"YES-2 epithelioid cells人食管鳞癌细胞系
细胞背景资料:食管鳞癌;男性
细胞形态:上皮细胞样
细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻,细胞内外的水分会很快形成冰晶,从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高,pH值改变,部分蛋白质由于上述原因而变性,引起细胞内部空间结构紊乱,溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶,使细胞内结构成分造成破坏,线粒体肿胀,功能丢失,并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变,使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多,随冷冻温度的降低,冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤,而致细胞死亡。因此,细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分,减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质分子量小,溶解度大,易穿透细胞,可以使冰点下降,提高细胞膜对水的通透性,且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外,减少胞内形成冰结晶的机会,从而减少冰晶对细胞的损伤。
SRA01/04 (HLE)细胞系相关产品:AMO-1细胞、SBC3细胞、3-LL细胞
U343细胞系相关产品:HEK AD293细胞、FO [Mouse myeloma]细胞、SKNBE(2)细胞
SNU-520细胞系相关产品:H-1648细胞、H-460细胞、TE-3A细胞
细胞生长:贴壁
YES-2 epithelioid cells人食管鳞癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HuH28细胞系相关产品:IHH4细胞、LS 513细胞、PTK-2细胞
Panc 04.03细胞系相关产品:Mono-Mac-1细胞、T2(174 x CEM.T2)细胞、L428细胞
D283-MED细胞系相关产品:MBVP细胞、CAL 78细胞、WM115-mel细胞
IGR-OV1细胞系相关产品:H1734细胞、EMT6细胞、MFD-1细胞
ETCC-007细胞系相关产品:HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
YES-2 epithelioid cells人食管鳞癌细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因比较复杂,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浑细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟,转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离;rpm为离心机每分钟的转数;RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
MLMEC细胞系相关产品:U-266细胞、GDM-1细胞、HuT-78细胞
GM07404D细胞系相关产品:H1838细胞、NS20Y细胞、KP2细胞
MCF 10A细胞系相关产品:OCI-Ly01细胞、HBdSMC细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞
SNU-1040细胞系相关产品:SCL-2细胞、MSC细胞、SW-1353细胞
COLO 320细胞系相关产品:THLE-2细胞、UM-UC-3细胞、NCI-H1876细胞
118MG细胞系相关产品:SUP-B1细胞、Detroit 562细胞、LM1细胞
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Hs-600-T细胞系相关产品:H-1781细胞、TMK1细胞、FM88细胞
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YES-2 epithelioid cells人食管鳞癌细胞系
Hs27F细胞系相关产品:LWnt3A细胞、IPLB-Sf21-AE细胞、HLEpiC细胞
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MX1细胞系相关产品:BXPC3细胞、ASH-3细胞、Lu-65细胞
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174xCEM.T2细胞系相关产品:NCI-H446细胞、GA10细胞、H-460细胞
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SW626细胞系相关产品:XWLC-05细胞、VMRC-LCD细胞、HCV29细胞
NCI-H78细胞系相关产品:SK LU 1细胞、PK-136细胞、HEL-1细胞
MDAMB435S细胞系相关产品:Caco-2/BBe 1细胞、TOV21细胞、NCI-SNU-520细胞
253J-BV细胞系相关产品:VK2/E6E7细胞、RPE-1细胞、Michigan Cancer Foundation-7细胞
253J-BV细胞系相关产品:VK2/E6E7细胞、RPE-1细胞、Michigan Cancer Foundation-7细胞
D 407细胞系相关产品:HCT 15细胞、293 HEK细胞、ECC12细胞
U-343 MG细胞系相关产品:MGH-U3 (RN)细胞、H735细胞、H1385细胞
NCI-H711细胞系相关产品:P3/X63/Ag8细胞、BEL-7405细胞、EoL-1-cell细胞
High 5细胞系相关产品:PANC 327细胞、MA104细胞、MKN7细胞
Hs578Bst细胞系相关产品:RCC10 RGB细胞、A427细胞、EFM192C细胞
Kit225细胞系相关产品:SK-N-BE(2)-M17细胞、CAL-27细胞、NCIH2107细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞系相关产品:GLRK 13细胞、EJ1细胞、HTR-8/SVneo细胞
C22 (Clara)细胞系相关产品:EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞
Jeko1细胞系相关产品:Mel-RM细胞、MMVECs细胞、ChaGo-K1细胞
LA-N-6细胞系相关产品:NCIH1781细胞、HLEC-SRA 01/04细胞、KLN 205细胞
Mouse INsulinoma 6细胞系相关产品:U251MG细胞、H1436细胞、WI38细胞
U343MG细胞系相关产品:JM-Jurkat细胞、RPMI 1788细胞、U87-MG细胞
YES-2 epithelioid cells人食管鳞癌细胞系
COLO 16细胞系相关产品:EFM192C细胞、MSTO-211H细胞、MES23.5细胞
HeLa 229细胞系相关产品:NTERA-2cl.D1细胞、CHO-S细胞、BALL-1细胞
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MCF 10A细胞系相关产品:OCI-Ly01细胞、HR8348细胞、NGP细胞
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