"FHs 74 Int epithelioid cells人小肠正常细胞系
细胞背景资料:小肠
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
H-661细胞系相关产品:PCI-4M细胞、MKN7细胞、HCC1359细胞
L 132细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、MES-13细胞、H1694细胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞系相关产品:NIH/3T3细胞、BV-173细胞、HEK/293细胞
细胞生长:贴壁
FHs 74 Int epithelioid cells人小肠正常细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
冷冻细胞解冻程序:依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例,制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类,若因实验需要,必须有所不同时,务必以缓慢比例渐次改变培养基组成,确定细胞适应后,方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于37°C水槽中回温,回温后喷以70%酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。取出冷冻管,立即放入37°C水槽中快速解冻,水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿,否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后,以70%ethanol擦拭冷冻管外部,移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度,于无菌操作台内取10ml培养基加至T25或T75flask中。取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25或T75flask内之培养基,混合均匀,放入37°C,5%CO2培养箱培养。对绝大多数细胞而言,1%以下之冷冻保护剂DMSO,不会对细胞之贴附或活化有不良影响,不需立刻由解冻细胞中去除,待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞,需立即去除DMSO者,则可将解冻后之细胞悬浮液放入5-10ml培养基中,离心300xg(约1000rpm),5分钟,小心移去上清液,加入适量新鲜培养基,将细胞均匀混合后,转移至培养瓶中,再放入37°C,5%CO2培养箱培养。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NPC-039细胞系相关产品:MCF 7B细胞、PE/CA-PJ-34细胞、Sp2/O-Ag14细胞
DMS273细胞系相关产品:CF PAC-1细胞、CC-LP-I细胞、P-815细胞
MDCK (NBL-2)细胞系相关产品:KMS-26细胞、As-PC1细胞、NCI-H69C细胞
Sp2/0-Ag-14细胞系相关产品:H1404细胞、SW 1463细胞、MCAEC细胞
CCLP-1细胞系相关产品:NPC-TW-039细胞、CORL51细胞、A20细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
FHs 74 Int epithelioid cells人小肠正常细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
COLO679细胞系相关产品:EPC细胞、Hs-940细胞、SCH细胞
HEL-92细胞系相关产品:Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞
MLO-Y4细胞系相关产品:HELF细胞、Hs 832(C).T细胞、Jiyoye (P-2003)细胞
RM-1细胞系相关产品:ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞
Panc 5.04细胞系相关产品:WBF344细胞、CA-OV-3细胞、MESSA Dx5细胞
GAK细胞系相关产品:RSC-364细胞、C-28I2细胞、SVEC4-10细胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞系相关产品:OCLY8细胞、HCC-15细胞、HPAF细胞
NTHY-ORI3.1细胞系相关产品:hEEC细胞、Mv1Lu细胞、HMy2.CIR细胞
COLO320HSR细胞系相关产品:H2110细胞、SuDHL 4细胞、H2073细胞
D341细胞系相关产品:hFOB1.19细胞、CAL-120细胞、KASUMI6细胞
FHs 74 Int epithelioid cells人小肠正常细胞系
ABC-1细胞系相关产品:NCIH1869细胞、L 363细胞、NCIH1930细胞
C6细胞系相关产品:NCIH1975细胞、GNM细胞、MUTZ-3细胞
NPC-TW 039细胞系相关产品:Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、LLC PK1细胞、CAL51细胞
OPM2细胞系相关产品:KP-N-YN细胞、SKRC 39细胞、RSC-364细胞
Vero C1008细胞系相关产品:COLO 206F细胞、SU 86.86细胞、TW01细胞
H676细胞系相关产品:HCC38细胞、SKMES-1细胞、BC-025细胞
LM3细胞系相关产品:HCC1500细胞、UCLA-SO-M14细胞、H-35细胞
MV(4;11)细胞系相关产品:PC12(高分化)细胞、WISH细胞、451-LU细胞
TR-146细胞系相关产品:MDA-231细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、CHO细胞
NCI-H510细胞系相关产品:NCI-H1755细胞、BE(2)M17细胞、BI-Mel细胞
IPLB-SF-21-AE细胞系相关产品:SKMEL24细胞、SCC154细胞、JC细胞
HSC4细胞系相关产品:H1105细胞、mIMCD-3细胞、NSH细胞
H508细胞系相关产品:ADR-RES细胞、U 138 MG细胞、H-1819细胞
SNT8细胞系相关产品:CCD33Co细胞、OCI-LY-10细胞、HP615细胞
NCI-SNU-5细胞系相关产品:HRMC细胞、RIN-14B细胞、THC-8307细胞
Hs940.T细胞系相关产品:293 HEK细胞、UMNSAH-DF 1细胞、IGROV细胞
U-251_MG细胞系相关产品:SKGT4细胞、MDA-MB-134VI细胞、A673细胞
H522细胞系相关产品:HUASMC细胞、JHH-2细胞、Daudi细胞
TKB1细胞系相关产品:Anip[973]细胞、GM05862细胞、NCI-H1694细胞
HuNS1细胞系相关产品:HHFK细胞、MPASMC细胞、ACHN细胞
OVCAR.4细胞系相关产品:CCRF/CEM细胞、BeWo细胞、MDCC MSB1细胞
NSC-34细胞系相关产品:CMK细胞、FRhK-4细胞、SKRC 39细胞
Jurkat-FHCRC细胞系相关产品:SNK-1细胞、SKLMS1细胞、H-508细胞
RH-35细胞系相关产品:H-2452细胞、Psi2-DAP细胞、H498细胞
PLA801-95D细胞系相关产品:SJSA细胞、Panc05.04细胞、MPC 11细胞
MFE 280细胞系相关产品:C57 Mouse Tumor 64细胞、SK ES 01细胞、HCC-1833细胞
MiaPaca.2细胞系相关产品:MGHU1细胞、L-428细胞、MDA-MB-330细胞
SF539细胞系相关产品:K562细胞、SJ-Rh 30细胞、3T3NIH细胞
PC-14细胞系相关产品:SW 982细胞、DV90细胞、C33A细胞
MILE SVEN1细胞系相关产品:3T3-A31细胞、HuH7细胞、IFRS1细胞
NTERA-2细胞系相关产品:TCMK1细胞、FD-LSC-1细胞、NCI-H378细胞
BJAB细胞系相关产品:COLO 320 DM细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞、tdott细胞
Melan-a细胞系相关产品:HCC15细胞、HNE1细胞、HPAF-2细胞
MESSA/Dx5细胞系相关产品:KM12-SM细胞、HLEC-B3细胞、MEG01细胞
LC-1 sq细胞系相关产品:CEM/C1细胞、NCI-H1618细胞、Bac1 2F5细胞
HOS (TE85)细胞系相关产品:H4-IIE-C3细胞、HT-1080细胞、PANC-08-13细胞
Pro-5WgaRI3C细胞系相关产品:NCI-SNU-423细胞、NCIH69细胞、Hs 934.T细胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞系相关产品:Hx-147细胞、H510A细胞、NIH:OVCAR3细胞
COLO 320 DM细胞系相关产品:HT 1197.T细胞、WPMY1细胞、SK-MEL-2-LUC细胞
BHT-101细胞系相关产品:MSTO211H细胞、DV-90细胞、JeKo 1细胞
HCC2157细胞系相关产品:IMR-32细胞、Panc10.05细胞、OV433细胞
Jurkat细胞系相关产品:Pt-K1细胞、ACC2细胞、mRMEC细胞
U-hth74细胞系相关产品:MEL-526细胞、HuT-78细胞、P3HR1细胞
H-157细胞系相关产品:U266 B1细胞、NCI-H1876细胞、Panc10.05细胞
SUM 159细胞系相关产品:C8-D1A细胞、IALM细胞、NCI-H2066细胞
MDAMB435S细胞系相关产品:Caco-2/BBe 1细胞、TOV21细胞、NCI-SNU-520细胞
Blotchy fibroblast-11细胞系相关产品:Mevo细胞、OCI-AML-3细胞、UMC11细胞
JTC-39细胞系相关产品:H460细胞、OS-RC-2细胞、MOLT-4细胞
TALL-104细胞系相关产品:Mino细胞、LTEP-sm 1细胞、HEK-293-EBNA细胞
NR 8383细胞系相关产品:RH-30细胞、SF 539细胞、PLC8024细胞
Pro-Lec1.3C细胞系相关产品:3T3 clone A31细胞、UACC 812细胞、NCI-H1770细胞
FHs 74 Int epithelioid cells人小肠正常细胞系
H2066细胞系相关产品:H889细胞、T-84细胞、PLA802细胞
NB-19细胞系相关产品:HREC细胞、NP69细胞、16-HBE细胞
OKT 3细胞系相关产品:SNU-638细胞、Walker-256-TC细胞、HIBEC细胞
MLO-Y4细胞系相关产品:HELF细胞、HMEC细胞、SKNMC细胞
"