"Ej138 epithelioid cells人膀胱癌细胞系
细胞背景资料:膀胱癌;女性
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
B16BL-6细胞系相关产品:MMQ细胞、Ca 9-22细胞、H1755细胞
H1522细胞系相关产品:Swiss 3T3细胞、AML193细胞、CTLA4Ig-24细胞
SupT1细胞系相关产品:HB611细胞、HCC1171细胞、H4-IIE-C3细胞
细胞生长:贴壁
Ej138 epithelioid cells人膀胱癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Hs 675.T细胞系相关产品:PanC1细胞、KYSE-270细胞、NHEK细胞
Hep 3B2细胞系相关产品:JKT-1细胞、CCD-841-CoN细胞、769-P细胞
Hu-P-T3细胞系相关产品:OCM1细胞、NCI-H28细胞、526mel细胞
GalK 1细胞系相关产品:Homo sapiens No. 578, breast cells细胞、HEB细胞、WiDr细胞
CX-1细胞系相关产品:MIA-Pa-Ca-2细胞、BV-2细胞、GM03320细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Ej138 epithelioid cells人膀胱癌细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
U266 B1细胞系相关产品:NCIH727细胞、NHA细胞、H920细胞
BE(2)M-17细胞系相关产品:P3X63 AG8-653细胞、GM00637B细胞、50.B1细胞
Fao细胞系相关产品:RPMI #8226细胞、Keio University-19-19细胞、BEL 7402细胞
343MG细胞系相关产品:Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞
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CV-1 in Origin Simian-7细胞系相关产品:MCF-7/ADR细胞、U937细胞、Vero C1008细胞
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Ej138 epithelioid cells人膀胱癌细胞系
HN13细胞系相关产品:16-HBEo细胞、B16 F10细胞、R 1610细胞
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H-125细胞系相关产品:U937细胞、MV4II细胞、P388细胞
H-1792细胞系相关产品:Detroit 562细胞、NTERA-2 clone D1细胞、HuPT3细胞
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H-87细胞系相关产品:Panc813细胞、Karpas299细胞、ZR75-30细胞
CORL279细胞系相关产品:MILE SVEN1细胞、SR细胞、U87 MG细胞
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PC-3M 2B4细胞系相关产品:KYSE510细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞
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COLO 741细胞系相关产品:NCI-H820细胞、hs 68细胞、LA-795细胞
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MC57细胞系相关产品:NB19-RIKEN细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、NPA细胞
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3AA细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、LN299细胞、F9细胞
H-1781细胞系相关产品:RD-2细胞、CHG-5细胞、HSC4细胞
DMS-153细胞系相关产品:H2052_MM细胞、OV 2008细胞、BJAB细胞
HSC(Human Schwann)细胞系相关产品:CCC-HHM-2细胞、SupB15W细胞、GM17219细胞
CII细胞系相关产品:MLFC细胞、bEnd3细胞、HEL92.1.7细胞
MDAMB435细胞系相关产品:NCIH647细胞、PTK1细胞、UACC 812细胞
UK Pan-1细胞系相关产品:HPMEC细胞、DAN-G细胞、RBE4细胞
Cates 1B细胞系相关产品:KP2细胞、67NR细胞、A549细胞
CL11细胞系相关产品:HuH6细胞、P3-X63.Ag8.653细胞、HL7702细胞
DH 82细胞系相关产品:A549/DDP细胞、MEG01细胞、IMR 32细胞
RC92A细胞系相关产品:NCIH1648细胞、CCC-HEH-2细胞、HUT 125细胞
NIT-1细胞系相关产品:NPA 87细胞、Co-115细胞、HCC202细胞
NK10a细胞系相关产品:HuTu 80细胞、UMUC14细胞、SN12PM6细胞
CoCL2细胞系相关产品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、143BTK-细胞、J774A.1细胞
P3/NSI/1-AG4-1细胞系相关产品:SW 1088细胞、Alexander细胞、CAL-148细胞
CHO K1细胞系相关产品:CAL 78细胞、NCIH1623细胞、NCI-H82细胞
SW 626细胞系相关产品:LC-1/sq细胞、HK-2 [Human kidney]细胞、159 PT细胞
Ej138 epithelioid cells人膀胱癌细胞系
H-735细胞系相关产品:P30/Ohkubo细胞、LS 1034细胞、IPAM-WT细胞
T47D:A细胞系相关产品:PL-45细胞、C17细胞、PCI:SG231细胞
SNU216细胞系相关产品:MyLa 2059细胞、CHO-ori细胞、WEHI3细胞
Fao细胞系相关产品:RPMI #8226细胞、HUT 28细胞、GLRK 13细胞
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