"B16-BL6 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：黑色素瘤；雄性；C５７BL/６
细胞形态：上皮细胞样
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
DI TNC1细胞系相关产品：H-2172细胞、HREC细胞、ATDC5细胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞系相关产品：H128细胞、HASMC细胞、NCI-H1299细胞
H1436细胞系相关产品：Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞
细胞生长：贴壁
B16-BL6 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
PAN 02细胞系相关产品：MFM-223细胞、MTEC1细胞、RAW-264.7细胞
WEHI 231细胞系相关产品：Tn 5B1-4细胞、H1793细胞、H647细胞
C666-1细胞系相关产品：AM细胞、WI-38细胞、AU-Mel细胞
EFM-19细胞系相关产品：SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞
PA317细胞系相关产品：R 2 C细胞、Panc04.03细胞、H3396细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
B16-BL6 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度(最高不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
SKMEL28细胞系相关产品：Panc 05.04细胞、Pt K1细胞、PC3M-1E8细胞
MOLP8细胞系相关产品：D341MD细胞、LX-2细胞、McCoy B细胞
MDBK (NBL-1)细胞系相关产品：H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞
JJN3细胞系相关产品：DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞
SUDHL-4细胞系相关产品：NCI H345细胞、NW-MEL-38细胞、H-676B细胞
NCIH128细胞系相关产品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、EBTr (NBL-4)细胞、G361mel细胞
A-2058细胞系相关产品：U-2-OS细胞、MC-3T3细胞、PK15细胞
EVSAT细胞系相关产品：MB49细胞、HCC0044细胞、PVEC细胞
HS578T细胞系相关产品：MDA-468细胞、EAhy 926细胞、LA-N-6(OAN)细胞
NCIH2196细胞系相关产品：HCT/Taxo1细胞、CAOV4细胞、RKO_AS45细胞
B16-BL6 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
HTR-8/SVneo细胞系相关产品：DV-90细胞、hCMEC/D3细胞、PC-12细胞
NCI-441细胞系相关产品：SGC-996细胞、HCC-1569细胞、A 253细胞
138MG细胞系相关产品：TYKnu细胞、HEK293-EBNA1细胞、DrG细胞
MEG01细胞系相关产品：OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞
PC 61 5.3细胞系相关产品：NE1-E6E7细胞、ST2细胞、HT 1197细胞
HGBEC细胞系相关产品：BEAS-2B细胞、MGH-U1 (EJ)细胞、LNCaP C4-2B细胞
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HepG2-luc细胞系相关产品：SKNO1细胞、TE 671细胞、NRK clone 49F细胞
Hs 766细胞系相关产品：SUM52PE细胞、A172细胞、HF-91细胞
HL 60细胞系相关产品：SW 948细胞、B-104细胞、RERFLCMS细胞
MJ细胞系相关产品：RN细胞、NCI-SNU-119细胞、Jurkat-FHCRC细胞
SNU-216细胞系相关产品：MHCC97-L细胞、JVM-3细胞、M-NFS-60细胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞系相关产品：THP 1细胞、IGR-OV1细胞、BHK-21细胞
H2107细胞系相关产品：38C-13细胞、HIT T-15细胞、KB细胞
NCI/ADRRES细胞系相关产品：118 MG细胞、WiDr/S细胞、ACCM细胞
U266 B1细胞系相关产品：NCIH727细胞、NHA细胞、H920细胞
MADB106细胞系相关产品：JEG3细胞、SUM159PT细胞、Hs604T细胞
M4e细胞系相关产品：GBCSD细胞、JeKo 1细胞、H676B细胞
P3JHR-1细胞系相关产品：SV40-MES13细胞、NCI-H920细胞、SKNBE细胞
H2195细胞系相关产品：NCI-SNU-449细胞、COLO679细胞、NCI H716细胞
CAL 62细胞系相关产品：NTC200细胞、TB1 Lu细胞、SP2-0-Ag14细胞
ARO 81-1细胞系相关产品：FHCRC-11细胞、MV-3细胞、CNE-2Z细胞
He La细胞系相关产品：C81-61细胞、EST50细胞、M210B4细胞
MDA MB 231细胞系相关产品：L5178Y-R细胞、MX1细胞、E.G7-OVA细胞
SW-1990细胞系相关产品：H-2342细胞、NB19-RIKEN细胞、SKNEP细胞
SK_N_BE2C细胞系相关产品：MSTO-211 H细胞、NCI-H865细胞、NCIH2126细胞
N2a细胞系相关产品：MPP89细胞、Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、SNU16细胞
HPAF-II细胞系相关产品：Reh细胞、DMS114细胞、A375-SM细胞
OVCAR-8细胞系相关产品：578T细胞、Epstein-Barr-1细胞、BJA-B1细胞
HIT T15细胞系相关产品：SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞
U266B1细胞系相关产品：OV433细胞、EO771细胞、OV1063细胞
LN299细胞系相关产品：Rat1细胞、ROS 17/28细胞、EB-1细胞
Jurkat E6.1细胞系相关产品：H-1869细胞、H2291细胞、NCI522细胞
NCI-H1437细胞系相关产品：H2141细胞、MV 3细胞、KBM-7/Hap8细胞
ssMCF7细胞系相关产品：Mc Coy细胞、NCI-H2106细胞、BEL/FU细胞
LCLC-103H细胞系相关产品：Mouse Forestomach Carcinoma细胞、RPMI 7666细胞、PA-TU-8988S细胞
Metastatic Variant-522细胞系相关产品：NCI-H2291细胞、GH 3细胞、Granta 519细胞
D-324MED细胞系相关产品：SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞
H-2452细胞系相关产品：S-16细胞、hOMF细胞、BCaP 37细胞
MHCCLM3细胞系相关产品：HCC0095细胞、H2110细胞、SNU-719细胞
MAD109细胞系相关产品：Karpas422细胞、S16细胞、Hs-940细胞
HTR8/SVneo细胞系相关产品：COS7细胞、P19细胞、Hela-Ap-1细胞
VP267细胞系相关产品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、COV-434细胞、H2029细胞
OCI/AML-5细胞系相关产品：EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞
Mono Mac 1细胞系相关产品：BHP-10细胞、KE 37细胞、Leukemia 1210细胞
HCC70细胞系相关产品：NCIH1819细胞、KHYG-1细胞、MCF-10 Attached细胞
TF1细胞系相关产品：NB1-RGB细胞、SHEP1细胞、BetaTC6细胞
T2 (174 x CEM.T2)细胞系相关产品：Bowes melanoma cells细胞、NCIH2347细胞、GP2d细胞
FL62891细胞系相关产品：PCI-SG231细胞、SNU-601细胞、SNU-668细胞
GM12878细胞系相关产品：KM-12细胞、COR-L26细胞、HDLM2细胞
SKMEL3细胞系相关产品：H146细胞、NCI-ADR-RES细胞、COV434细胞
B16-BL6 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
NCI-H226细胞系相关产品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H820细胞、RA细胞
SCC154细胞系相关产品：Plaepi 34细胞、LAPC-4细胞、C3A细胞
ECV 304细胞系相关产品：SK-MEL24细胞、Leukemic 1210细胞、10RGB细胞
MDBK (NBL-1)细胞系相关产品：H378细胞、Ly7细胞、THLE-3细胞
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