-1271细胞、H-2141细胞
MADB 106细胞系相关产品:HCT FET细胞、RCK-8细胞、A431细胞
HT细胞系相关产品:WM35细胞、NCI-H460细胞、HEK293EBNA细胞
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