"LLC-WRC 256 epithelioid cellsWalker氏癌肉瘤256瘤细胞系
细胞背景资料:乳腺癌;雌性
细胞形态:上皮细胞样
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
MLA144细胞系相关产品:HCA7细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞、Scott and White No. 13细胞
JB6 Cl 30-7b细胞系相关产品:T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞
NCI660细胞系相关产品:87 MG细胞、NCI-H23细胞、MV 4;11细胞
细胞生长:贴壁
LLC-WRC 256 epithelioid cellsWalker氏癌肉瘤256瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞学在生命科学科中起着至关重要的作用,近年来细胞学蓬勃发展,并取得了重大的进展,细胞实验室的构建也是各个院校生物学科必备的实验室。细胞实验谨慎复杂,需要的实验设备种类繁多,下面就一些动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要。纯水系统:细胞培养用水一般要求双蒸水,实际上普通蒸馏水经玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水是不能满足要求的,而且水中的内毒素直接参与细胞凋亡,血清中内毒素含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高,会直接导致细胞提前老化。因此建议配置正式的水纯化系统。超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。移液器和细胞培养的大量耗材:细胞实验中有大量频繁的移液操作,因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量极大。除上述仪器外,高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCIH2029细胞系相关产品:16-HBE细胞、CFPAC1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞
SK-MEL-31细胞系相关产品:CHO cell clone K1细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞、PC 61.5.3细胞
GM07404A细胞系相关产品:SNU407细胞、HTori-3细胞、CTLL(2)细胞
H4IIE细胞系相关产品:H-1975细胞、M109细胞、C4I细胞
MG63细胞系相关产品:SW 1271细胞、VP 229细胞、SW 13细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
LLC-WRC 256 epithelioid cellsWalker氏癌肉瘤256瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
BL1339细胞系相关产品:L363细胞、OVISE细胞、H-358细胞
J45.01细胞系相关产品:H-87细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、KYSE0030细胞
HEK-2细胞系相关产品:HCC0366细胞、SUM-102细胞、Namalva细胞
HGMC细胞系相关产品:MFE 296细胞、DSL-6A/C1细胞、OVCAR-8细胞
HEC151细胞系相关产品:Monomac-1细胞、LN-382细胞、253J细胞
CEF细胞系相关产品:Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、343 MG细胞、MALME 3M细胞
HT 144细胞系相关产品:CNE1-LUC细胞、UMC-11细胞、PC-9细胞
A-253细胞系相关产品:RPMI2650细胞、GA-10-Clone-4细胞、SW756细胞
Sp 2817细胞系相关产品:RPMI1846细胞、OUMS27细胞、NCI-BL6细胞
BLO11细胞系相关产品:H508细胞、H522细胞、C918细胞
LLC-WRC 256 epithelioid cellsWalker氏癌肉瘤256瘤细胞系
PC3M细胞系相关产品:BMSC/hBMSCs细胞、KM12SM细胞、PNT-1A细胞
HCC-1359细胞系相关产品:SUM-159PT细胞、NIH:OVCAR-4细胞、Karpas-299细胞
CMT 167细胞系相关产品:LLC-PK(1)细胞、VERO76细胞、RL95-2细胞
H-2330细胞系相关产品:Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
SW-1783细胞系相关产品:FRhK4细胞、CHOK1细胞、U14细胞
NCIH292细胞系相关产品:HS 683T细胞、Beta-TC-6细胞、BRL细胞
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Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞系相关产品:H-1623细胞、H-719细胞、OVSAHO细胞
National Medical Center-Glioma 1细胞系相关产品:HBE 135-E6E7细胞、HSCT6细胞、KYSE 410细胞
NCI-H1184细胞系相关产品:H748细胞、L363细胞、Hs 870.T细胞
C2-C12细胞系相关产品:AQ-Mel细胞、WEHI3细胞、KYSE-450细胞
MDAMB435S细胞系相关产品:Caco-2/BBe 1细胞、TOV21细胞、NCI-SNU-520细胞
Panc3_27细胞系相关产品:PG13细胞、Hs 746.T细胞、SVG p12细胞
PLMVEC细胞系相关产品:JB6 clone 30, subclone 7b细胞、HTh-74细胞、L(TK-)细胞
HCC1008细胞系相关产品:HCC1588细胞、REC细胞、SNU-16细胞
PC 12细胞系相关产品:RPMI-2650细胞、RPMI 6666细胞、SKN-SH细胞
Panc_05_04细胞系相关产品:JIMT1细胞、H2172细胞、McARH7777细胞
BAC1.2F5细胞系相关产品:LAD-2细胞、HBVP细胞、VB细胞
J.E6-1细胞系相关产品:JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞
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BpRcl细胞系相关产品:HTR-8/SV neo细胞、NCI-H508细胞、ARH 77细胞
NCIH1915细胞系相关产品:SW260细胞、293细胞、MDA 435细胞
OCI-LY-18细胞系相关产品:ROS17/2.8细胞、MCA38细胞、HCC-9724细胞
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P30OHK细胞系相关产品:Rat-2细胞、H-4-II-E细胞、SK-MEL-5细胞
HCC-1171细胞系相关产品:MCF-10A细胞、LNCaP.FGC细胞、FDC-P1细胞
NIH:OVCAR3细胞系相关产品:NRK 52E细胞、Epstein-Barr-2细胞、SR细胞
H676细胞系相关产品:HCC38细胞、SKMES-1细胞、BC-025细胞
KPL1细胞系相关产品:HS-940-T细胞、C2BBe1细胞、MV 3细胞
MDA-MB 468细胞系相关产品:U373细胞、SKMEL5细胞、ARPE19细胞
KCL22S细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞
IB-RS-2细胞系相关产品:CNE细胞、RIMEC细胞、MDA-MB-435-S细胞
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211H细胞系相关产品:Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、TO175T细胞、HSC 3细胞
R1800[RA]细胞系相关产品:EFM-192A细胞、NCI H716细胞、NCI-SNU-398细胞
Human podocyte细胞系相关产品:L(TK-)细胞、ECC12细胞、Daoy细胞
OAC-P4C细胞系相关产品:Hut292细胞、Karpas 422细胞、AG06814-M细胞
J774 A.1细胞系相关产品:SNU-1040细胞、F-81细胞、MCA205细胞
OCI-Ly10细胞系相关产品:RIN-m 14B细胞、Hs 578T细胞、P388.D1细胞
SK-MEL 28细胞系相关产品:NS1-Ag4细胞、OSC19细胞、IHC-ST1细胞
Jurkat FHCRC细胞系相关产品:SCC-1395细胞、KMY1022细胞、SNK6细胞
SW1088细胞系相关产品:P3X63NS1细胞、SUDHL-2细胞、SW-1573细胞
LA-N-6(OAN)细胞系相关产品:Mel RM细胞、MHCC97H细胞、NG 108-15细胞
22Rv1细胞系相关产品:MDA.MB.231细胞、GM04680细胞、UT-7细胞
3T3-F442A细胞系相关产品:rRTEC细胞、SK-LU-1细胞、Panc 05.04细胞
NCI-H1793细胞系相关产品:Sol8细胞、Colo-678细胞、H-2135细胞
SKRC-42细胞系相关产品:H-1618细胞、Ra No. 1细胞、NK-92MI细胞
SK-N-SH细胞系相关产品:Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、DMS-79细胞、STC-1细胞
HCE细胞系相关产品:HEC-1-A细胞、SMA560细胞、LUDLU-1细胞
U118细胞系相关产品:HNE-2细胞、GM17346细胞、MRAEC细胞
HuH1细胞系相关产品:NCI-H747细胞、Wien133细胞、AKR细胞
LLC-WRC 256 epithelioid cellsWalker氏癌肉瘤256瘤细胞系
HS-294T细胞系相关产品:HF-91细胞、Hep 2细胞、LIXC002细胞
HuPT4细胞系相关产品:MC-38细胞、CEM-0细胞、Panc 04.03细胞
HOP92细胞系相关产品:MCF.7细胞、NUGC3细胞、251 MG细胞
HEK293细胞系相关产品:U-343-MG细胞、A375S2细胞、MA-c细胞
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