M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮肤细胞系

"M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮肤细胞系
细胞背景资料：黑色素瘤
细胞形态：上皮细胞样
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
Pan02细胞系相关产品：OVCAR.5细胞、JTC-28细胞、EHEB细胞
KG-1细胞系相关产品：SPC-A1细胞、Hs 895.T细胞、AMJ2-C8细胞
MLOY4细胞系相关产品：PC615.3细胞、GM346细胞、GM00346细胞
细胞生长：贴壁
M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮肤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
冷冻细胞解冻程序：依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例，制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类，若因实验需要，必须有所不同时，务必以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清)，对细胞而言差异极大，请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于３７°C水槽中回温，回温后喷以７０%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。取出冷冻管，立即放入３７°C水槽中快速解冻，水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿，否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在１分钟内全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷冻管外部，移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度，于无菌操作台内取１０ml培养基加至T２５或T７５flask中。取出已解冻之细胞悬浮液，缓缓加入T２５或T７５flask内之培养基，混合均匀，放入３７°C，５%CO２培养箱培养。对绝大多数细胞而言，１%以下之冷冻保护剂DMSO，不会对细胞之贴附或活化有不良影响，不需立刻由解冻细胞中去除，待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞，需立即去除DMSO者，则可将解冻后之细胞悬浮液放入５-１０ml培养基中，离心３００xg(约１０００rpm)，５分钟，小心移去上清液，加入适量新鲜培养基，将细胞均匀混合后，转移至培养瓶中，再放入３７°C，５%CO２培养箱培养。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
P3/NS1/Ag4-1细胞系相关产品：2008细胞、AA-Mel细胞、SMMC-7721细胞
CHO K1细胞系相关产品：CAL 78细胞、NCIH1623细胞、NCI-H82细胞
NCIH522细胞系相关产品：Pa16C细胞、CAL 120细胞、OVCAR433细胞
OsA-CL细胞系相关产品：TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞
SHZ-88细胞系相关产品：PF382细胞、NCIH1648细胞、Metastatic Variant 522细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮肤细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
B16/F0细胞系相关产品：P3/ag细胞、SW-839细胞、ATN1细胞
CCC-HPF-1细胞系相关产品：rHSC-99细胞、COLO-205细胞、U138-MG细胞
GM02219D细胞系相关产品：RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞
PNT1-a细胞系相关产品：DHL4细胞、GC-1细胞、MSTO-211细胞
ROS 17/28细胞系相关产品：A-427细胞、BpRcl细胞、Ly19细胞
MRCV细胞系相关产品：NCI-H524细胞、BEP2D细胞、D-283细胞
SJRH-30细胞系相关产品：MC3T3-E1 Subclone 14细胞、746T细胞、SuDHL 4细胞
MALME.3M细胞系相关产品：P3J细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、SP-2细胞
SKLMS-1细胞系相关产品：NTERA2D1细胞、ASPC1细胞、16-HBE14o细胞
OAC-P4C细胞系相关产品：Hut292细胞、Karpas 422细胞、AG06814-M细胞
M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮肤细胞系
AA-Mel细胞系相关产品：SW1463细胞、L 929细胞、HT-1080细胞
EA hy 926细胞系相关产品：GM00637B细胞、SUDHL-6细胞、HS-68细胞
MCAEC细胞系相关产品：GM15452细胞、293T细胞、McA-RH 7777细胞
HB611细胞系相关产品：HTR8/SVneo细胞、Human Kidney-2细胞、HCFB（HCF）细胞
U87细胞系相关产品：PANC1005细胞、ECC10细胞、RCM1细胞
WC00059细胞系相关产品：GM01232细胞、LTEPa2细胞、NCI H157细胞
WC00059细胞系相关产品：GM01232细胞、LTEPa2细胞、NCI H157细胞
87 MG细胞系相关产品：Hs888 Lu细胞、KU.812细胞、HSC-T6细胞
NALM6细胞系相关产品：Ramos (RA)细胞、IPEC-J2细胞、CTV1细胞
RIN14B细胞系相关产品：CFSC-8B细胞、SCC-15细胞、LC-1-sq细胞
P30OHK细胞系相关产品：Rat-2细胞、H-4-II-E细胞、SK-MEL-5细胞
NH-6细胞系相关产品：SKNBE-2细胞、HS0578T细胞、SK-MES1细胞
Verda reno细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 1788细胞、H9c2(2-1)细胞、KG1A细胞
SNU-407细胞系相关产品：HCC-44细胞、SK UT 1细胞、TE-1细胞
Bowes melanoma cells细胞系相关产品：HCC-1187细胞、Panc327细胞、QGY-7701细胞
451Lu细胞系相关产品：NS1-1 Ag4.1细胞、RPMI No. 1846细胞、HCa/16A3-F细胞
SUP T1细胞系相关产品：BT-325细胞、MT-2细胞、SKNF1细胞
HSC-4细胞系相关产品：RPMC细胞、COLO 679细胞、SK-N-BE细胞
B16BL6细胞系相关产品：HEI193细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞、MSF细胞
EVSA/T细胞系相关产品：OCI/AML-5细胞、NCI-H196细胞、A9细胞
OV433细胞系相关产品：HMO6细胞、SH-SY5Y细胞、RSC96细胞
Hs 578Bst细胞系相关产品：HCC1171细胞、Tu686细胞、J82细胞
DMS-273细胞系相关产品：Hs840_T细胞、2780细胞、201T细胞
SCL-II细胞系相关产品：C41细胞、LL/2(LLc1)细胞、CCFSTTG1细胞
OCI/AML-4细胞系相关产品：IGR.OV1细胞、PTK 2细胞、COLO 16细胞
Liver-02细胞系相关产品：MC-4细胞、GM00637F细胞、Ca-Ski细胞
OVCAR 420细胞系相关产品：Panc 02.03细胞、GM01232细胞、Hs675T细胞
U-87MG ATCC细胞系相关产品：BJ [Human fibroblast]细胞、SW 1222细胞、HT-1376细胞
HNE-1细胞系相关产品：SP-2细胞、DMS 79细胞、NCI-SNU-119细胞
95D细胞系相关产品：OCUM-1细胞、C4-2细胞、NTHY-ORI3.1细胞
MDA-435细胞系相关产品：GA-10 (Clone 4)细胞、SK-RC-20细胞、F-36P细胞
SUSM1细胞系相关产品：SW 527细胞、KNS-42细胞、Eca109细胞
NCI-H2286细胞系相关产品：SBC-5细胞、OVCAR.4细胞、NTera2/D1细胞
CNE-2Z细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM35细胞、Line 870 Emory University-4细胞
NPC-TW 01细胞系相关产品：SK-OV-3细胞、V79-4细胞、BLO11细胞
ZR75-1细胞系相关产品：MSB-1细胞、SF126细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞
16-HBEo细胞系相关产品：Normal Rat Kidney-49F细胞、OSC-19细胞、NCIH1915细胞
HPMEC细胞系相关产品：Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞
HPMEC细胞系相关产品：Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞
NCIH661细胞系相关产品：YTMLC-90细胞、H1618细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞
4T1-LUC细胞系相关产品：HEL-92.1.7细胞、BT-325细胞、H650细胞
NCI-H23细胞系相关产品：HEL-92细胞、H676细胞、VSMC细胞
MMAc.SF细胞系相关产品：PIEC细胞、NCIH2452细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞
Det 562细胞系相关产品：Loucy细胞、G402细胞、NCI-H1882细胞
H-838细胞系相关产品：CCLP-1细胞、ACC3细胞、IMR 90细胞
MDA-468细胞系相关产品：HOC-1细胞、SO-Rb 50细胞、TCCPAN2细胞
AMC-HN8细胞系相关产品：Hs746T细胞、LTEP-a-2细胞、PC3M细胞
H-322细胞系相关产品：LOU-NH91细胞、NCI-H125细胞、KLM1细胞
GH 3细胞系相关产品：HLCL9B10细胞、SP-2/0-AG14细胞、SU-DHL2细胞
LTEPsm细胞系相关产品：NCI-H596细胞、ONS76细胞、LC-1/sq细胞
SK MEL 28细胞系相关产品：Fetal Human Colon细胞、NP69细胞、HREC细胞
M20 [Human melanoma] epithelioid cells人胚胎皮肤细胞系
HEK 293-EBNA细胞系相关产品：HIT clone T15细胞、NCIH211细胞、SUM-52-PE细胞
MADB106细胞系相关产品：JEG3细胞、MFE280细胞、J774A.1细胞
CEM C7细胞系相关产品：NPC-TW 039细胞、MDCKII-WT细胞、COLO-679细胞
GM02219C细胞系相关产品：MCF 10A细胞、Line 207细胞、LCLC103H细胞
"