"OLN-93 epithelioid cells大鼠胶质细胞系
细胞背景资料:胶质细胞;自发永生;Wistar
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
OCI AML3细胞系相关产品:SW 839细胞、MOLP-8细胞、OVISE细胞
U266-B1细胞系相关产品:PANC0403细胞、SK-MEL-5细胞、Super Tube细胞
Ramos(RA1)细胞系相关产品:IPEC-J2细胞、SK-Mel 2细胞、COLO320/DM细胞
细胞生长:贴壁
OLN-93 epithelioid cells大鼠胶质细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品:SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞
H1688细胞系相关产品:T/G HA VSMC细胞、KLM1细胞、HEL-299细胞
NCTC929细胞系相关产品:OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞
Mouse Bladder Tumor line-2细胞系相关产品:NPA87-1细胞、Porcine Kidney-15细胞、IPLB-SF-21细胞
DU4475细胞系相关产品:LNCaP细胞、MT-4细胞、KTC1细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
OLN-93 epithelioid cells大鼠胶质细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
SJ-Rh 30细胞系相关产品:LLC PK1细胞、H716细胞、RKN细胞
PANC-1细胞系相关产品:HIEC-6细胞、HIT T15细胞、Leghorn Male Hepatoma cell line细胞
MCF/Adr细胞系相关产品:BE(2)M-17细胞、BEL-7404细胞、CCC-ESF-1细胞
KG1A细胞系相关产品:Colon-26细胞、UWB1.289+BRCA1细胞、Anip973细胞
293c18细胞系相关产品:NCIH23细胞、UO31细胞、BC-023细胞
P3-x63-Ag8 653细胞系相关产品:H23细胞、NCIH2126细胞、MV3细胞
HEC-251细胞系相关产品:GM17346细胞、SV40-MES13细胞、MDA-MB361细胞
MDA-MB 453细胞系相关产品:LoVo细胞、NCI-H727细胞、2780CP细胞
PL-12细胞系相关产品:MOLT-3细胞、NCIH747细胞、NIE-115细胞
YTMLC-90细胞系相关产品:ONS76细胞、CEM.C1细胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞
OLN-93 epithelioid cells大鼠胶质细胞系
BPH-1细胞系相关产品:H711细胞、HEK;293细胞、Hs-746T细胞
SO-RB50细胞系相关产品:U118-MG细胞、NP69SV40T细胞、H-660细胞
HCC1438细胞系相关产品:SK-N-BE-2细胞、OVCA-433细胞、A-673细胞
WM 239-A细胞系相关产品:BCP1细胞、H-2106细胞、TE353.SK细胞
GM3570细胞系相关产品:HS-729细胞、OCILY10细胞、GM02132细胞
MIA PaCa-2细胞系相关产品:NCI H82细胞、SP2细胞、DoTc2-4510细胞
MIA PaCa-2细胞系相关产品:NCI H82细胞、SP2细胞、DoTc2-4510细胞
BNL-HCC细胞系相关产品:Walker 256细胞、Vero细胞、QGY细胞
H22-H8D8细胞系相关产品:CHL1细胞、NCI-H69C细胞、HS-294-T细胞
ES2细胞系相关产品:OCI AML5细胞、ChaGo-K1细胞、32D/cl3细胞
SW1783细胞系相关产品:HCT-GEO细胞、HuH-1细胞、LNCaP-C4-2细胞
NCI-H125细胞系相关产品:J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞
HCC0038细胞系相关产品:U-373MG细胞、Hs688(A)T细胞、J-774细胞
KRC/Y细胞系相关产品:VMM5细胞、GT1-1细胞、P31/FUJ细胞
H2291细胞系相关产品:RGC-6细胞、H841细胞、HCV-29细胞
NG 108-15细胞系相关产品:GM03569B细胞、MDA-MB-436细胞、A431细胞
HLE-SRA-01/04细胞系相关产品:Panc2.03细胞、CEMC7细胞、NTera 2细胞
NR8383细胞系相关产品:HAPI细胞、WM 451-Lu细胞、HEK293细胞
MES-23.5细胞系相关产品:P3J.HR1K细胞、TMD-8细胞、RT4细胞
Michigan Cancer Foundation-12A细胞系相关产品:NBL-12细胞、HSC/mHSC细胞、CAL27细胞
HCC-2108细胞系相关产品:Human Embryonic Skin细胞、N-9细胞、KYSE-520细胞
NK62a细胞系相关产品:OV-1063细胞、ZYM-SVEC01细胞、PG-LH7细胞
MB231细胞系相关产品:MKN 45细胞、KNS-81细胞、NRK 49F细胞
mIMCD3细胞系相关产品:BC-023细胞、CEM C7细胞、CNE-1细胞
Douglas Foster-1细胞系相关产品:NCI-H2227细胞、APRE-19细胞、NIH:OVCAR-3细胞
BC-022细胞系相关产品:EL-4细胞、COLO 206F细胞、RPMI-7666细胞
SW626细胞系相关产品:XWLC-05细胞、VMRC-LCD细胞、HCV29细胞
HCC-1954BL细胞系相关产品:Walker256-TC细胞、WSUDLCL2细胞、MEF细胞
Ls-174-T细胞系相关产品:H87细胞、MC-CAR细胞、RMS13细胞
LN382细胞系相关产品:526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
CAMA细胞系相关产品:CAL 51细胞、TSU-Pr1细胞、H929细胞
AML-12细胞系相关产品:HEL 299细胞、H1672细胞、CEF细胞
OCI AML5细胞系相关产品:H-1693细胞、Hs-688A-T细胞、X63Ag8.653细胞
Mo 59J细胞系相关产品:GA-10 clone 4细胞、HuTu 80细胞、Ca759细胞
SKMEL-1细胞系相关产品:Walker256细胞、ST 486细胞、MC3T3-E1细胞
H1648细胞系相关产品:HFSF细胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、HBE细胞
NCIH1155细胞系相关产品:LS 1034细胞、IEC18细胞、Opossum Kidney细胞
CAL 39细胞系相关产品:MM1S细胞、NCI-H1522细胞、MMAc.SF细胞
EJ1细胞系相关产品:SUDHL2细胞、OVCA 433细胞、SW-1463细胞
SAS细胞系相关产品:GA-10-Clone-4细胞、NPA细胞、H-650细胞
NCIH1755细胞系相关产品:FET细胞、RGM-1细胞、MILE SVEN1细胞
IMR-90细胞系相关产品:LC1细胞、WILL2细胞、MIN6细胞
MHCC 97-H细胞系相关产品:NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞
SUPM2细胞系相关产品:GM05887A细胞、JAR细胞、Tu177细胞
JVM-3细胞系相关产品:KYSE180细胞、HEL92.1.7细胞、Tca8113细胞
KTCTL140细胞系相关产品:H-2009细胞、Evsa-T细胞、COLO 678细胞
A427细胞系相关产品:CCD 841 CoN细胞、SW 954细胞、RH-35细胞
Colon26细胞系相关产品:ABE8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
B16 F1细胞系相关产品:JROECL33细胞、H-1703细胞、LC-MS细胞
32Dcl3细胞系相关产品:NIH3T3细胞、A 2780 CP细胞、WPMY-1细胞
H-64细胞系相关产品:IOSE-80细胞、RDES细胞、HPASMC细胞
OLN-93 epithelioid cells大鼠胶质细胞系
H-2170细胞系相关产品:WILL-2细胞、Y-79细胞、RN-c细胞
MA-104细胞系相关产品:Rin-M-5F细胞、HNSC细胞、SU-DH-L5细胞
HT-55细胞系相关产品:BT-474细胞、COR-L88细胞、TE9细胞
MCF/Adr细胞系相关产品:BE(2)M-17细胞、BMSCs(mBMSCs)细胞、MKN45细胞
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