PK-15 epithelioid cells猪肾细胞系

"PK-15 epithelioid cells猪肾细胞系
细胞背景资料：PK-１５细胞建系于１９５５（Stice,E）。是PK-１a细胞的克隆系。该细胞系可用于多种病毒的增值及特性研究。另外，电镜观察发现，PK-１５细胞内有C-型病毒颗粒存在，是研究C-型病毒的材料。
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
NCI-SNU-1细胞系相关产品：HCC-78细胞、MGSMC细胞、MH7A细胞
KPNRTBM1细胞系相关产品：32D clone3细胞、H 9细胞、CP-70细胞
RCC23细胞系相关产品：L 929细胞、BHK-21细胞、HCC-1438细胞
细胞生长：贴壁
PK-15 epithelioid cells猪肾细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-０.２%LH培养液或MEM培养液或１９９等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（１万单位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、胶塞、吸管(１０ml、１m１）、细胞吹打管（２０ml）(以上用具需经１２１℃至少１５分钟高压灭菌)、C０２ 孵箱、超净台、倒置显微镜、４℃、-２０℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培养液１００ml内，加入灭活小牛血清１０m１，庆大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸钠溶液３ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面１-２次，每次１０m１，弃去洗液，向细胞瓶内加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入１０m１细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于３７±１℃孵箱培养。约２～４天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
hTERTHME1细胞系相关产品：SK-MEL-3细胞、PaCa2细胞、LY-R细胞
BJ [Human fibroblast]细胞系相关产品：H-2591细胞、PGBE1细胞、JCA-1细胞
D6P2T细胞系相关产品：HFL1细胞、SAS细胞、Hs 675.T细胞
EJ细胞系相关产品：Hepa-RG细胞、SNT8细胞、CORL105细胞
SUPB15细胞系相关产品：SN12C-PM6细胞、HRPEpiC细胞、A 2058细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PK-15 epithelioid cells猪肾细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：上皮细胞样
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
HS-5细胞系相关产品：HEK293-F细胞、HEK293细胞、TN5B14细胞
HPC-Y5细胞系相关产品：GM02131A细胞、H1694细胞、IEC 6细胞
H-1436细胞系相关产品：PNT1/A细胞、SUM-52-PE细胞、Hca-F细胞
CCD1095Sk细胞系相关产品：NCI-H711细胞、ETCC-007细胞、MM134细胞
PJ34细胞系相关产品：P3HRI细胞、SNU-878细胞、HOP 62细胞
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PK-15 epithelioid cells猪肾细胞系
SKUT-1细胞系相关产品：H-498细胞、Kit225细胞、Ra #1细胞
VMCUB-1细胞系相关产品：Huh 7.5.1细胞、NB1RGB细胞、NOR10细胞
beta TC6细胞系相关产品：RPMI1788细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞、STTG1细胞
H2073细胞系相关产品：253J B-V细胞、CSQT-2细胞、McA-RH8994细胞
COLO 320 DM细胞系相关产品：HT 1197.T细胞、WPMY1细胞、SK-MEL-2-LUC细胞
Colo699细胞系相关产品：H-2330细胞、H-661细胞、HCT116/L细胞
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HCC-827细胞系相关产品：MCF-7B细胞、NCI-H1341细胞、SW 527细胞
Ca759细胞系相关产品：130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞
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Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞系相关产品：NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞
1.1B4细胞系相关产品：LN-18细胞、GM637A细胞、Human Kidney-2细胞
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NCI-H727细胞系相关产品：T-ALL 1细胞、NCI-H1993细胞、KG-1细胞
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H-2081细胞系相关产品：PK 15细胞、NuTu-19细胞、HCC-1569细胞
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AU 565细胞系相关产品：Det 562细胞、OCM1细胞、WC00097细胞
T-HSC细胞系相关产品：SNU-119细胞、Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、ROS17/2.8细胞
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TR146细胞系相关产品：NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、T98 G细胞、TF-1细胞
H-1703细胞系相关产品：Porcine Kidney-13细胞、IOSE 80细胞、U343MG细胞
COLO394细胞系相关产品：373 MG细胞、BE2-M17细胞、RGM1细胞
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SNU601细胞系相关产品：KYSE0030细胞、WiDr-TC细胞、KPNRTBM1细胞
WPE-int细胞系相关产品：HCC-2108细胞、DMS-53细胞、BIC细胞
N1E115细胞系相关产品：ST-2细胞、Calu-6细胞、Kit225 K6细胞
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AN3 CA细胞系相关产品：BV-2细胞、Ishikawa细胞、COLO 679细胞
PK-15 epithelioid cells猪肾细胞系
HBVSMC细胞系相关产品：CAL-27细胞、Kelly细胞、OCI AML4细胞
Panc 2.03细胞系相关产品：CC-LP-1细胞、U-343细胞、NUGC-4细胞
OVCAR.8细胞系相关产品：H-446细胞、L-132细胞、NT2D1细胞
H1436细胞系相关产品：Hep 2细胞、CCD 1112SK细胞、Bowes melanoma cells细胞
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