"UPCI-SCC-154 epithelioid cells人舌鳞癌细胞系
细胞背景资料:舌鳞癌;男性;HPV6转化
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
Mv1.Lu细胞系相关产品:MDA-MB-361细胞、H1975细胞、P3X63细胞
RBL 1细胞系相关产品:DMS79细胞、NIH-OVCAR-3细胞、HeLa S-3细胞
L(TK-)细胞系相关产品:MC57G细胞、SUNE-1细胞、RKO-AS-45-1细胞
细胞生长:贴壁
UPCI-SCC-154 epithelioid cells人舌鳞癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HCEC-12细胞系相关产品:GM-637细胞、HSF2细胞、Normal Rat Kidney-49F细胞
58F细胞系相关产品:BNL CL2细胞、H1395细胞、NCI-H2135细胞
Swiss/3T3细胞系相关产品:Human Fetal Thymocyte-8810细胞、LL/2 (LLC1)细胞、NCI-H2085细胞
Y3-Ag 1.2.3细胞系相关产品:0V-1063细胞、DU_145细胞、ECC-10细胞
NP-69细胞系相关产品:H-4-II-E细胞、Huh7.5细胞、NCIH1105细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
UPCI-SCC-154 epithelioid cells人舌鳞癌细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
C3H/10T1/2 CL8细胞系相关产品:MT4细胞、NUGC3细胞、MCF.10A细胞
NCIH187细胞系相关产品:J774.A1细胞、CMT.64细胞、HMEC1细胞
MCA38细胞系相关产品:U-hth74细胞、DMS 273细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞
H735细胞系相关产品:Hs 934.T细胞、IPLB-Sf21AE细胞、CAL 12细胞
MOLP-2细胞系相关产品:NCI-H157细胞、H-510A细胞、HCC-2935细胞
BC3H1细胞系相关产品:T9细胞、OC 316细胞、NS-20Y细胞
RC-4B/C细胞系相关产品:SW-948细胞、BA/F3细胞、SK Mel28细胞
Hs 274细胞系相关产品:CFPAC-1细胞、TK-10细胞、AML 12细胞
PC 61细胞系相关产品:CCF-STTG1细胞、Huh-7细胞、H-524细胞
Molm 13细胞系相关产品:NTERA2-cloneD1细胞、PNT1/A细胞、SK-NSH细胞
UPCI-SCC-154 epithelioid cells人舌鳞癌细胞系
SR786细胞系相关产品:NOR-10细胞、NCIH1944细胞、639-V细胞
NCIH2073细胞系相关产品:BCECs细胞、L23/P细胞、ECC1细胞
Reuber H35细胞系相关产品:TC-1[JHU-1]细胞、M-1 myeloid leukemia细胞、JM细胞
Psi-2-DAP细胞系相关产品:EAC-E2G8细胞、IEC-6细胞、OKa-C-1细胞
HME1细胞系相关产品:MC 116细胞、LNCaP clone FGC细胞、NCIH1666细胞
PL5细胞系相关产品:PSN-1细胞、JM-Jurkat细胞、SK-N-FI细胞
PL5细胞系相关产品:PSN-1细胞、JM-Jurkat细胞、SK-N-FI细胞
N1E115细胞系相关产品:ST-2细胞、Calu-6细胞、Kit225 K6细胞
HS-729细胞系相关产品:Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、SKNMC细胞、RPMI 6666细胞
MMAc-SF细胞系相关产品:HEB细胞、Kit-225-K6细胞、MB157细胞
NT2/D1细胞系相关产品:H-2170细胞、KYSE0410细胞、Y79细胞
WM451细胞系相关产品:KMB 17细胞、EFM19细胞、OCI/AML3细胞
HL-7702细胞系相关产品:Ly3细胞、H508细胞、BPH1细胞
GLAG-66细胞系相关产品:Molm 13细胞、RPMI7666细胞、SV-HUC-1细胞
HRPEpiC细胞系相关产品:HDQ-P1细胞、RSC-364细胞、QBI-HEK 293A细胞
786O细胞系相关产品:OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞
Neuro2a细胞系相关产品:DKMG细胞、IPAM-WT细胞、H-1651细胞
NCI-H1651细胞系相关产品:Caco-2/ATCC细胞、NCI/ADRRES细胞、ARO 81-1细胞
Kuramochi细胞系相关产品:OCI-AML-4细胞、OP9细胞、SNU-C1细胞
VMM5细胞系相关产品:NuTu 19细胞、HCC9724细胞、EM3细胞
HK-2 [Human kidney]细胞系相关产品:University of Arizona Cell Culture-812细胞、KBM-7/Hap8细胞、H-522细胞
GM02131细胞系相关产品:NCTC-3960细胞、Rat Fetal Lung-6细胞、LICR-HN6细胞
OV1/P细胞系相关产品:CA46细胞、MDAMB435细胞、CCD18细胞
H4IIE细胞系相关产品:H-1975细胞、M109细胞、C4I细胞
HEC1B细胞系相关产品:PTK 2细胞、MIMVEC细胞、OE-21细胞
Kasumi-1细胞系相关产品:NCIH1623细胞、HL-60 Clone 15细胞、NCI-H1155细胞
NCIH2009细胞系相关产品:FD-LSC-1细胞、CCD1095Sk细胞、CT26.WT细胞
SK-N-F1细胞系相关产品:Hs 274.T细胞、IM-95细胞、SW 1271细胞
SJRH-30细胞系相关产品:MC3T3-E1 Subclone 14细胞、746T细胞、SuDHL 4细胞
Laboratory of Allergic Diseases 2细胞系相关产品:SU-DHL-1细胞、Hep 3B2_1-7细胞、GM-215细胞
McA-RH7777细胞系相关产品:H-1373细胞、SUM-149细胞、SMC-1细胞
CCRF-SB细胞系相关产品:RT-BM 1细胞、NS1-1 Ag4.1细胞、C12细胞
SBC-3细胞系相关产品:HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞
LAD 2细胞系相关产品:GC-1细胞、SN4741细胞、Hs 746T细胞
RGB细胞系相关产品:RL细胞、LTEP a2细胞、SK-MES细胞
HEK 293-H细胞系相关产品:Hs870T细胞、KYSE510细胞、PLA801-95C细胞
NCIH2073细胞系相关产品:BCECs细胞、L23/P细胞、ECC1细胞
SNU-886细胞系相关产品:SuDHL 2细胞、RBL 1细胞、MIN-6细胞
Hs 274细胞系相关产品:CFPAC-1细胞、TK-10细胞、AML 12细胞
MHCC 97细胞系相关产品:LL2细胞、EL-4细胞、MDA-kb2细胞
HMEL细胞系相关产品:Strain V细胞、HEK 293A细胞、H1184细胞
SU-DHL-5细胞系相关产品:WiDr-TC细胞、PC3-M细胞、MCA 38细胞
ID8/MOSEC细胞系相关产品:QGP1细胞、NCIN87细胞、ADR-RES细胞
SCL I细胞系相关产品:UCW 100细胞、SF-295细胞、Centre Antoine Lacassagne-33细胞
A431/P细胞系相关产品:NCIH2135细胞、MCF12F细胞、LMTK-细胞
QGP-1细胞系相关产品:BALB 3T3 clone A31细胞、HSC-1细胞、JB6 Cl 30细胞
EMT-6细胞系相关产品:CTLL2细胞、MCM细胞、GA-10细胞
QBC(939)细胞系相关产品:HSC(Human Schwann)细胞、ARPE-19细胞、MuM-2C细胞
CL1.0细胞系相关产品:COR-L 105细胞、M14-MEL细胞、MMAc-Serum Free细胞
SK-NM-C细胞系相关产品:HUVSMC细胞、WM 2664细胞、SO-Rb 50细胞
MEF细胞系相关产品:OKAC1细胞、SNT-8细胞、C8-D1A细胞
UPCI-SCC-154 epithelioid cells人舌鳞癌细胞系
HuPT4细胞系相关产品:MC-38细胞、Loucy细胞、SJSA1细胞
Sci-1细胞系相关产品:Anip-973细胞、WM-239-A细胞、639-V细胞
DMS-79细胞系相关产品:U031细胞、751-NA细胞、NCI-H157细胞
MCA38细胞系相关产品:U-hth74细胞、X63Ag8-653细胞、HANK-1细胞
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