"HT115 epithelioid cells人结肠癌细胞系
细胞背景资料：结肠癌
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
GM03569细胞系相关产品：UCLA NPA-87-1细胞、NCIH3255细胞、BV2细胞
GTL16细胞系相关产品：NCI-H1184细胞、H-1341细胞、MBVP细胞
PC10细胞系相关产品：MIMVEC细胞、BNCL2细胞、NCI-H2106细胞
细胞生长：贴壁
HT115 epithelioid cells人结肠癌细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Hs852细胞系相关产品：FDCP1细胞、OCI-AML4细胞、PC-3M细胞
NP-69细胞系相关产品：H-4-II-E细胞、Huh7.5细胞、NCIH1105细胞
Hs 832(C).T细胞系相关产品：H-2085细胞、NW38细胞、HCC-202细胞
S-16细胞系相关产品：Hs578Bst细胞、Vero 76 clone E-6细胞、QGY 7701细胞
JM-Jurkat细胞系相关产品：PFSK-1细胞、TE85细胞、Hs274T细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HT115 epithelioid cells人结肠癌细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
OCI AML2细胞系相关产品：MKN-45细胞、SUNE1细胞、GM00346B细胞
U031细胞系相关产品：HEL299细胞、NCIH1385细胞、CCF-STTG1细胞
HBZY-1细胞系相关产品：OCI-AML-3细胞、HSC1细胞、P-388细胞
TE 32.T细胞系相关产品：SF 767细胞、WEHI-3B细胞、C1498细胞
MDA-MB 231细胞系相关产品：HCT 116细胞、UM-UC-1细胞、HCC1806细胞
OPM2细胞系相关产品：KP-N-YN细胞、SKRC 39细胞、RSC-364细胞
MIA-PaCa-2细胞系相关产品：Dakiki细胞、HSC3细胞、HCPEpiC细胞
VA-ES-BJ细胞系相关产品：SK-Col-1细胞、SW480细胞、H.Ep. No. 2细胞
HUC-1细胞系相关产品：NCI-H187细胞、Astrocyte type I clone细胞、TE-12细胞
B16BL6细胞系相关产品：HEI193细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞、MSF细胞
HT115 epithelioid cells人结肠癌细胞系
HCC1187细胞系相关产品：ARIP细胞、BNL.CL2细胞、MM6细胞
HPAF-I细胞系相关产品：KM.12细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞、Hs 832(C).T细胞
HRIF细胞系相关产品：CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
Huh 7.5.1细胞系相关产品：LM(TK-)细胞、SuDHL 2细胞、UM2细胞
SW579细胞系相关产品：Human ErythroLeukemia细胞、HS766T细胞、Ej138细胞
Z138细胞系相关产品：NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞
Z138细胞系相关产品：NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞
X63.Ag8.653细胞系相关产品：NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞
HCV-29细胞系相关产品：E.L.4细胞、NCI-H-295细胞、Hmy.2 CIR细胞
OV3121细胞系相关产品：BCP-1细胞、NCI-BL1339细胞、Hs294细胞
DMS114细胞系相关产品：LL/2细胞、Nb 2细胞、HCC-9204细胞
SNU869细胞系相关产品：Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、MNNG/HOS细胞、A2780CP70细胞
TE-9细胞系相关产品：DMS-79细胞、MCF/Adr细胞、ECC10细胞
HCC1954BL细胞系相关产品：HA1800细胞、S-16细胞、LOU-NH-91细胞
BEL 7402细胞系相关产品：HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞
NPA细胞系相关产品：Rabbit Kidney 13细胞、JB-6细胞、GM16136细胞
MMVECs细胞系相关产品：MFE 280细胞、MOLT16细胞、JIMT1细胞
FLC7细胞系相关产品：GM00346B细胞、OVCAR8细胞、Nb2细胞
RC13细胞系相关产品：JF305细胞、BE2-C细胞、HSC5细胞
DoTc2 4510细胞系相关产品：COLO201细胞、SACC-83细胞、T-47-D细胞
Line 522细胞系相关产品：H4IIEC3细胞、F442-A细胞、hMSC-BM细胞
LLC-MK2细胞系相关产品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、PC3细胞、L-M (TK-)细胞
MADB 106细胞系相关产品：HCT FET细胞、KMS18细胞、KMS18细胞
MB 157细胞系相关产品：UPCI:SCC090细胞、Z-138细胞、Hepatoma 22细胞
H460细胞系相关产品：Karpas 299细胞、87MG细胞、MA 104细胞
GBC-SD细胞系相关产品：Alexander细胞、Hx-147细胞、PL5细胞
Hs688(A)T细胞系相关产品：WM266-4细胞、mousepodocyte细胞、HTR8/SVneo细胞
C3H/10T1/2细胞系相关产品：JIMT-1细胞、SF763细胞、RTMC细胞
Neuro-2a细胞系相关产品：HBSMC细胞、IOSE80细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞
Rat 1细胞系相关产品：HMrSV5细胞、NCI-H1792细胞、ACT-1细胞
MCF 7细胞系相关产品：293-GP细胞、MyLa2059细胞、NCI-H2444细胞
BxPC-3细胞系相关产品：RPMI-7666细胞、M 1细胞、H-345细胞
NCI-H102细胞系相关产品：KHYG1细胞、B/C3T3细胞、WIL2 S细胞
SKMEL1细胞系相关产品：HL-60 Clone 15细胞、HCC1954BL细胞、CHO-Lec1细胞
253J细胞系相关产品：GM3569细胞、Mouse Podocyte Clone-5细胞、RT4P细胞
BL6细胞系相关产品：UO-31细胞、MC-38细胞、NIH:OVCAR-8细胞
VK2/E6E7细胞系相关产品：ESC细胞、H660细胞、C17细胞
MDA415细胞系相关产品：H2135细胞、A 375细胞、HPDLF细胞
OCI-LY-18细胞系相关产品：ROS17/2.8细胞、MCA38细胞、HCC-9724细胞
Roswell Park Memorial Institute 1788细胞系相关产品：EM3细胞、SGC7901/DDP细胞、C3H10T1/2细胞
HEC-1A细胞系相关产品：Oka-C1细胞、SK Col 1细胞、OEC33细胞
MiaPaca.2细胞系相关产品：MGHU1细胞、L-428细胞、MDA-MB-330细胞
NCIH1435细胞系相关产品：CHG-5细胞、293-GP细胞、JIII细胞
NCI-H64细胞系相关产品：HepaRG细胞、D-324 Med细胞、McA-RH7777细胞
UMC-11细胞系相关产品：Human Embryo Kidney-2细胞、TSCCa细胞、SNU-620细胞
Colon 38细胞系相关产品：SKMEL-31细胞、Ls-174-T细胞、SkMel31细胞
CAL-51细胞系相关产品：WEHI 164细胞、HMVEC细胞、MC3T3细胞
HSAS1细胞系相关产品：hEM15A细胞、NSH细胞、rHSC-99细胞
KNS81细胞系相关产品：3T3-J2细胞、LS-513细胞、LUDLU 1细胞
SKO-007细胞系相关产品：HCC1833细胞、NBL-5细胞、HKBML细胞
CPA 47细胞系相关产品：HCC1954-BL细胞、CEM T4细胞、FHL-124细胞
HT115 epithelioid cells人结肠癌细胞系
BDCM细胞系相关产品：OCI/AML2细胞、Plaepi 34细胞、SUIT-2细胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞系相关产品：UACC 893细胞、PTK1细胞、HR-1细胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞系相关产品：PC 12细胞、MONO-MAC 6细胞、KYSE0030细胞
HBZY 1细胞系相关产品：HOS-MNNG细胞、SK 1细胞、UPCISCC090细胞
"
